参附益心颗粒对急性心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体自噬的影响

目的研究参附益心颗粒对急性心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞线粒体自噬的影响。方法采用结扎左冠状动脉前降支的方法建立急性心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,将造模成功的大鼠分为模型组,参附益心颗粒低、高剂量组(1.76、8.8 g/kg),福辛普利钠片组(阳性对照,4 mg/kg),另设假手术组(相同位置只穿线不结扎),每组8只。干预4周后,使用生理记录仪检测各组大鼠的血流动力学指标,观察各组大鼠心肌组织的病理学变化,检测各组大鼠心肌细胞氧化应激水平和线粒体膜电位以及心肌组织中PTEN诱导激酶1(PINK1)、E3泛素连接酶Parkin、泛素结合蛋白P62的表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠心肌纤维形态紊乱,炎症细胞浸润等病理损伤严重,其左心室收缩末期压力(LVESP)、左心室内压最大上升速率(+dp/dt_(max))、左心室内压最大下降速率(-dp/dt_(max))、左心室缺血心肌细胞总抗氧化能力、线粒体膜电位以及心肌组织中PINK1、Parkin、P62蛋白的表达水平均显著降低(P<0.01),左心室舒张末期压力(LVEDP)、左心室缺血心肌细胞活性氧水平和还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶活性均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各药物干预组大鼠心肌组织病理损伤有所减轻,上述指标均有不同程度改善(P<0.01或P<0.05)。结论参附益心颗粒具有降低氧化应激水平、缓解急性心肌梗死后心力衰竭的作用,可能与其激活Parkin依赖性通路而增强线粒体自噬、减少线粒体功能障碍有关。

参附益心颗粒通过线粒体KATP通道改善缺氧H2C9心肌细胞能量代谢的作用

目的探索参附益心颗粒改善缺氧心肌细胞能量代谢的机制。方法采用CCK-8法筛选出参附益心颗粒含药血清实验研究的药物浓度。H2C9心肌细胞随机分为正常组,缺氧组,缺氧+二氮嗪组,缺氧+参附益心颗粒组,缺氧+参附益心颗粒+5-羟基癸酸组.除正常组外,根据实验分组,缺氧处理前预先对细胞进行二氮嗪、5-羟基癸酸和参附益心颗粒含药血清处理,后将细胞置于缺氧的37℃的细胞培养箱中连续培养6 h。采用荧光素酶发光法检测细胞ATP的浓度,CCK-8检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞的凋亡水平,Western blot测定线粒体KATP(mitoKATP)的蛋白Kir6.2和SUR2A的表达。结果根据CCK-8实验结果选择250μM的参附益心颗粒含药血清作为实验药物浓度。与正常组相比,缺氧H2C9心肌细胞ATP水平显著降低,细胞的增殖能力降低,凋亡率增加,mitoKATP通道蛋白的Kir6.2和SUR2A的表达水平均显著降低(均P<0.01)。与缺氧组相比,二氮嗪和参附益心颗粒组的ATP浓度,细胞增殖能力和Kir6.2,SUR2A蛋白表达水平均显著升高,细胞的凋亡率显著下降(均P<0.01)。而参附益心颗粒经mitoKATP阻断剂5-羟基癸酸作用后,细胞的ATP浓度,增殖能力和Kir6.2,SUR2A的表达均显著下降(均P<0.01),凋亡率明显升高(P<0.01)。结论参附益心颗粒可能通过mitoKATP通道改善缺氧心肌细胞的能量代谢。

参附益心颗粒联合米力农治疗慢性心力衰竭的疗效及其对患者心室重塑及心功能的影响

目的观察参附益心颗粒联合米力农治疗慢性心力衰竭(CHF)的疗效,并探讨其对患者心室重塑及心功能的影响。方法选取天津市红桥医院心内科2018年3月至2020年1月收治的110例CHF患者为研究对象,按照入院单双号分为观察组和对照组各55例,两组患者均采用常规治疗并加用米力农治疗7 d,观察组在此基础上联合参附益心颗粒治疗6个月,6个月治疗结束后比较两组患者的心功能疗效、中医症候疗效、治疗前后6 min步行试验距离(6MWD)、左室射血分数(LVEF)、左室舒张末内径(LVEDd)和收缩末内径(LVESd)及安全性。结果治疗结束时,观察组和对照组分别有53例和51例患者完成研究;观察组患者的心功能治疗总有效率为83.02%,明显高于对照组的62.74%,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者的中医症候疗效的总有效率为88.68%,明显高于对照组的66.67%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组和对照组患者的6MWD[(409.72±67.23)m vs(381.29±69.24)m]和LVEF[(44.23±6.53)%vs(41.08±7.11)%]、LVEDd[(61.43±6.19)mm vs(64.29±6.41)mm]和LVESd[(54.83±6.09)mm vs(57.48±6.51)mm]比较,观察组明显优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者的不良事件发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论参附益心颗粒联合米力农治疗CHF有助于改善患者的心功能和心室重塑,安全性好。

