参红通络颗粒对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块内细胞凋亡的影响及其抗动脉粥样硬化作用机制

目的:探讨参红通络颗粒对载脂蛋白E基因缺陷(ApoE^(-/-))小鼠血脂水平、主动脉粥样硬化斑块及斑块内细胞凋亡的影响,阐明参红通络颗粒抗动脉粥样硬化的作用机制。方法:选取无特异病原(SPF)级6周龄雄性ApoE^(-/-)小鼠40只,适应性喂养1周后,按随机数字表法分为正常对照组、模型组、低剂量中药治疗组和高剂量中药治疗组,每组10只。正常对照组给予普通饲料,其余各组小鼠通过喂饲高脂饲料建立小鼠动脉粥样硬化模型,造模成功后,低和高剂量中药治疗组小鼠分别给予参红通络颗粒5.06和10.12g·kg^(-1)·d-1灌胃治疗6周。6周后腹腔麻醉下摘眼球取血,测定各组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;分离主动脉弓,行HE染色,观察各组小鼠主动脉粥样硬化斑块形态并计算斑块面积;TUNEL法检测小鼠主动脉粥样硬化斑块内细胞凋亡情况,计算凋亡指数;免疫组织化学染色法检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果:低剂量中药治疗组小鼠血清TG水平明显低于模型组(P<0.05),低和高剂量中药治疗组小鼠血清HDL-C水平明显高于模型组(P<0.05或P<0.01);高剂量中药治疗组小鼠血清TG和HDL-C水平均明显高于低剂量中药治疗组(P<0.05)。与模型组比较,低和高剂量中药治疗组小鼠主动脉粥样硬化斑块面积明显缩小(P<0.01),主动脉粥样斑块内细胞凋亡指数明显降低(P<0.01),主动脉粥样斑块内Bcl-2蛋白表达水平明显降低、Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:参红通络颗粒能够显著升高ApoE^(-/-)小鼠血清HDL-C水平,并通过调控Bcl-2、Bax蛋白表达抑制细胞凋亡,从而有效抑制动脉粥样斑块进展。

参红通络颗粒对实验性心肌梗死大鼠VEGF及PDGF表达量的影响

目的观察参红通络颗粒对心肌梗死后大鼠血管内皮生长因子(VEGF)及血小板衍化生长因子(PDGF)表达的影响。方法健康Wistar大鼠正常喂养1周,建立大鼠心肌梗死模型后,随机分为冠心舒通胶囊高、低剂量组(A、B),阳性药物对照组(贝复济与肝素对照组,C),模型对照组(D)及假手术组(E)5组,每组15只。连续给药4周后处死大鼠,取梗死边缘区心肌组织,进行总RNA抽提,RT-PCR法检测心梗边缘区VEGF、PDGF mRNA的表达。结果与E组相比,其他各组VEGF水平明显升高(P<0.001);与D组相比,C组、A组和B组VEGFmRNA水平明显升高(P<0.05);A组、B组及C组3组组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。与E组相比,其他各组的PDGF mRNA水平明显升高(P<0.05);与D组比较,C组和A组PDGF mRNA水平明显升高(P<0.05),且C组PDGF mRNA表达升高水平高于A组(P<0.05);B组与D组PDGF mRNA表达水平相当,差异无统计学意义(P>0.05)。结论参红通络颗粒可以上调心肌梗死后大鼠心肌局部VEGF、PDGF mRNA表达量。

参红通络颗粒治疗冠心病稳定型心绞痛

目的观察参红通络颗粒配合西药基础疗法治疗冠心病稳定型心绞痛气虚血瘀、痰浊阻络证的临床疗效。方法采用随机对照方法选取120例冠心病稳定型心绞痛患者,中医辨证为气虚血瘀、痰浊阻络证,根据随机数字表法分为治疗组和对照组,每组60例。对照组采用西药抗凝、降脂基础治疗,合并高血压病、糖尿病患者给予降压、降糖对症治疗;治疗组除西药基础治疗外加用参红通络颗粒口服3个月,服药结束后随访3个月。治疗前后对比观察两组患者心绞痛复发率、中医症状疗效、西雅图心绞痛调查量表积分情况及硝酸甘油停减率,综合评定患者疗效。结果随访观察6个月后,2组患者在心绞痛复发率、中医症状积分、西雅图心绞痛调查量表积分及硝酸甘油停减率方面比较均有统计学意义(P<0105),治疗组优于对照组。结论自拟方参红通络颗粒配合西药基础治疗能够明显减少冠心病稳定型心绞痛患者的心绞痛复发率,减少硝酸甘油用量,改善中医症状,提高患者生活质量。

