2型糖尿病病人血清沉默信息调节因子2相关酶1和叉头样转录因子O4表达与糖尿病视网膜病变的关系

目的探究2型糖尿病(T2DM)病人血清沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)和叉头样转录因子O4(FOXO4)表达与糖尿病视网膜病变(DR)的关系。方法采用随机数字表法将2021年8月至2022年8月在七台河市人民医院收治的142例T2DM病人纳入研究,按照国际临床DR严重程度量表分为无DR组62例、非增殖性(NPDR)组50例和增殖性(PDR)组30例。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清SIRT1和FOXO4的表达水平;Pearson法分析血清中SIRT1和FOXO4表达水平的相关性;logistic回归分析影响T2DM病人DR发生的因素。ROC曲线分析血清中SIRT1和FOXO4对T2DM病人DR发生的诊断价值。结果PDR组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)[(1.22±0.15)mmol/L比(1.98±0.17)mmol/L、(1.64±0.18)mmol/L]、SIRT1水平[(3.82±0.50)μg/L比(5.36±0.56)μg/L、(4.65±0.52)μg/L]显著低于无DR组及NPDR组,NPDR组显著低于无DR组;PDR组收缩压(SBP)、三酰甘油(TG)、FOXO4[(14.63±1.48)μg/L比(12.62±1.45)μg/L、(13.74±1.46)μg/L]水平显著高于无DR组及NPDR组,NPDR组显著高于无DR组(P<0.05)。相关性分析显示,血清SIRT1和FOXO4表达水平呈负相关关系(r=−0.47,P<0.001)。logistic回归分析显示,HDL-C、SIRT1和FOXO4表达水平是影响T2DM病人DR发生的因素(P<0.05)。二者联合诊断DR发生的ROC曲线下面积(AUC)高于SIRT1和FOXO4单独诊断的AUC值(Z=32.22,P<0.001;Z=19.03,P<0.001)。结论T2DM病人血清中SIRT1表达水平显著降低,FOXO4表达水平显著升高,二者是影响T2DM病人DR发生的因素。

白细胞介素-35和叉头样转录因子3在大鼠根尖周炎中的表达

目的:观察大鼠实验性根尖周炎中白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)与叉头样转录因子3(foxhead box p3,Foxp3)的动态表达情况,探讨IL-35在根尖周炎中的作用。方法:选取40只SPF级SD大鼠,随机分为5组,单侧下颌第一磨牙开髓进行根尖周炎造模,分别于术后0、7、14、21、28 d各随机处死一组,下颌骨拍摄X线片,观察根尖周变化情况。取下颌第一磨牙根尖周组织进行苏木精-伊红染色(HE)观察其组织病理变化。实时荧光定量PCR反应(real-time qPCR,RT-qPCR)动态检测根尖周病损组织中IL-35和Foxp3 mRNA的表达情况。结果:X线和HE染色显示随着牙髓暴露时间的延长,根尖部炎症程度逐渐加重,待髓腔开放21~28 d时炎症则趋于稳定,从临床表现和组织病理学两方面证实了大鼠根尖周炎造模成功。RT-qPCR结果显示:IL-35和Foxp3 mRNA相对表达量在术后不同时期均呈波动性升高趋势(P<0.01),术后0~7 d迅速上升,7~21 d表达量呈下降趋势(P<0.05),21~28 d又呈上升趋势(P<0.05);Pearson相关分析显示:IL-35mRNA与Foxp3mRNA相对表达量呈正相关关系(r=0.609,P<0.05)。结论:IL-35在大鼠根尖周炎中的表达量与炎症程度成反比,可能通过调控Treg的表达参与根尖周炎的发生发展。

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2和叉头样转录因子3 mRNA在原发性肝癌患者外周血单个核细胞中的表达及意义