参附益心颗粒治疗慢性心衰机理探赜

本课题认为慢性心衰的病机为正虚血瘀兼阳虚水停,分析研究参附益心颗粒改善慢性心衰症状的中医作用机制为益气活血、温阳利水,现代医学机制为延缓心肌的重构,提高心肌ATP含量,降低血浆中的心钠素、脑钠素水平,从而增强心肌收缩力,改善心脏的舒缩功能,延缓病情的进展。

参附益心颗粒治疗充血性心力衰竭患者室性心律失常的临床观察

目的观察参附益心颗粒治疗充血性心力衰竭(CHF)室性心律失常(VA)的临床疗效和安全性。方法选择心功能Ⅱ级～Ⅳ级的CHF合并VA的住院患者105例,随机分为两组。A组56例,给予参附益心颗粒每次6g～12g,3次/日。B组49例,给予胺碘酮,第一周为每次0.2g,3次/日,之后逐渐减量至每次0.2g,1次/日,观察期4周。在试验开始和第四周末分别检测动态心电图和其他实验室检查,并观察试验期内两组出现的副反应。结果两组控制VA的总有效率分别是83.33%和84.44%(P>0.05);副反应的发生率则分别是7.41%和20.00%(P<0.05)。结论参附益心颗粒可以控制CHF合并VA,其临床疗效初步判断与胺碘酮相仿,但副反应的发生率则显著低于后者。

参附益心颗粒对心肌梗死后心力衰竭大鼠线粒体动力学的影响

目的:采用左冠状动脉前降支结扎术制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型,观察参附益心颗粒对心力衰竭大鼠线粒体动力学的影响。方法:50只SD雄性大鼠随机取10只为假手术组,其余为造模组,采用左冠状动脉前降支结扎术制备心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。根据术后28 d左室射血分数(LVEF)将模型大鼠随机分为模型组、参附益心颗粒低、高剂量组(3.011、15.055 g·kg^(-1))、沙库巴曲缬沙坦钠组(20.83 mg·kg^(-1))。各给药组每日灌胃相应剂量药液,假手术组、模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续给药28 d,每组6只。超声检测心功能参数,称量大鼠心脏质量、体质量,计算心脏质量指数,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清脑钠肽(BNP)和可溶性生长刺激表达基因2蛋白(sST2)含量,苏木素-伊红(HE)染色观察心肌病理形态,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测线粒体融合蛋白1/2(Mfn1/2)、视神经萎缩蛋白1(Opa1)、动力相关蛋白1(Drp1)、分裂蛋白1(Fis1)mRNA及蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组的LVEF、Mfn1、Mfn2、Opal mRNA及蛋白水平降低,BNP、sST2、心脏质量指数、Drp1、Fis1 mRNA及蛋白水平增加(P<0.05);与模型组比较,参附益心颗粒高剂量组、沙库巴曲缬沙坦钠组LVEF、Mfn1、Mfn2、Opal mRNA及蛋白表达增高(P<0.05),BNP、sST2、心脏质量指数、Drp1、Fis1 mRNA及蛋白水平降低(P<0.05)。病理观察显示,与假手术组比较,模型组心肌细胞排列紊乱、炎性细胞浸润,心肌纤维化;与模型组比较,各给药组炎性细胞浸润、心肌或肌间质纤维化程度均有改善缓解。结论:参附益心颗粒能抗心力衰竭,降低心脏质量指数、减少BNP、sST2含量,改善心功能,其机制可能与调整线线粒体动力学相关。