参红通络颗粒对稳定型心绞痛患者经皮冠状动脉介入术围术期炎性因子及心肌损伤影响的研究

目的:通过对经皮冠状动脉介入术(Percutaneous Coronary Intervention,PCI)前及PCI后18~24 h外周血清肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、超敏C反应蛋白(High-sensitivity C-reactive Protein,hs-CRP)及肌钙蛋白I(Troponin I,cTnI)和肌酸激酶同工酶(Creatine Kinase-MB,CK-MB)表达水平变化的比较,客观评价参红通络颗粒减轻血清炎性因子表达水平及减轻心肌损伤的临床疗效。方法:将长春中医药大学附属医院心病中心2019年1月-2020年1月符合纳入标准的72例入院患者随机分成治疗组36例及对照组36例,治疗组给予西药常规治疗,术前7 d加用参红通络颗粒,对照组仅给予西医常规治疗。分别于入院后及PCI后18~24 h采集外周静脉血并检测其TNF-α、IL-6、hsCRP、c TnI、CK-MB水平。结果:与术前相比,对照组TNF-α、IL-6、hs-CRP、cTnI、CK-MB水平均有所上升,差异有统计学意义(P <0.05),治疗组IL-6水平降低,hs-CRP、cTnI、CK-MB水平有所升高,差异有统计学意义(P <0.05),TNF-α水平与术前差异无统计学意义(P> 0.05),两组数据变化趋势表明PCI术可引起炎性因子升高并造成心肌损伤性改变。PCI术后两组患者各数据经分析,差异有统计学意义(P <0.05),且治疗组炎性因子水平及心肌标志物水平低于对照组,表明治疗组在降低炎性因子及心肌损伤标志物方面优于对照组。结论:参红通络颗粒联合西医常规治疗对于降低PCI术后炎性因子水平,减少心肌损伤疗效优于单纯西医常规治疗,值得临床应用。

参红通络颗粒制备工艺中挥发油稳定化方法的研究

目的探讨增加参红通络颗粒挥发油的稳定性的方法。方法通过单因素考察、正交设计试验方法,以挥发油包合率、收率、含油率为指标,比较了复凝聚法制备微囊以及β-环糊精包合法的优劣,并确定了β-环糊精包合的最佳工艺。结果微囊法包合率低于β-环糊精包合法。研磨法制备β-环糊精包合物的最佳工艺为:水与β-环糊精比例2∶1,挥发油与β-环糊精的投料量比为1∶6,与95%乙醇用量的比例为1∶0.5,研磨时间0.5 h。结论结合生产实际,确定了参红通络颗粒中挥发油β-环糊精包合物的制备工艺。

参红通络颗粒对兔动脉粥样硬化模型炎症反应及氧化应激的干预作用

目的研究参红通络颗脉粒对兔动粥样硬化模型的血脂、炎性相关因子、氧化应激相关指标的影响,探究参红通络颗粒对动脉粥样硬化的作用机制。方法70只健康雄性新西兰白兔随机平均分为空白对照组、模型组、阿司匹林联合辛伐他汀组、阿司匹林组、辛伐他汀组、参红通络颗粒预防组、参红通络颗粒治疗组。采用高脂饲料喂养结合免疫刺激法进行兔动脉粥样硬化模型制备,空白组以普通饲料喂养。参红通络颗粒预防组于造模开始即给予药物干预,其余干预组于造模成功后给予相应的药物进行干预。造模前和造模后,检查各组血清中血脂变化,包括总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及血清中超氧化物歧化酶活性(SOD)和丙二醛(MDA)的变化情况。将模型组的主动脉分离后进行油红O染色,观察主动脉病理形态学变化情况。用免疫蛋白印迹法(Western blotting)和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测Nox4、p22phox的表达情况。Western blotting法检测主动脉TLR4和NF-κB蛋白表达情况。结果造模12周后,油红O染色的主动脉上,可见明显的粥样斑块,提示动脉粥样硬化造模成功。与空白对照组比较,动脉粥样硬化模型组血清中TC、TG和LDL-C均明显升高(均P<0.05)。与模型组相比,参红通络颗粒预防组和治疗组的粥样斑块明显减少,血清中TC、TG、LDL-C水平降低,SOD水平升高,MDA水平降低(均P<0.05)。参红通络颗粒预防组主动脉中TLR4、NF-κB、Nox4、p22phox的表达明显降低(均P<0.05)。结论参红通络颗粒能抑制粥样斑块的形成,具有较好的调节血脂作用,同时能提高抗氧化应激能力,减少主动脉中TLR4、NF-κB、Nox4、p22phox的表达,对动脉粥样硬化具有良好的预防和治疗作用。

益气活血化痰法抗细胞凋亡防治动脉粥样硬化斑块形成的实验研究

目的：观察益气活血化痰法治疗载脂蛋白E基因敲除（apolipoprotein E-knockout ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化的作用机制.方法：选取健康6周龄雄性ApoE-/-小鼠30只,常规喂养1周后随机分为高脂饮食组、高脂＋参红颗粒组和普通饮食对照组,每组10只.前两组给予高脂饮食,中药干预组采用益气活血化痰中药参红通络颗粒进行干预.喂养4周后,三组小鼠分别给予0.9％生理盐水、参红通络颗粒（10.12g· kg-1/d）和0.9％生理盐水灌胃8周.各组3个月后分别抽取眼球血,采用ELISA法检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）值,取主动脉弓组织做HE染色观察动脉粥样硬化程度和病理组织学变化,免疫组化染色法检测凋亡相关基因Caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测斑块内细胞凋亡情况.结果：与高脂饮食组相比较,中药灌注组血脂水平明显降低,斑块面积减小并且斑块内细胞凋亡数量减少,明显降低细胞凋亡相关Caspase-3蛋白的表达.结论：上述研究结果表明,益气活血化痰法能通过死亡受体途径抑制斑块内细胞凋亡控制动脉粥样硬化病变进展.