目的探讨原发性肝癌患者外周血单个核细胞(PBMC)中肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)和CD4+CD25+调节性T淋巴细胞(Treg)叉头样转录因子3(Foxp3)的表达及相关关系。方法选择2014年1月-2016年12月在河北医科大学第三医院门诊及住院的原发性肝癌患者55例,同期选择健康自愿者35例为对照组。检测2组PBMC中TIPE2 mRNA和Foxp3 mRNA的表达水平,并与肝脏血清生化指标、AFP、血白细胞及肿瘤大小、数量等进行相关性分析。符合正态分布的计量资料2组间比较采用t检验;不符合正态分布的计量资料2组间比较采用Mann-Whitney U检验。计数资料2组间比较采用χ2检验;相关分析采用Pearson相关性检验。结果2组患者ALT、AST、AST/ALT、TBil、WBC、AFP水平比较,差异均有统计学意义(P值均<0.05)。原发性肝癌组患者TIPE2 mRNA表达较对照组明显降低(0.396±0.174 vs 1.045±0.330,t=12.187,P<0.01);而Foxp3 mRNA表达较对照组明显升高(4.498±1.672 vs 1.922±1.297,t=7.746,P<0.01)。TIPE2 mRNA表达与血清ALT、AST、AST/ALT及AFP均呈负相关(r值分别为-0.752、-0.833、-0.992、-0.848,P值均<0.05),而Foxp3 mRNA表达与ALT、AST、AST/ALT及AFP均呈正相关(r值分别为0.449、0.536、0.843、0.640,P值均<0.05)。TIPE2 mRNA表达与Foxp3 mRNA呈负相关(r=-0.821,P<0.01)。结论肝癌患者的TIPE2 mRNA表达下调,而Foxp3 mRNA表达上调,并与肝细胞损伤程度和AFP水平有一定的相关性,TIPE2基因可能通过负性调控Treg介导的免疫反应参与肝癌的发病过程。

定量RT-PCR测定食管鳞癌组织中人叉头样转录因子3基因的表达

目的测定食管鳞状细胞癌组织中人叉头样转录因子3(forkhead box P3,FOXP3)的基因表达水平,为食管癌的免疫治疗提供依据。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pMD 18-T-FOXP3,作为定量模板,建立检测FOXP3信使核糖核酸(mRNA)含量的实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,在GeneAmp7500型检测仪上测定42例食管鳞癌组织和30例正常对照组织中FOXP3 mRNA的含量。结果食管鳞癌组织FOXP3 mRNA表达高于正常对照组织[(72.20±23.10)×104拷贝/μg RNA vs.(0.68±0.34)×104拷贝/μg RNA;P<0.05]。结论成功建立了人FOXP3基因mRNA表达含量的荧光定量检测方法,FOXP3在食管鳞癌组织中的表达较正常对照组织增高。

叉头样转录因子3与胃癌的研究进展

叉头样转录因子3(forkhead box protein 3,Foxp3)过去被认为是调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的关键转录因子,近来发现其在胃癌细胞中也有表达,这可能是一种新的肿瘤免疫逃逸机制。胃癌患者外周血及微环境中Foxp3蛋白及mRNA的高表达可能涉及到多种信号通路,具有重要的基因调控作用并最终使肿瘤逃逸机体的免疫杀伤,干预其表达可能成为一种有效的免疫治疗手段。

