去细胞光氧化牛颈静脉血管片内膜光化学接枝CD34抗体的制备及初步评价

目的:用光交联剂SANPAH将不同浓度鼠抗人CD34抗体接枝于经过去细胞和光氧化后的牛颈静脉表面,明确接枝鼠抗人CD34抗体的最佳反应摩尔比和最佳浓度。方法:实验于2006-06/08在中南大学湘雅二医院生物材料实验室完成。按4个不同摩尔比(1∶0,1∶10,1∶20,1∶50),SANPAH和4个不同浓度[0.665μmol/L(100mg/L),1.33μmol/L(200mg/L),6.65μmol/L(1g/L),13.3μmol/L(2g/L)]鼠抗人CD34抗体进行反应后,经紫外线照射光化学接枝于经过去细胞和光氧化后的牛颈静脉上,各组进行快速冰冻切片,滴加FITC标记的羊抗鼠IgG,然后在荧光显微镜下观察不同摩尔比和浓度反应结合的荧光效果,从而初步推断出最佳的反应和结合的摩尔比和浓度。结果:随着鼠抗人CD34抗体的浓度的升高,荧光整体上是越来越强,但是当浓度高于6.65μmol/L时,荧光差别不是很明显;当二者的反应摩尔比为1∶20时,荧光最强。结论:最佳的鼠抗人CD34抗体和SANPAH反映接枝的浓度是6.65μmol/L,最佳的摩尔比是1∶20。

玻璃化深低温法与去细胞光氧化技术制备同种异体小动脉体内性能比较

目的:通过兔异体颈动脉旁路移植模型,对玻璃化深低温及去细胞光氧化交联处理的兔颈动脉进行体内性能比较,评价两种血管作为临床异体小血管替代物的可行性。方法:将36只SPF级纯种兔随机分成两组,分别予以玻璃化深低温处理的兔颈动脉及去细胞光氧化处理的兔颈动脉行异体颈动脉移植。实验动物分别饲养观察1周、2周和4周后,观察移植血管的通畅情况及内膜增生情况。结果:超声检查发现术后4周去细胞光氧化组的累计通畅率显著高于玻璃化深低温组(P<0.05)。HE染色显示玻璃化深低温组术后免疫反应表现比较严重。去细胞光氧化组术后内皮细胞则生长良好,炎性细胞浸润少。Ⅷ因子染色显示,术后4周玻璃化深低温处理组内皮细胞有不同程度的破坏;而去细胞结合光氧化组内皮生长良好。通过图像分析发现,移植后1周两组血管内/中膜比差异无统计秀而意义(P>0.05),术后2周及4周内膜两组血管内/中膜比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:体内性能方面,去细胞光氧化技术制备同种异体小动脉生物稳定性、抗血栓性及内膜增生情况均要优于玻璃化深低温处理的异体兔颈动脉,但同样也存在瘤样扩张,内膜增生等不足。