参附益心颗粒辨证联合西药治疗慢性心力衰竭的多中心、随机、双盲、安慰剂对照研究

目的评价参附益心颗粒辨证治疗慢性心力衰竭(CHF)的有效性和安全性。方法采用多中心、随机、双盲、安慰剂对照的方法,将300例CHF患者随机分为治疗组151例和对照组149例。在健康教育基础上,治疗组采用西医规范治疗加中医辨证治疗,分心气(阳)虚、心血瘀阻,心阳亏虚、痰瘀互阻两型,分别给予参附益心颗粒及参附益心颗粒加味,对照组采用西医规范治疗加治疗组中药的模拟药。两组均治疗6个月。比较两组患者治疗前及治疗3、6个月射血分数(EF)、中医证候评分、6分钟步行距离(6MWD)、明尼苏达心力衰竭生活质量调查表(MLHF-Q)评分,并进行心功能疗效和中医证候疗效评价,同时进行安全性评价。结果治疗组心功能疗效总有效率为82.4%,对照组为54.26%;治疗组中医证候疗效总有效率为93.55%,对照组为59.23%,治疗组心功能疗效及中医证候疗效均优于对照组(P<0.01)。与本组治疗前比较,两组患者治疗3个月、6个月EF、6MWD均较治疗前增加,中医证候积分、MLHF-Q评分均较治疗前下降(P<0.01)。治疗6个月,治疗组6MWD长于对照组,中医证候积分低于对照组(P<0.01);而EF、MLHF-Q评分与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗组发生18例不良事件,对照组16例不良事件。结论参附益心颗粒辨证治疗加西医规范治疗能进一步提高CHF患者的心功能,提升运动能力,改善患者的临床症状和体征,且安全性较好。

参附益心颗粒对心力衰竭大鼠心肌ATP含量及解偶联蛋白-2的影响

目的:观察参附益心颗粒对心力衰竭大鼠心肌组织三磷酸腺苷(ATP)含量及解偶联蛋白-2(UCP-2)表达的影响。方法:采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法复制心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。实验共设5组:假手术组,模型组,参附益心颗粒常用剂量组、高剂量组和氯沙坦组。其中假手术和模型组给予相同体积的蒸馏水灌胃,药物干预组将相应药物溶于蒸馏水后经口灌胃给药,4周后利用超声评价左室舒张末内径(LVEDD)、左室收缩末内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS);采用生物发光法检测左心室缺血危险区组织的ATP含量;同时以JC-1为荧光分子探针检测大鼠心肌线粒体膜电位的变化;Western Blot确定心肌UCP-2的蛋白表达量。结果:与模型组比较,参附益心颗粒干预组心肌ATP含量及线粒体膜电位均显著升高(P<0.01,P<0.05),伴随心功能的改善,同时抑制UCP-2的蛋白表达(P<0.01,P<0.05)。结论:参附益心颗粒能够提高心衰大鼠心肌ATP含量、改善心脏功能,该作用可能与其抑制UCP-2的过表达和线粒体膜电位的降低有关。

参附益心颗粒对心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌线粒体呼吸功能的影响

目的观察参附益心颗粒对心力衰竭大鼠线粒体呼吸功能的影响。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法复制心肌梗死后心力衰竭大鼠模型。将造模成功的40只大鼠随机分为模型组、参附益心颗粒(简称参附)常用剂量组[1.76 g/(kg·d)]、大剂量组[8.8 g/(kg·d)]和氯沙坦组[10 mg/(kg·d)],每组10只,同时设假手术组10只。分别给予相应的药物或相同体积的蒸馏水灌胃4周。利用颈动脉导管法测量相关血流动力学指标:心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)及左室压最大上升和下降速率(±dp/dtmax);采用Seahorse法检测线粒体呼吸功能相关参数:基础呼吸、最大呼吸、态3呼吸(T3)、态4呼吸(T4)和控制率(RCR);Western Blot法检测心肌线粒体呼吸链复合酶Ⅰ~Ⅴ的蛋白表达量。结果与假手术组比较,模型组HR、LVEDP明显升高(P<0.01),LVSP、±dt/dpmax降低(P<0.05,P<0.01);T3、最大呼吸及RCR1、RCR2值均降低(P<0.01),T4明显升高(P<0.01);呼吸链复合酶Ⅲ和Ⅳ表达降低(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,各药物干预组LVEDP降低(P<0.01),±dt/dpmax升高(P<0.05,P<0.01),参附常用量和大剂量组LVSP增高(P<0.05,P<0.01),参附常用量组和氯沙坦组中HR降低(P<0.05);各药物干预组T3、最大呼吸和RCR值均上升(P<0.01),参附常用量组和氯沙坦组T4下降(P<0.05,P<0.01);各药物干预组呼吸链复合酶Ⅲ均升高(P<0.01,P<0.05),参附大剂量组和氯沙坦组中呼吸链复合酶Ⅳ升高(P<0.05)。结论参附益心颗粒能够改善心衰大鼠线粒体呼吸功能、增加心肌收缩力,其机制可能与抑制线粒体呼吸链复合酶Ⅲ和Ⅳ含量的降低有关。