胰岛素样生长因子结合蛋白-3和叉头样转录因子O4在胃癌组织中的mRNA表达水平及临床意义探讨

目的：探讨胃癌组织中胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）和又头样转录因子04（FOX04）在的表达及与胃癌，临床病理参数及预后的关系。方法：筛选本院手术切除的胃癌组织及相应癌旁组织标本各75例，应用RT-PCR技术检测胃癌组织和对应的癌旁组织中IGFBP-3和FOX04mRNA表达，分析其与胃癌临床病理参数间的关系。结果：胃癌组织中IGFBP-3mRNA和FOX04mRNA阳性检出率分剐为16．67％（12例）、19．44％（14例），明显低于癌旁组织中IGFBP-3mRNA（84．72%，61例）、FOXO4mRNA（86．11％。62例）的阳性检出率（p〈0．01）。胃癌组织中IGFBP-3和FOXO4mRNA的表达显著低于癌旁组织（P〈0．01）。胃癌标本组织中IGFBP-3和FOX04mRNA的表达与胃癌患者的年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤部位无关（P〉0．05），而与浸润深度、分化程度、TNM分期、淋巴结转移呈显著性相关（P〈0．01）。1年期随访：23例死亡，49例存活；死亡组患者入院时胃癌标本组织中IGFBP-3和FOXO4mRNA表达显著低于存活组（P〈0．01）。结论：IGFBP-3和FOXO4mRNA在胃癌组织中低表达，与胃癌的临床病理参数和患者的预后密切相关。

叉头样转录因子3在肺恶性肿瘤中的作用

叉头样转录因子(Foxp3)是一个具有多种功能的转录因子,通常调控细胞生长发育,不但在肿瘤发生、发展中发挥作用,而且在肿瘤的治疗、预后评估中均起着相当重要的作用。Foxp3是通过调控调节性T细胞(Treg细胞)水平,抑制肿瘤微环境免疫功能,使肿瘤细胞逃避免疫监视,导致肿瘤的发生。抑制Foxp3表达,使机体发挥正常免疫功能,可达到抗肿瘤目的。本文就Foxp3在肺恶性肿瘤中的表达和肿瘤免疫中的作用机制以及免疫治疗中的作用作一综述。

叉头样转录因子3的表达与大鼠实验性根尖周炎骨吸收的关系

目的:观察叉头样转录因子3(forkhead box P3,Foxp3)在大鼠实验性根尖周病变中的表达,探讨Foxp3与根尖周骨吸收的关系。方法:将30只Wistar大鼠开髓,于术后0,7,14,21,28,35d取下颌骨,制备组织切片,分别用HE染色观察骨吸收范围,免疫组织化学方法检测Foxp3的表达和酶组织化学方法检测破骨细胞的形成。结果:术后0～21d(急性期),Foxp3表达维持低水平,而破骨细胞迅速增多伴随骨吸收范围快速增大;术后21～35d(慢性期),Foxp3表达增高,而破骨细胞数目迅速减少,骨吸收无继续扩大趋势。结论:Foxp3表达于根尖周病损中,可能主要在慢性期控制炎症扩展中发挥作用。

叉头样转录因子A2与肿瘤的研究进展

肝细胞核因子3β(HNF3β)是肝细胞核因子的一种,又称叉头样转录因子A2(FOXA2)。FOXA2可调控肝细胞的成熟、分化,并在胚胎发育、代谢调节等过程中发挥重要的调控作用。越来越多的研究表明FOXA2与肿瘤发生发展相关,相关的报道主要集中在FOXA2与肝细胞癌、肺癌、胰腺癌的关系,另外也有研究报道其在前列腺癌、甲状腺癌、黑色素瘤、食管癌中的作用,此文就FOXA2与肿瘤关系的研究进展作一综述。

