去脂软肝方对高脂诱导大鼠脂肪肝血管性血友病因子作用的实验研究

目的探讨去脂软肝方对高脂诱导脂肪肝大鼠肝组织血管性血友病因子的影响作用。方法高脂饮食复制大鼠脂肪肝模型,将实验鼠随机分为三组:正常组,模型组,去脂软肝方组。去脂软肝方组予去脂软肝方药液灌胃(1 mL/200 g)共12周;HE染色观察肝脏脂肪变性情况;测定大鼠血清血脂、肝脂、血浆血小板聚集率及肝组织血管性血友病因子(vWF)。结果 12周末模型组大鼠血脂[血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)]水平比正常组高,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠肝组织匀浆(肝脏TC、TG)与比正常组高,差异有统计学意义(P<0.05);去脂软肝方组血清脂质和肝组织脂质水平比模型组低,差异有统计学意义(P<0.05);模型组大鼠血小板聚集率比正常组高,差异有高度统计学意义(P<0.01);模型组大鼠肝脏组织中vWF比正常组高,差异有高度统计学意义(P<0.01);去脂软肝方组血浆血小板聚集率变化及肝组织vWF比模型组低,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论去脂软肝方能明显改善高脂诱导脂肪肝大鼠血脂、肝脂及肝组织脂肪变性。减少vWF分泌、抑制血小板聚集、减轻血管及肝窦内皮细胞损伤可能是其作用机制之一。

去脂软肝方对NASH大鼠NLRP3炎症小体及相关因子表达的影响

目的:观察去脂软肝方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用及对NLRP3炎症小体的影响。方法:36只大鼠随机分为正常组,模型组,去脂软肝方低、中、高剂量组和辛伐他汀组,每组6只。正常组用普通饲料饲养,其余各组给予高脂饲料饲养14周复制NASH大鼠模型,造模的同时予相应的药物进行干预。全自动生化仪检测大鼠血清中ALT、AST、TC、TG、LDL-C、HDL-C含量,GPO-PAP法检测肝脏TC、TG含量,HE染色及油红O染色镜下观察大鼠肝组织病理改变,实时荧光定量PCR和免疫组化二步法分别检测NLRP3、Caspase-1 mRNA和蛋白表达水平,ELISA检测肝脏中IL-1β、IL-18含量。结果:与模型组比较,去脂软肝方干预后大鼠肝组织的脂质沉积和炎症细胞浸润程度减轻,中、高剂量组血清ALT、AST、TC、TG、LDL-C及肝脏TC、TG含量均显著下降(P<0.01,P<0.05),各剂量组HDL-C含量显著升高(P<0.01),中、高剂量组NLRP3、Caspase-1 mRNA及蛋白表达水平均显著下降(P<0.01,P<0.05),中、高剂量组肝脏IL-1β和IL-18表达水平均显著降低(P<0.01)。结论:去脂软肝方可下调NASH模型大鼠NLRP3炎症小体及下游炎症因子的表达,减轻肝脏脂肪变性和炎症反应。

去脂软肝方对非酒精性脂肪性肝炎大鼠TLR4/NF-κB通路的影响

目的基于TLR4/NF-κB通路研究去脂软肝方对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用。方法40只雄性SD大鼠适应性饲养1周,随机分为正常组、模型组、辛伐他汀组、去脂软肝方高、低剂量组,每组8只,正常组普通饲料喂养,其余4组高脂饲料喂养,造模的同时给药干预。10周后检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、脂多糖(LPS)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及肝脏LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α水平;苏木精-伊红(HE)染色、油红O染色观察肝脏组织病理变化;RT-qPCR检测肝脏Toll样受体4(TLR4)mRNA表达情况;免疫组化检测肝脏TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、ALT、AST、LDL-C、LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α及肝脏LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α水平均显著升高(P<0.01),血清HDL-C水平显著降低(P<0.01);肝组织出现明显的脂肪变性及炎性病变;肝脏TLR4 mRNA表达水平显著升高(P<0.01);肝脏TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,去脂软肝方高、低剂量组血清TC、TG、LDL-C、LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α及肝脏IL-1β、IL-6水平均显著降低(P<0.01),高剂量组血清HDL-C水平显著升高(P<0.01),低剂量组血清ALT水平显著降低(P<0.01);肝组织脂肪变性和炎性病变明显减少;肝脏TLR4 mRNA表达水平显著降低(P<0.01);肝脏TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论去脂软肝方可能通过调控TLR4/NF-κB通路,下调肝脏炎症水平,对NASH起防治作用。

去脂软肝方对早期脂肪肝大鼠血脂及血液流变学的影响

目的:通过研究去脂软肝方对早期脂肪肝血脂及血液流变学各项指标的影响,从血液流变学角度探讨早期脂肪肝与血瘀证的关系。方法:大鼠随机分为正常组、模型组及用药组,采用高脂饮食法复制非酒精性脂肪肝大鼠模型。模型组及用药组喂高脂饲料,正常对照组给予普通饮食,用药组每日去脂软肝方药液灌胃,检测各组大鼠血清和肝组织TC、TG及血液流变学指标。结果:和模型组相比较,用药后早期脂肪肝大鼠血脂及血液流变学各项指标均较模型组降低(P<0.05)。结论:去脂软肝方对早期脂肪肝血脂代谢异常有改善并能抑制因血脂升高引起的一系列血液流变学指标的改变。

基于NLRP3炎症小体探讨肝龙胶囊联合去脂软肝方用药对NASH大鼠的防治作用

目的:探讨肝龙胶囊联合去脂软肝方用药对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝炎(NASH)大鼠NLRP3炎症小体的影响。方法:40只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组、辛伐他汀组、肝龙胶囊组、联合用药组,每组8只。正常组给予普通饲料,其余组给予高脂饲料建立NASH模型。14周后取材,测定血清生化指标(ALT、AST、TC、TG、HDL-C、LDL-C)、肝脏炎症因子(IL-1β、IL-18)水平,采用HE染色和油红O染色的方法观察肝脏组织病理学变化,RT-PCR、免疫组化检测肝组织NLRP3炎症小体mRNA和蛋白水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝指数及ALT、TC、LDL-C、IL-1β、IL-18、NLRP3炎症小体mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05,P<0.01),肝组织出现显著的细胞脂肪变性及空泡样变;与模型组比较,各药物组肝指数及ALT、TC、LDL-C、IL-1β、IL-18、NLRP3炎症小体mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),脂肪变性和炎症反应减轻;与辛伐他汀组比较,肝龙胶囊组LDL-C水平显著降低(P<0.05),联合用药组TC、LDL-C水平均显著降低(P<0.05,P<0.01);与肝龙胶囊组比较,联合用药组TC、IL-18、NLRP3炎症小体蛋白水平均显著降低(P<0.05,P<0.01),脂肪变性和炎症反应减轻。结论:肝龙胶囊对高脂饮食诱导的NASH大鼠具有防治作用,联合去脂软肝方用药效果更显著,其作用机制可能与下调NLRP3炎症小体的表达有关。