参附益心颗粒对缺氧诱导的大鼠H_9C_2心肌细胞能量代谢的影响

目的探讨参附益心颗粒治疗慢性心力衰竭的可能作用机制。方法以不同浓度(0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 9、1. 2 mg/ml)的参附益心颗粒处理H_9C_2细胞24 h,MTT法检测细胞活性,筛选后续实验的药物浓度。将H_9C_2细胞分为正常组(正常培养)、模型组(缺氧6 h)、曲美他嗪组(1×10^(-4)mol/L曲美他嗪+缺氧6 h)、辅酶Q10组(1×10^(-4)mol/L辅酶Q10+缺氧6 h)及中药低剂量组(0. 25 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6h)、中药高剂量组(0. 5 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6h),检测各组心肌细胞ATP含量、底物代谢酶脂肪酸转运酶(FAT)、肉碱脂酰转移酶1 (MCPT-1)、中链脂酰辅酶A脱氢酶(MCAD)、磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、丙酮酸脱氢酶(PDH)、葡萄糖转运子4 (GLUT-4)、腺苷酸转运体(ANT)、肌酸激酶(CK)蛋白表达水平;观察各组H_9C_2心肌细胞超微结构的变化。将H_9C_2细胞分为正常组、模型组、中药组(0. 5 mg/ml参附益心颗粒+缺氧6 h),JC-1染色检测线粒体膜电位变化。结果 0. 5 mg/ml参附益心组及低于此浓度组无细胞毒性,以0. 5 mg/ml参附益心颗粒用于中药组。与正常组比较,模型组H_9C_2细胞ATP含量及FAT、MCPT-1、MCAD、GLUT-4、ANT、CK蛋白含量明显降低,AMPK、PDH蛋白含量明显升高(P <0. 05)。与模型组比较,中药组和辅酶Q10组心肌细胞中ATP含量及FAT、MCPT-1、MCAD、GLUT-4、ANT、CK蛋白含量均明显升高(P <0. 05)。正常组细胞线粒体结构正常,模型组细胞膜破裂,线粒体肿胀,边界模糊不清。与模型组对比,中药组细胞损伤明显减轻,细胞膜完整,线粒体结构清晰。JC-1染色显示中药组可以改善线粒体膜电位的下降。结论参附益心颗粒可能通过升高心肌H_9C_2细胞ATP、GLUT-4、ANT、FAT、MCPT-1、MCAD、CK蛋白表达,降低AMPK、PDH蛋白表达,改善缺氧诱导H_9C_2心肌细胞线粒体膜电位,从而发挥治疗慢性心力衰竭的作用。

参附益心颗粒对慢性心力衰竭大鼠血清心钠素、脑钠素的影响

目的:观察参附益心颗粒对慢性心力衰竭大鼠的作用。方法:随机将150只雄性SD大鼠分为造模组130只,假手术组20只。造模组结扎左冠状动脉前降支,假手术组手术方法同上,仅在冠状动脉前降支下穿线不结扎。造模8周后,经超声测定大鼠左室射血分数%(left ventricular ejection fraction,LVEF)<50%者随机分为5组(模型组、卡托普利组、氯沙坦组、参附益心颗粒(5.475,21.9 g.kg-1.d-1)2个剂量组),每组10只,另选假手术组大鼠10只。假手术组及模型组以纯净水ig,药物干预组将药物溶于纯净水中ig给药,每天1次,4周后查LVEF、称重,采血检测指标心钠素(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠素(brain natriuretic peptide,BNP)。结果:21.9 g.kg-1.d-1参附益心颗粒有明显改善LVEF作用、降低左室重量指数(leftventricular mass index,LVMI)、血清ANP值;参附益心颗粒低高2个剂量组均可显著降低血清BNP值。结论:参附益心颗粒具有明显的抗心力衰竭作用,可能具有干预心室重塑的作用。