麻杏石甘汤加味佐治小儿支原体肺炎的疗效及对叉头样转录因子3、调节性T细胞表达的影响

目的:探讨麻杏石甘汤加味佐治小儿支原体肺炎的临床疗效,分析其治疗机制。方法:选择2018年6月至2020年6月秦皇岛市中医医院收治的支原体肺炎患儿110例,按照随机数字表法分为两组,每组55例。对照组患儿予以阿奇霉素治疗,研究组患儿在对照组治疗基础上应用中药麻杏石甘汤加味。比较两组患儿治疗前后的中医证候评分,潮气呼吸肺功能指标[最大呼气流量(MEF)、达峰容积(VPEF)、潮气量(VT)和达峰容积比(VPEF/VE)]、呼出气一氧化氮(FeNO)、血清白三烯B4(LTB4)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平,比较两组患儿外周血叉头样转录因子3(Foxp3)蛋白、Foxp3 mRNA表达及CD4^(+)CD25^(+)调节性T细胞(Treg)、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg含量,并比较两组患儿的治疗总有效率。结果:治疗后,研究组患儿高热、咳嗽、胸痛和喘息等中医证候评分明显低于对照组,MEF、VPEF、VT和VPEF/VE水平明显高于对照组,FeNO、血清LTB4和血清ECP水平明显低于对照组,外周血Foxp3蛋白、Foxp3 mRNA表达及CD4^(+)CD25^(+)Treg、CD4^(+)Foxp3^(+)Treg含量明显高于对照组,上述差异均有统计学意义(P<0.01);研究组患儿的治疗总有效率为96.36%(53/55),明显高于对照组的83.64%(46/55),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:麻杏石甘汤加味辅助治疗小儿支原体肺炎,可有效改善患儿的中医证候评分和肺功能,抑制气道炎症,效果显著;其机制可能与上调Foxp3基因表达,促进Treg的合成和分泌,增强机体免疫功能有关。

叉头样转录因子3的表达及其甲基化状态在肝细胞性肝癌患者中的研究

目的研究叉头样转录因子3（Foxp3）的表达及启动子区甲基化水平在肝细胞性肝癌（HCC）与正常肝组织中的差异及其在HCC发病中的作用。方法使用荧光定量PCR检测39例HCC及13例正常肝组织中Foxp3mRNA水平，通过焦磷酸测序的方法检测其启动子区甲基化水平；组间比较采用秩和检验，相关性分析采用Spearman秩相关，P＜0．05为差异有统计学意义。结果Foxp3mRNA在肝癌组织中相对表达量为8．54±18．30，高于正常肝组织的4．88±14．72，两组比较，Z=-2．770，P=0．0056，差异有统计学意义。Foxp3启动子区A位点的甲基化水平在正常肝组织为90．60±3．50，高于肝癌组织的80．96±20．86，两组比较，Z=2．118，P=0．0339，差异有统计学意义；而正常肝组织和肝癌组织Foxp3启动子区其余B、C、D、E4个位点和整体甲基化水平比较，P值均＞0．05，差异均无统计学意义。Foxp3 mRNA水平与A位点的甲基化水平相关性分析r=-0．344，P=0．046，呈负相关；而其余4个位点与FoxD3 mRNA水平均无相关性∽值均〉0．05）。结论Foxp3高表达与Foxp3启动子区A位点低甲基化可能参与肝癌的发生和发展。

过敏性紫癜患儿外周血淋巴细胞活化基因-3、叉头样转录因子3信使核糖核酸表达与疾病严重程度的相关性分析

目的探讨过敏性紫癜(HSP)患儿外周血中淋巴细胞活化基因-3(LAG-3)、叉头样转录因子3(Foxp3)信使核糖核酸(mRNA)水平与疾病严重程度的相关性。方法选取2018年11月—2020年11月在衢州市人民医院收治的HSP患儿106例为研究组。将患儿主要症状和次要症状作为评价指标进行积分,依据总积分值将患儿分为轻度组(41例)、中度组(34例)、重度组(31例)。同期选取与研究组年龄、性别相对应的健康儿童106例作为对照组,酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血血清中LAG-3水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA水平;比较轻度组、中度组、重度组HSP症状总积分值;利用Pearson法分析血清LAG-3水平、Foxp3mRNA水平与HSP症状总积分值的相关性、LAG-3水平与Foxp3 mRNA水平的相关性。结果HSP患儿血清中LAG-3水平和外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA水平明显低于对照组(P<0.05),且随着病情程度加重,二者水平均逐渐降低(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组HSP症状总积分值依次升高,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。血清LAG-3水平与HSP症状总积分值呈负相关关系(r=-0.632,P<0.05),单个核细胞中Foxp3 mRNA水平与HSP症状总积分值呈负相关关系(r=-0.688,P<0.05),血清LAG-3水平与单个核细胞中Foxp3 mRNA水平呈正相关关系(r=0.595,P<0.05)。结论HSP患儿出现外周血血清中LAG-3水平和外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA水平降低现象,通过监测二者水平有助于评估病情严重程度。

