去磷酸化RB蛋白在乳腺癌细胞凋亡中的作用

目的 :研究去磷酸化RB蛋白表达在人乳腺癌细胞凋亡中的作用。 方法 :以乳腺癌细胞株MCF 7/S(化疗敏感细胞株 )和MCF 7/Adr(耐多柔比星细胞株 )为研究对象 ,采用免疫细胞化学法检测多柔比星 (ADR)作用前、后RB蛋白的表达状态 ;应用流式细胞术检测ADR诱导乳腺癌细胞凋亡程度。 结果 :加ADR前两种细胞胞核中的磷酸化RB蛋白均为阳性 ,去磷酸化RB蛋白均为阴性。经不同浓度ADR处理后 ,随着其浓度的增加 ,MCF 7/S细胞去磷酸化RB蛋白表达量逐渐增高 ,而MCF 7/Adr细胞去磷酸化RB蛋白表达量无明显增高。流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期 ,结果表明ADR诱导MCF 7/S细胞凋亡作用比MCF 7/Adr强 (P <0 .0 1)。 结论 :去磷酸化RB蛋白表达与MCF 7/S细胞凋亡呈正相关 ,而与MCF

人乳腺癌细胞凋亡与去磷酸化RB蛋白的关系

目的 :研究乳腺癌细胞凋亡与去磷酸化RB蛋白的关系。方法 :以乳腺癌细胞株MCF 7/S(化疗敏感细胞株 )和MCF 7/ADR(耐多柔比星细胞株 )为研究对象 ,用MTT比色法检测乳腺癌细胞的化疗敏感性 ;采用免疫细胞化学法检测多柔比星 (ADR)作用前后RB蛋白的表达状态 ;应用流式细胞术检测ADR诱导乳腺癌细胞凋亡程度。结果 :ADR能抑制敏感细胞MCF 7/S增殖 ,半数抑制浓度 (IC50 )为 0 .12 8μg/ml,而对应的耐药细胞MCF 7/ADRIC50值为 10 .89μg/ml,MCF 7/S细胞较MCF 7/ADR细胞对ADR敏感 86倍。加ADR前两种细胞胞核中的磷酸化RB蛋白均为阳性 ,去磷酸化RB蛋白均为阴性。经不同浓度ADR处理后 ,随着ADR浓度的增加 ,MCF 7/S细胞去磷酸化RB蛋白表达量逐渐增高 ,而MCF 7/ADR细胞去磷酸化RB蛋白表达量无明显增高。流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期 ,结果表明ADR诱导MCF 7/S细胞凋亡作用比MCF 7/ADR强 (P <0 .0 1)。结论 :乳腺癌MCF 7/S细胞凋亡与去磷酸化RB蛋白表达呈正相关 (P <0 .0 5 ) ,而MCF 7/ADR细胞凋亡与去磷酸化RB无明显相关 (P >0 .0 5 )。

阿霉素对人乳腺癌细胞凋亡及去磷酸化RB蛋白表达的影响

目的 :探讨阿霉素 (ADR)体外诱导人乳腺癌化疗敏感细胞 (MCF 7 S)凋亡与去磷酸化RB蛋白表达之间的关系。方法 :应用MTT比色法检测ADR对体外培养的MCF 7 S细胞增殖抑制作用 ,同时应用末端标记 (TUNEL)法观测ADR对MCF 7 S细胞凋亡程度的影响。采用免疫细胞化学法检测去磷酸化RB蛋白的表达水平。结果 :ADR抑制MCF 7 S细胞增殖呈剂量依赖性 ,半数抑制浓度 (IC50 )为0 .12 8mg·L-1;ADR作用组MCF 7 S细胞的凋亡率(apoptoticrate ,AR)为 0 .2 6 1,较对照组 (0 .0 4 5 )明显增高 (P <0 .0 1) ;ADR作用组MCF 7 S细胞的去磷酸化RB蛋白表达量MOD(阳性细胞平均光密度 )×area(阳性面积相对比 )均数是 987± 2 0 7,较对照组132± 32显著增高 (P <0 .0 1) ;ADR能促进MCF 7 S细胞内去磷酸化RB蛋白的表达。在ADR作用组 ,MCF 7 S细胞的凋亡率与去磷酸化RB蛋白表达量呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论 :ADR抑制MCF 7 S细胞增殖和诱导MCF 7 S细胞凋亡可能与细胞内去磷酸化RB蛋白表达水平有关。