参附益心颗粒对慢性心力衰竭大鼠心肌重塑的影响

目的:观察参附益心颗粒对慢性心力衰竭大鼠心肌重塑的影响。方法:随机将150只雄性SD大鼠分为造模组130只与假手术组20只,造模组结扎左冠状动脉前降支,假手术组手术方法同上,仅在冠状动脉前降支下穿线不结扎。造模8周后,经超声测定大鼠左室射血分数%(LVEF),<50%者随机分为5组,每组10只,分别为卡托普利组、氯沙坦组、参附益心颗粒高剂量组、参附益心颗粒低剂量组、模型组,另选假手术组大鼠10只。假手术组及模型组以纯净水灌胃,药物干预组将药物溶于纯净水中灌胃给药,每天1次,4周后查LVEF,称重后,处死测左室重量指数(LVMI)以及取组织观察病理组织学和心肌细胞超微结构。结果:参附益心颗粒有明显改善LVEF作用,明显地降低LVMI,可以改善心衰心肌病理形态和心肌超微结构的损伤而影响重塑,并且具有和西药对照组相近似的干预作用。结论:参附益心颗粒可延缓或逆转心肌重塑的作用。

参附益心颗粒对慢性心力衰竭大鼠心肌血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体表达的影响

目的:观察参附益心颗粒对心衰大鼠心肌血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体(AT1和AT2)表达的影响。方法:随机将150只雄性SD大鼠分为造模组130只与假手术组20只,结扎大鼠左冠状动脉前降支(LAD)建立心衰大鼠模型,假手术组手术方法同上,仅在LAD下穿线不结扎。造模4周后检测左心室射血分数(LVEF)<50%者随机分为5组,每组10只,分别为卡托普利组、氯沙坦组、参附益心颗粒高、低剂量组、模型组,另选假手术组大鼠10只。假手术组及模型组以纯净水灌胃,药物干预组以药物溶液灌胃给药,每天1次,4周后查LVEF、称重后取标本,免疫组化法检测大鼠心肌AT1、AT2表达。结果:参附益心颗粒能明显提高心衰大鼠LVEF。心衰大鼠AT1、AT2表达显著增强,参附益心颗粒可明显降低AT1、AT2表达。结论:参附益心颗粒可改善心衰大鼠心功能,下调心肌中AT1、AT2表达水平阻断肾素血管紧张素系统,可能会起到延缓或改善心肌重塑的作用。

参附益心颗粒对大鼠急性心梗后心功能及心肌组织的影响

目的:观察参附益心颗粒对急性心梗后大鼠心功能及心肌组织病理演变的影响。方法:雄性SD大鼠,行冠状动脉左前降支结扎术制备大鼠急性心肌梗死模型,将制备成功者随机分为模型组、参附益心临床等效剂量组(1.76g/kg)及氯沙坦阳性对照组(10 mg/kg),假手术组仅开胸并在左前降支下过线。分2批分别灌胃给药1周/4周后,采用彩色多普勒超声影像系统监测各组大鼠超声心电图,分析测量EF、FS、LVIDD及LVIDS等反映心功能的指标;并取心室肌组织制备石蜡包埋组织切片,行HE染色及Masson染色,镜下观察并拍照。通过纵向和横向比较探讨参附益心颗粒对急性心梗后大鼠心功能及心肌组织病理演变的影响。结果:急性心梗后参附益心颗粒(1.76g/kg)给药1周,与模型组相比仅EF值有明显改善,病理学检测显示心梗组织主要表现为心肌细胞的死亡和早期的炎症反应如炎细胞浸润、血管增生及成纤维细胞增生,参附益心颗粒可起到保护心肌细胞及抑制炎症反应的作用;心梗后4周,与心梗后1周相比,心功能指标表现为恶化趋势,但参附益心组(1.76g/kg)与模型组同期相比EF、FS及LVIDS均有明显改善,病理结果显示心梗组织表现为室壁变薄及组织的纤维化,交界区纤维化组织呈树枝样向正常组织渗透性生长,参附益心颗粒(1.76g/kg)可对心肌组织的纤维化起到一定的抑制作用,使心肌纤维化程度和范围有所控制。结论:参附益心颗粒可改善心功能,对急性心梗后组织可起到保护心肌和抑制其纤维化的作用,从而阻滞和延缓心梗后慢性心衰的发生和发展。