转录因子Foxp3在原发性干燥综合征中的异常表达

目的观察转录因子Foxp3(forkhead box protein P3)在原发性干燥综合征患者(primary Sjgren's syndrome,pSS)外周血和唇腺中的表达。方法通过流式细胞术检测23例pSS患者和15例健康对照之间Foxp3阳性细胞的表达情况;通过免疫组织化学分析pSS患者和5例原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)对照之间Foxp3阳性细胞的表达差异。结果 pSS组[(5.34±6.50)%]外周血Foxp3阳性细胞的表达比健康对照组[(9.71±4.73)%]明显降低(t=2.190,P<0.05);与PBC对照组唇腺中Foxp3阳性细胞[(3.24±1.12)%]比较,pSS患者唇腺中Foxp3阳性细胞[(10.73±5.78)%]表达增加(t=2.840,P均<0.05)。结论 Foxp3阳性细胞在pSS外周血表达降低,而在唇腺中的表达并未减少,Foxp3参与了pSS的发病。

红景天含药血清对肿瘤坏死因子α诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响

目的探讨红景天含药血清对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(HFLS-RA)增殖的影响。方法制备空白组、模型组、雷公藤多苷组(9.45 mg·kg^(-1))及红景天低、中、高剂量组(1.05、2.1、4.2 g·kg^(-1))大鼠含药血清;体外培养HFLS-RA,以20 ng·mL^(-1)TNF-α及10%不同组含药血清对HFLS-RA进行干预。采用MTT法检测各组含药血清对HFLS-RA细胞的增殖作用;ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素17(IL-17)、转化生长因子β(TGF-β)、白细胞介素10(IL-10)的含量;PCR法检测细胞中维甲酸受体相关孤儿受体γt(ROR-γt)、信号转导及转录激活因子3(Stat3)、叉头样转录因子3(Foxp3)mRNA表达;Western Blot法检测细胞中ROR-γt、Stat3、Foxp3蛋白表达。结果与空白组比较,模型组培养HFLS-RA 24、48 h后细胞增殖水平明显升高(P<0.01),ROR-γt、Stat3 mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),IL-6、IL-17水平升高(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达下调(P<0.01),TGF-β、IL-10水平降低(P<0.01)。与模型组比较,红景天各剂量组HFLS-RA细胞增殖水平降低(P<0.01),ROR-γt、Stat3mRNA及蛋白表达下调(P<0.05,P<0.01),IL-6、IL-17水平降低(P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达上调(P<0.01),TGF-β、IL-10水平升高(P<0.01)。结论红景天含药血清可抑制TNF-α诱导的HFLS-RA细胞的异常增殖,其机制可能与下调ROR-γt、Stat3表达及上调Foxp3表达有关。