人乳腺癌细胞凋亡与去磷酸化Rb蛋白和PCNA的关系

目的:研究乳腺癌细胞凋亡与去磷酸化Rb蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)的关系。方法:应用MTT比色法检测多柔比星(又名阿霉素,ADR)对体外培养的MCF-7/S细胞增殖抑制作用,应用流式细胞术检测ADR诱导乳腺癌细胞凋亡,采用免疫组织化学法检测ADR作用前后去磷酸化Rb蛋白和PCNA的表达。结果:ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性;ADR作用组MCF-7/S细胞的凋亡率及去磷酸化Rb蛋白的表达量与对照组相比明显增高(P<0.01);PCNA阳性表达率与对照组相比明显降低(P<0.01)。结论:ADR作用组,MCF-7/S细胞的凋亡率(AR)与去磷酸化Rb蛋白的表达量呈正相关,与增殖细胞核抗原的阳性表达率呈负相关。

去磷酸化RB蛋白表达对阿霉素诱导MCF-7/S细胞凋亡的影响

目的检测经阿霉素(ADR)处理的人乳腺癌MCF-7/S细胞的凋亡率(AR)及去磷酸化RB蛋白表达的变化,以探讨ADR诱导细胞凋亡的可能机理。方法将体外培养的MCF-7/S细胞分为实验组(以不同浓度ADR处理细胞)及对照组(以等体积的生理盐水处理细胞);应用MTT比色法检测ADR对MCF-7/S细胞的抑制率(IR);应用流式细胞术检测实验组和对照组细胞的AR;采用S-P免疫组化染色法检测ADR作用后去磷酸化RB蛋白表达的变化。结果ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性,IC50为0.128mg/L;0.25、2、5μg/mlADR处理的MCF-7/S细胞的AR分别为0.171、0.184、0.259,而对照组MCF-7/S细胞的AR为0.045,两者比较,有非常显著性差异(P<0.01);5μg/mlADR实验组MCF-7/S细胞的去磷酸化RB蛋白的表达量为986.8±207.4,而对照组为131.7±31.9,两者比较,有非常显著性差异(P<0.01);5μg/mlADR实验组MCF-7/S细胞的AR与其去磷酸化RB蛋白的表达量呈正相关(γ=0.998,P=0.037)。结论ADR能抑制MCF-7/S细胞增殖并诱导其凋亡,其机理可能与去磷酸化RB蛋白表达水平上调有关。

去磷酸化RB蛋白表达状况对阿霉素诱导人乳腺癌细胞凋亡和抑制其增殖的关系

目的探讨去磷酸化RB蛋白表达状况对阿霉素(ADR)诱导人乳腺癌细胞(MCF-7/S)凋亡和抑制其增殖的影响。方法应用MTT比色法检测ADR对MCF-7/S细胞增殖抑制作用,同时应用末端标记(TUNEL)法测定ADR诱导MCF-7/S细胞凋亡程度。采用免疫细胞化学法检测去磷酸化RB蛋白的表达状况。结果ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性,半数抑制浓度(IC50)为0.128mg.L-1;ADR作用组MCF-7/S细胞的凋亡率及去磷酸化RB蛋白的表达量分别与对照组细胞相比明显增高。结论去磷酸化RB蛋白的表达量与ADR抑制MCF-7/S细胞增殖和诱导MCF-7/S细胞凋亡呈正相关。

