去细胞神经移植物重建面神经缺损的研究进展

面神经损伤是较常见的周围神经损伤类型之一,面神经缺损的重建是亟待解决的重要问题。作为近年新兴的神经修复材料,去细胞神经移植物已应用于面神经修复的研究中,并取得了一系列进展。去细胞神经保留的基膜结构和细胞外基质除支撑作用外,还可以招募细胞或诱导细胞分化。去细胞技术的改进可以使神经移植物具有更好的生物活性和组织相容性。本文对去细胞技术和去细胞神经在面神经修复中的研究进展进行综述,以期为今后该领域的研究提供基础。

灌注法构建小肠黏膜全层去细胞外基质

背景:对于解剖层次复杂的细胞外基质,单纯浸泡法则很难达到理想的去细胞效果。目的:观察灌注法去细胞技术制备小肠黏膜全层去细胞外基质的效果。方法:采用灌注法去细胞技术,经成年雄性新西兰大白兔小肠黏膜上动脉灌注去离子剂后处理获得小肠黏膜全层去细胞外基质。采用MTT法检测小肠黏膜全层去细胞外基质浸提液(实验组)或含体积分数20%小牛血清的DMEM(对照组)与1月龄新西兰大白兔骨髓间充质干细胞共培养后的细胞相对增殖率。结果与结论:①大体观察:小肠黏膜上动脉经灌注30min后变得苍白透明,经2h灌注后肠段变得苍白剔透,清楚可见脉管纹理。②组织学与扫描电镜观察:灌注法构建的小肠黏膜全层去细胞外基质的去细胞程度均匀,胶原纤维未受损,孔隙多,孔隙率为(86.72±2.98)%。③MTT检测实验:培养2,4,7d,实验组细胞A值明显高于对照组细胞A值(P<0.05),且实验组细胞相对增殖率均>1。表明采用灌注法构建小肠黏膜全层去细胞外基质可操作性强,安全性好,且小肠黏膜全层去细胞外基质对骨髓间充质干细胞无毒性,并有一定的促生长作用。

去细胞组织工程化神经支架的制备与形态学研究

目的 探讨如何去除人类长段粗大神经中的细胞。为构建人类组织工程化神经提供具有仿生结构的支架。 方法 取 4段长 10cm、直径 6mm人的胫神经 ,其中 3段用 3 %三硝基甲苯和4%脱氧胆酸钠分别萃取 1、2和 3次 ,在萃取神经和未萃取神经的中段取材 ,行HE染色、砂罗铬花青染色和S 10 0免疫组化染色 ,在光镜和电镜下观察神经萃取前后形态学的变化。 结果 用三硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取后 ,胫神经内的细胞消失 ,而纤维性支架结构与未经萃取的神经相仿 ,电镜下可见萃取后的神经由空的神经基底膜管和管之间的胶原纤维构成。随着萃取次数的增加 ,神经内残留的S 10 0蛋白显著减少 ,但反复萃取后神经的支架结构受破坏。 结论 用三硝基甲苯和脱氧胆酸钠萃取2次可去除人体长段、粗大神经的细胞而保留完整的神经基底膜管和纤维支架结构 ,可能是制备具有仿生结构的人类组织工程化神经支架较为理想的方法。