Foxp3在小鼠肺发育中的动态表达及意义

目的:通过分析叉头样转录因子3(forkhead box protein 3,Foxp3)在小鼠肺发育过程中的表达及其与肺发育相关标志物之间的关系,探讨Foxp3在肺发育中的可能作用。方法:根据小鼠肺发育的进程,选取胎鼠及新生鼠分为6组,分别于孕17.5 d及出生后1、4、7、14、21 d留取肺组织,HE染色观察肺组织形态,免疫组织化学染色检测CD31含量并观察肺微血管密度。qRT-PCR检测Foxp3及肺表面活性蛋白C(surfactant protein C,SP-C)、血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)、血管生成素-1(angiopoietin 1,Ang-1)mRNA表达,蛋白质印迹法检测Foxp3及SP-C、VEGF-A、Ang-1蛋白表达。结果:肺组织内Foxp3 mRNA在孕17.5 d小管期表达最高,后呈现不断减少趋势。SP-C mRNA在小鼠出生后1 d表达最高,随后逐渐减弱,直至肺泡化晚期。VEGF-A、Ang-1 mRNA在孕17.5 d表达最高,之后呈现不断减少趋势,最终趋于稳定。Foxp3蛋白在小管期已有表达,且在小管期及囊泡期表达最高,其后逐渐趋于平稳,VEGF-A及Ang-1在小管期及囊泡期表达亦最高,后逐渐减少;SP-C表达于出生后1 d达到最高,随后逐渐减少,并于肺泡化中晚期趋于平稳。相关性分析显示,Foxp3与SP-C、VEGF-A及Ang-1存在相关性(r分别为0.661、0.630和0.738)。结论:Foxp3在胎肺期及出生后早期呈现动态表达,Foxp3在小管期及囊泡早中期的高表达与SP-C、VEGF-A及Ang-1呈正相关,提示Foxp3可能促进肺泡上皮细胞及肺血管内皮细胞的增殖,参与肺发育过程。

逍遥散对胃癌荷瘤共病抑郁小鼠程序性死亡受体1抑制剂治疗的增敏作用及机制探讨

目的 观察逍遥散对胃癌荷瘤共病抑郁小鼠程序性死亡受体1(programmed cell death protein 1,PD-1)抑制剂治疗的增敏作用,并探讨其作用机制。方法 采用皮下移植胃癌细胞系——MCF细胞构建荷瘤小鼠共60只,随机分为荷瘤对照组、荷瘤共病抑郁组、PD-1抑制剂组、逍遥散联合PD-1抑制剂组,每组15只。荷瘤对照组不做任何干预,共饲养56天;荷瘤共病抑郁组是在荷瘤对照组的基础上每天以慢性不可预知温和应激干预,每天行适量生理盐水灌胃,分别在第1天、15天、29天、43天小鼠尾静脉注射适量生理盐水;PD-1抑制剂组是在荷瘤共病抑郁组的基础上,将小鼠尾静脉注射生理盐水改为PD-1抑制剂;逍遥散联合PD-1抑制剂组是在PD-1抑制剂组的基础上,将生理盐水灌胃改为逍遥散水提物灌胃。分组后第57天,荷瘤对照组、荷瘤共病抑郁组进行糖水偏好测试、陌生环境摄食实验,分析两组小鼠的行为学变化。计算荷瘤共病抑郁组、PD-1抑制剂组、逍遥散联合PD-1抑制剂组小鼠的生存率并绘制生存曲线;获取小鼠瘤体,并测量瘤体体积及重量,计算抑瘤率;采用ELISA法检测小鼠肿瘤组织吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase, IDO)、犬尿氨酸(kynurenine, Kyn)、芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AhR)的数值;对肿瘤组织通过免疫组化法检测小鼠肿瘤组织叉头样转录因子3(forkhead box P3,Foxp3)表达情况。结果 (1)行为学改变:与荷瘤对照组比较,荷瘤共病抑郁组的糖水偏好率显著降低(P<0.01),摄食潜伏时间显著延长(P<0.01)。(2)生存率差异:荷瘤共病抑郁组小鼠生存率为20%,PD-1抑制剂组小鼠生存率为26.7%,逍遥散联合PD-1抑制剂组小鼠生存率为40%。(3)肿瘤增值差异:逍遥散联合PD-1抑制剂组瘤体体积小于PD-1抑制剂组(P<0.05),PD-1抑制剂组小于荷瘤共病抑郁组(P<0.05);逍遥散联合PD-1抑制剂组瘤体重量显著小于PD-1抑制剂组(P<0.01),PD-1抑制剂组显著小于荷瘤共病抑郁组(P<0.01);逍遥散联合PD-1抑制剂组的抑瘤率为35.4%优于PD-1抑制剂组的22.1%。(4)相关蛋白表达差异:逍遥散联合PD-1抑制剂组肿瘤组织中IDO的表达显著低于PD-1抑制剂组及荷瘤共病抑郁组(P<0.01);逍遥散联合PD-1抑制剂组肿瘤组织中Kyn的表达显著低于PD-1抑制剂组(P<0.01),PD-1抑制剂组小于荷瘤共病抑郁组(P<0.05);逍遥散联合PD-1抑制剂组肿瘤组织中AhR的表达显著低于PD-1抑制剂组及荷瘤共病抑郁组(P<0.01);(5)各组小鼠肿瘤组织Foxp3表达情况:与荷瘤共病抑郁组比较,PD-1抑制剂组、逍遥散联合PD-1抑制剂组肿瘤组织中Foxp3蛋白表达均显著降低(P<0.01);与PD-1抑制剂组比较,逍遥散联合PD-1抑制剂组肿瘤组织中Foxp3蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论 逍遥散对PD-1抑制剂的增敏作用可能与通过下调IDO、Kyn、AhR水平,进而有效降低调节性T淋巴细胞的增值与分化而实现的。