参附益心颗粒对慢性心力衰竭大鼠血浆与心肌血管紧张素Ⅱ的影响

目的:探讨参附益心颗粒对慢性心力衰竭大鼠血浆与心肌血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)水平的影响。方法:随机将150只雄性SD大鼠分为造模组130只与假手术组20只,造模组结扎左冠状动脉前降支,假手术组仅冠状动脉前降支下穿线不结扎。造模8周后,经超声测定大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)<50%者随机分为5组(卡托普利组、氯沙坦组、参附益心颗粒(5.5,21.9 g.kg-1)2个剂量组、模型组],每组10只,另选假手术组大鼠10只。假手术组及模型组以纯净水ig,药物干预组将药物溶于纯净水中ig给药,每天1次,4周后检测LVEF、腹主动脉采血、取心肌组织检测AngⅡ。结果:参附益心颗粒21.9 g.kg-1组有明显改善LVEF作用,参附益心颗粒2个剂量组均明显降低血浆及心肌AngⅡ水平,且作用与卡托普利相当。结论:参附益心颗粒可改善心衰大鼠心功能,下调血浆及心肌AngⅡ水平,阻断RAS,可能起到延缓或改善心肌重塑的作用。

参附益心颗粒对心衰大鼠心肌c-fos,c-myc表达的影响

目的:探讨参附益心颗粒对心衰大鼠心肌c-fos,c-myc表达的影响。方法:随机将150只雄性SD大鼠分为造模组130只,假手术组20只。造模组结扎左冠状动脉前降支,假手术组手术方法同上,仅在冠状动脉前降支下穿线不结扎。造模8周后,经超声测定大鼠左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)<50%者随机分为5组(模型组、卡托普利组、氯沙坦组、参附益心颗粒(5.48,21.90 g.kg-1.d-1)2个剂量组,每组10只,另选假手术组大鼠10只。假手术组及模型组以纯净水ig,药物干预组将药物溶于纯净水中ig给药,每天1次,疗程4周。4周后超声测定LVEF,称重后,处死测左室重量指数(left ventricular mass index,LVMI),免疫组化法检测大鼠心肌中c-fos,c-myc表达。结果:21.90 g.kg-1.d-1参附益心颗粒可显著提高心衰大鼠LVEF,降低LVMI,抑制心衰大鼠心肌中c-fos,c-myc表达。结论:参附益心颗粒能够通过抑制心衰大鼠心肌中c-fos,c-myc表达,抑制心肌重塑。

参附益心颗粒对缺氧诱导的大鼠H9c2心肌细胞脂代谢的影响

目的探讨参附益心颗粒(ShenFu Yixin granule,SFG)对缺氧诱导的大鼠H9c2心肌细胞脂代谢的影响。方法将细胞分为5组:正常组、模型组(缺氧组)、曲美他嗪组(曲美他嗪+缺氧组)、辅酶Q10组(辅酶Q10+缺氧组)及中药组(0.5mg/ml参附益心颗粒+缺氧组),培养30min后模型组、曲美他嗪组、辅酶Q10组、中药组置于缺氧培养箱中继续培养6h,建立体外H9C2细胞缺氧损伤模型,检测过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator activated receptorα,PPARα),过氧化物酶体增殖物激活受体β/δ(peroxisome proliferator activated receptorβ/δ,PPARβ/δ)、PGC-1α表达。结果缺氧组H9c2心肌细胞PPARα、PPARβ/δ、PGC-1α蛋白含量与正常组相比明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。给药干预后,曲美他嗪组能够明显增加PPARα、PGC-1α蛋白表达,辅酶Q10组能够明显增加PPARα、PPARβ/δ、PGC-1α蛋白表达,与缺氧组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。参附益心颗粒能够提高缺氧诱导的心肌细胞中PPARα、PPARβ/δ、PGC-1α蛋白的表达,与缺氧组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论参附益心颗粒可能使缺氧诱导的心肌细胞的PPARα、PPARβ/δ、PGC-1α抑制作用被激活,通过恢复PPARα、PPARβ/δ、PGC-1α活性而潜在保护缺氧诱导的心肌细胞,进而改善心衰。