雄激素缺乏小鼠体内活性氧和Rb蛋白表达的变化及对心脏衰老的影响

目的探讨小鼠体内雄激素水平缺乏对心脏衰老的影响。方法实验分为正常C57BL/6 J雄鼠组(n=8)、去势组(n=8)、睾丸女性化鼠(tfm)组(n=10)、衰老组(n=8)。测定各组血清睾酮浓度,分离心肌组织测定组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平以及W estern印迹测定去磷酸化Rb蛋白表达量。结果 与正常组相比,衰老组、去势组和tfm组血清睾酮浓度明显下降(P<0.01);心肌组织中SOD活性下降(P<0.05,P<0.01)、MDA含量增加(P<0.01);去磷酸化Rb蛋白表达量增加(P<0.01)。与衰老组相比,去势组和tfm组SOD活性、MDA含量及去磷酸化Rb蛋白表达量差异无统计学意义。结论体内雄激素水平缺乏可能通过增加活性氧水平(ROS)及Rb蛋白表达导致小鼠心肌组织衰老。

阿霉素对人乳腺癌细胞凋亡和增殖的影响

[目的]检测阿霉素(ADR)对体外人乳腺癌化疗敏感细胞(MCF-7/S)凋亡和增殖的影响,并探讨其可能的作用机理。[方法]应用MTT比色法检测ADR对体外培养的MCF-7/S细胞增殖抑制作用,应用流式细胞术检测ADR诱导乳腺癌细胞凋亡,采用免疫细胞化学法检测ADR作用前后去磷酸化Rb蛋白和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。[结果]ADR抑制MCF-7/S细胞增殖,呈剂量依赖性;ADR组MCF-7/S细胞的凋亡率、磷酸化Rb蛋白的表达量与对照组相比明显增高(P<0.01);PCNA阳性表达率与对照组的相比明显降低(P<0.01)。在ADR组,MCF-7/S细胞的凋亡率(AR)与去磷酸化Rb蛋白的表达量呈正相关,与增殖细胞核抗原的阳性表达率呈负相关。[结论]ADR诱导MCF-7/S细胞凋亡并抑制MCF-7/S细胞增殖可能与其上调去磷酸化Rb蛋白和下调细胞内增殖细胞核抗原表达水平有关。

雄激素缺乏对雄性小鼠主动脉增龄性变化的影响

目的探讨雄激素缺乏对C57BL/6J雄鼠主动脉血管壁组织增龄性变化的影响。结论 24只8周龄C57BL/6J小鼠随机分为正常组(n=8)和去势组(n=8),另外8只C57BL/6J小鼠作为自然衰老组饲养18个月,测定各组血清睾酮浓度,并分离小鼠主动脉测定丙二醛(maleic dialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的浓度,Western-blot测定去磷酸化Rb蛋白表达量以及提取主动脉线粒体DNA,用巢氏PCR技术分析线粒体DNA缺失突变率。结果与正常组相比,去势组血清睾酮浓度明显下降[(1.05±0.53)ng/mlvs(8.67±0.97)ng/ml,P<0.01];MDA浓度升高[(1.55±0.43)nmol/mgprotvs(2.42±0.41)nmol/mgprot,P<0.01];SOD浓度降低[(27.92±2.28)U/mlvs(17.09±1.71)U/ml,P<0.01],线粒体DNA缺失突变的突变率增加[(18.1713±2.4317)%vs(36.8475±3.3365)%,P=0.029];去磷酸化Rb蛋白表达量增加[(0.12±0.06)vs(0.36±0.07),P=0.001]。去势组与自然衰老组相比,以上衰老标志物差异均无统计学意义(P>0.05)。结论雄激素缺乏的小鼠主动脉组织衰老进程加快,内源性生理剂量的睾酮浓度能延缓雄性小鼠主动脉的衰老。