叉头样／翼状螺旋转录因子3基因多态性与克罗恩病易感性和疾病表型的关系

目的 探讨浙江籍汉族人群叉头样/翼状螺旋转录因子（Foxp）3基因多态性与CD易感性和疾病表型的关系。 方法 纳入2007年1月至2015年12月确诊的268例CD患者和490名健康对照者，采用多重SNaPshot技术检测其Foxp3的rs3761547、rs2232365、rs2294021、rs3761548 4种单核苷酸多态性（SNP），评价其与英夫利西单克隆抗体疗效的关系，并进行连锁不平衡和单倍型分析。统计学方法采用非条件Logistic回归分析。 结果 31例接受英夫利西单克隆抗体治疗有效与19例无效患者比较，4个SNP的突变等位基因和基因型频率差异均无统计学意义（P均〉0.05）。连锁不平衡分析发现上述4个SNP彼此紧密连锁。男性CD组GCGC单倍型频率为29.20%（40/137），高于男性健康对照组的19.37%（43/222），差异有统计学意义（OR＝1.717，95%CI 1.045～2.820，P＝0.032）；女性CD组ACGA单倍型频率为13.36%（35/262），低于女性健康对照组的19.03%（102/536），差异有统计学意义（OR＝0.656，95%CI 0.433～0.995，P＝0.046）。男性结肠型（L2）ATAC单倍型频率为25.93%（7/27），低于回结肠型（L3）的75.38%（49/65），差异有统计学意义（OR＝0.114，95%CI 0.041～0.320，P〈0.01）；男性结肠型（L2）GCGC单倍型频率为51.85%（14/27），高于回结肠型（L3）的9.23%（6/65），差异有统计学意义（OR＝10.590，95%CI 3.423～32.758，P〈0.01）；男性狭窄型（B2）患者ATAC单倍型频率为73.21%（41/56），高于非狭窄、非穿透型（B1）的47.30%（35/74），差异有统计学意义（OR＝0.328，95%CI 0.156～0.693，P＝0.003）；男性狭窄型（B2）患者GCGC单倍型频率为17.86%（10/56），低于非狭窄、非穿透型（B1）的39.19%（29/74），差异有统计学意义（OR＝2.946，95%CI 1.295～6.784，P＝0.009）；男性穿透型（B3）患者ACGA单倍型频率为71.43%（5/7），高于非狭窄、非穿透型（B1）的12.16%（9/74），差异有统计学意义（OR＝0.055，95%CI 0.009～0.329，P〈0.01）。 结论 Foxp3（rs3761547、rs2232365、rs2294021、rs3761548）基因多态性与中国汉族CD易感性和疾病表型相关，但与英夫利西单克隆抗体的疗效无关。