参附益心颗粒对AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞葡萄糖、脂肪酸代谢相关因子表达的影响

目的:明确参附益心颗粒对AngⅡ诱导的H9c2心肌细胞葡萄糖、脂肪酸代谢相关因子表达的影响。方法:血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导H9c2心肌细胞构建心肌细胞损伤模型,钙黄绿素标记检测细胞活性,ATP检测试剂盒检测ATP含量,电子显微镜观察线粒体超微结构,RT-PCR检测葡萄糖代谢相关因子AMPK、PDH、GLUT-4基因表达,Western Blot检测AMPK、PDH、GLUT-4蛋白表达,脂肪酸代谢相关因子FAT、MCPT-1、MCAD蛋白表达。结果:与模型组比较,参附高剂量组、氯沙坦组、辅酶Q10组H9c2细胞活性、ATP含量增加(P<0.01,P<0.05);电子显微镜结果显示:参附益心颗粒、氯沙坦、辅酶Q10均可改善线粒体超微结构,与模型组比较,可见细胞膜表面微绒毛样突起减少,细胞膜完整,线粒体嵴丰富,包膜完整,部分细胞内质网、线粒体肿胀。RT-PCR结果显示:AngⅡ诱导下,H9c2心肌细胞AMPK、PDH基因表达增高(P<0.01),GLUT-4基因表达降低(P<0.01);参附高剂量组、氯沙坦组、辅酶Q10组AMPK、PDH基因表达降低(P<0.01,P<0.05),GLUT-4基因显著增高(P<0.01);Western Blot结果显示:AngⅡ诱导下,H9c2心肌细胞AMPK、PDH蛋白表达增高(P<0.01),GLUT-4、FAT、MCPT-1、MCAD蛋白表达降低(P<0.01),参附高剂量组、氯沙坦组、辅酶Q10组AMPK、PDH蛋白表达降低(P<0.01),GLUT-4、FAT(除辅酶Q10组外)、MCPT-1、MCAD蛋白表达显著升高(P<0.01,P<0.05)。结论:参附益心颗粒可增加AngⅡ诱导下H9c2心肌细胞ATP含量,提高H9c2心肌细胞活性及脂肪酸、葡萄糖代谢相关因子蛋白表达。

参附益心颗粒治疗慢性充血性心力衰竭合并肺动脉高压的效果观察

目的观察参附益心颗粒治疗慢性充血性心力衰竭(CHF)合并肺动脉高压(PH)的临床效果。方法选取2016年1月至2017年12月河南省人民医院收治的62例CHF合并PH患者,按随机数表法分为对照组和实验组,各31例。对照组接受常规西药治疗,实验组于此基础上加用参附益心颗粒,连续治疗1个月。比较两组治疗前后肺动脉收缩压(PASP)、左心室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)。结果治疗后两组PASP水平较治疗前降低,且实验组低于对照组(P <0. 05)。治疗后两组SV、LVEF水平较治疗前升高,且实验组较对照组高(P <0. 05)。结论参附益心颗粒治疗CHF合并PH患者有助于降低PASP,改善心功能。

参附益心颗粒对心梗后心衰大鼠K_(ATP)通道的作用

目的观察参附益心颗粒对急性心肌梗死心衰大鼠左室心肌细胞K_(ATP)蛋白表达的作用。方法采用结扎大鼠左冠状动脉前降支的方法建立心梗模型,第2日行心脏超声检查结果提示左室射血分数(LVEF)<50%判定模型成功。实验分6组:假手术组(Sham)、心梗组(MI)、尼可地尔组-K_(ATP)通道开放剂[Nico,0.1mg/(kg·d)]、参附益心颗粒小剂量组[SFL,1.76g/(kg·d)]、参附益心颗粒大剂量组[SFH,8.8g/(kg·d)],福辛普利组[ACEI,4mg/(kg·d)],每组各8只。给药干预4周后行心脏超声检查后处死,取材。药物干预4周后,HE染色法观察各组大鼠心肌组织病理学变化,检测各组大鼠血清NT-proBNP浓度,Western blot检测K_(ATP)通道蛋白Kir6.2和SUR2A的表达水平,生物发光法检测左心室缺血危险区组织的ATP含量。结果与Sham组相比,MI组大鼠心肌组织中的K_(ATP)通道蛋白Kir6.2和SUR2A均代偿性的轻度升高(P<0.05),而经过药物治疗后Kir6.2和SUR2A的表达均进一步的增加(均P<0.05),参附益心颗粒高剂量能显著升高Kir6.2和SUR2A的表达(P<0.05),福辛普利也能增加两个通道蛋白的表达,其中以增加SUR2A的表达较显著(P<0.05)。结论心梗后心衰发生的心肌缺血组织内K_(ATP)通道蛋白代偿性的增加,参附益心颗粒高剂量治疗能显著增加二者蛋白的表达,为线粒体能量的产生和细胞膜的稳定性提供物质基础。