氧化苦参碱调控CTLA-4和PD-1缓解小鼠类风湿关节炎的作用

目的 观察氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)通过免疫负调控机制对小鼠胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)的缓解作用。方法 将DBA/1J小鼠随机分为正常组、模型组、OMT组和地塞米松组,每组9只。采用胶原和佐剂等体积混合背部皮下多点注射诱导DBA/1J小鼠,构建CIA小鼠模型。OMT组和地塞米松组分别用氧化苦参碱和地塞米松进行腹腔注射,正常组注射同等剂量的生理盐水。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测脾淋巴细胞叉头样转录因子P3(forkhead box protein3,Foxp3)、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白-4(cytotoxic T-lymphocyte-associated protein-4,CTLA-4)和程序性死亡受体-1(programmed cell death protein-1,PD-1)的mRNA表达水平。采用苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin staining,HE)观察关节滑膜组织的异位生发中心。采用免疫组织化学法和Western blot检测Foxp3及CTLA-4和PD-1的表达。结果 OMT可缓解CIA小鼠关节肿胀度并降低其关节评分,增加脾淋巴细胞和关节组织Foxp3及CTLA-4的表达,降低PD-1的表达(P均<0.05),并减少炎性细胞大面积浸润。结论 OMT可能经增加调节性(Foxp3+)T细胞CTLA-4的表达但降低PD-1的表达而缓解RA。

肛周脓肿组织中Foxp3、IL-15表达情况及其与疾病复发的关联性研究

目的探讨肛周脓肿组织中叉头样转录因子3(Foxp3)和白细胞介素-15(IL-15)的表达情况,分析其与疾病复发的关联性。方法选取2019年1月至2020年7月于北京中医医院顺义医院进行手术治疗的肛周脓肿患者98例,收集患者术中的脓肿壁组织以及脓肿壁周围的正常组织。采用免疫组织化学染色法检测组织中Foxp3和IL-15的表达情况。分析肛周脓肿组织Foxp3及IL-15表达与患者临床病理特征和疾病复发的关联性。结果Foxp3蛋白主要表达于细胞核区域,IL-15蛋白主要表达于胞质和胞膜。脓肿壁组织中Foxp3、IL-15蛋白的阳性表达率高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。脓肿壁组织中Foxp3、IL-15表达情况与脓肿直径、愈合时间和术前肛瘘形成情况具有显著关联性(P<0.05),与性别、年龄、脓肿位置和病程无显著关联(P>0.05)。Cox回归分析结果显示,术前肛瘘、Foxp3阳性、IL-15阳性是促进肛周脓肿患者疾病复发的独立危险因素(P<0.05)。结论肛周脓肿组织中Foxp3和IL-15表达升高,与患者临床病理特征及疾病复发密切相关。

FOXP3减少瘢痕疙瘩成纤维细胞的胶原分泌及相关机制初探

目的:探讨在瘢痕疙瘩成纤维细胞(Keloid fibroblasts,KFB)中叉头样转录因子3(Forkhead-like transcription factor 3,FOXP3)对真皮胶原蛋白沉积及纤维化的影响及相关机制。方法:免疫组化检测瘢痕疙瘩组织中I型胶原蛋白(Collagen type I,COL1)、Ⅲ型胶原蛋白(Collagen typeⅢ,COL3)、IL-6、TGF-β_(1)、FOXP3的表达。体外分离培养KFB,并采用腺病毒过表达FOXP3或给予TGF-β_(1)抑制剂处理。通过Western blot检测对照组、过表达组以及对照组和抑制剂组的COL1、COL3的表达,ELISA检测TGF-β_(1)、IL-6的表达,Masson染色观察胶原沉积情况。结果:与对照组相比,实验组中的COL1、COL3、IL-6、TGF-β_(1)蛋白水平升高,FOXP3蛋白水平降低。经过表达FOXP3或TGF-β_(1)抑制剂处理后,KFB的TGF-β_(1)和IL-6表达降低,胶原蛋白沉积减少。结论:在KFB中FOXP3可能通过抑制TGF-β_(1)的表达,减少组织纤维化和胶原蛋白沉积。