叉头框蛋白P3在乳腺癌放疗患者中的表达及临床意义

目的 探讨叉头框蛋白P3(FOXP3)在乳腺癌放疗患者中的表达及临床意义。方法 选取90例乳腺癌放疗患者和30例乳腺纤维腺病患者,采用免疫组化染色法检测FOXP3表达情况,比较乳腺癌组织和乳腺纤维腺病组织中FOXP3表达情况,比较不同临床特征及分子分型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3表达情况,采用多因素Logistic回归模型分析乳腺癌患者中FOXP3阳性表达的影响因素。比较不同FOXP3表达情况乳腺癌患者的放疗疗效及无病生存期(DFS),采用Cox比例风险模型分析乳腺癌放疗患者DFS的影响因素。结果 乳腺癌组织中FOXP3阳性表达率为38.9%,明显低于乳腺纤维腺病组织的76.7%(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,临床分期、Ki-67表达情况、淋巴结转移情况均是乳腺癌患者中FOXP3阳性表达的独立影响因素(P﹤0.05)。Luminal A型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3阳性表达率高于Luminal B型、三阴性、人表皮生长因子受体2(HER2)过表达型乳腺癌患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。FOXP3阳性表达乳腺癌患者的局部失败率为2.9%,明显低于FOXP3阴性表达患者的25.5%(P﹤0.01)。FOXP3阳性表达乳腺癌患者的DFS明显优于FOXP3阴性表达患者(P﹤0.01)。Cox比例风险回归分析结果显示,FOXP3阳性表达、雌激素受体(ER)阳性表达均是乳腺癌放疗患者DFS的独立保护因素(P﹤0.05)。结论 乳腺癌组织中FOXP3阳性表达率较低,FOXP3阳性表达乳腺癌患者放疗局部失败率低于FOXP3阴性表达患者,且预后优于FOXP3阴性表达患者,FOXP3有望为乳腺癌的诊断、个体化治疗及预后评估提供新思路。

叉头框蛋白P3阳性调节性T细胞和程序性死亡受体1/程序性死亡受体配体1通路在早期胃癌中的表达及相关性分析

目的探讨叉头框蛋白P3阳性调节性T细胞(FOXP3+Tregs)与程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)通路在早期胃癌患者中的表达及相关性。方法收集2020年10月至2022年6月南京市浦口区中医院收治的早期胃癌患者(早期胃癌组)和慢性胃炎患者的胃黏膜组织(对照组)各10例,采用组织免疫荧光法分别检测早期胃癌组和对照组的胃黏膜组织中FOXP3+Tregs及PD-1/PD-L1通路的表达情况,分析早期胃癌组织中两者表达的相关性。结果早期胃癌组FOXP3+Tregs、PD-1、PD-L1表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。早期胃癌组胃黏膜组织中FOXP3+Tregs分别与PD-1、PD-L1表达水平呈正相关(r>0,P<0.01)。结论早期胃癌组织中存在FOXP3+Tregs和PD-1/PD-L1通路的共同表达,提示联合二者可为临床早期胃癌的判定提供重要参考。

叉头框蛋白P3在老年乳腺癌不同分子分型中的表达

目的探讨叉头框蛋白P3(FOXP3)在不同分子分型老年乳腺癌中的表达及其与患者临床特征的关系。方法免疫组化法检测120例老年乳腺癌组织及相应癌旁组织中FOXP3蛋白的表达情况;观察不同分子分型老年乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3蛋白阳性表达情况。收集120例老年乳腺癌患者的临床资料,分析影响不同分子分型老年乳腺癌患者FOXP3蛋白表达的因素。结果乳腺癌组织中FOXP3蛋白阳性率为50.83%,明显高于癌旁正常组织的39.17%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。Luminal A型、Luminal B型、人表皮生长因子受体2(HER2)过表达型和三阴性乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3蛋白阳性率分别为46.67%、51.11%、68.75%和44.83%,组间比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。有淋巴结转移的Luminal A型和Luminal B型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3蛋白的阳性表达率,均明显高于无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。有淋巴结转移和组织学分级为3级的HER2过表达型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3蛋白的阳性表达率,均高于无淋巴结转移和组织学分级为1~2级的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Logistic回归分析结果显示,淋巴结转移是Luminal A型、Luminal B型乳腺癌患者乳腺癌组织FOXP3蛋白阳性表达的影响因素(P﹤0.05)。结论FOXP3蛋白在老年乳腺癌的浸润及转移中发挥作用,是老年乳腺癌进展的重要因子,FOXP3蛋白阳性表达率高的患者易发生淋巴结转移,预后较差。

外周血叉头框蛋白P3的表达与原因不明复发性流产关系的研究

目的:探讨外周血叉头框蛋白P3(Foxp3)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系。方法:选择2018年5月至2020年5月于本院进行治疗的126例URSA患者作为URSA组,选择同期于本院进行产前检查的82例健康孕妇作为对照组。比较两组的一般资料;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Foxp3的mRNA表达;多因素Logisitic回归分析影响URSA发生的相关因素;Pearson相关性分析外周血Foxp3水平与导致URSA发生的危险因素的相关性;流式细胞术检测Foxp3对Th17/Treg平衡的调控作用;ROC曲线分析Foxp3水平对发生URSA的预测价值,并评价其准确度和有效性。结果:两组的孕酮、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17、转化生长因子-β(TGF-β)、Foxp3、Th17、Treg、Th17/Treg差异均有统计学意义(P<0.05)。孕酮、IL-10、TGF-β、Treg、Foxp3水平及IL-6、IL-17、Th17水平、Th17/Treg比值均是影响URSA发生的独立危险因素(OR>1,P<0.05)。Foxp3分别与孕酮、IL-10、TGF-β、Treg呈显著正相关(r>0,P<0.05),与IL-6、IL-17、Th17、Th17/Treg呈显著负相关(r<0,P<0.05);Foxp3刺激CD4+T细胞12小时和24小时能够显著降低Th17细胞比例和Th17/Treg比值,增加Treg细胞比例。ROC曲线分析Foxp3预测URSA发生的曲线下面积为0.795,准确度和有效性较好。结论:孕酮、IL-10、TGF-β、Treg、Foxp3水平降低及IL-6、IL-17、Th17水平及Th17/Treg比值增加均可能导致URSA的发生风险增加,Foxp3对Th17/Treg平衡具有调控作用。

叉头框蛋白P3在胃癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的探讨叉头框蛋白P3(FOXP3)在胃癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法选取115例胃癌患者的胃癌组织及相应的癌旁组织,免疫组化法检测胃癌组织和癌旁组织中FOXP3的表达情况及与患者临床特征的关系,随访3年,比较胃癌组织和癌旁组织中FOXP3不同表达情况胃癌患者的总生存期。结果胃癌组织中FOXP3高表达52例,低表达63例;癌旁组织中FOXP3高表达47例,低表达68例;胃癌组织与癌旁组织中FOXP3表达情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。不同肿瘤最大径、N分期胃癌患者胃癌组织中FOXP3表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。胃癌组织中FOXP3低表达胃癌患者的平均总生存期为34.837个月,短于FOXP3高表达组患者43.392个月(P﹤0.05);癌旁组织中FOXP3低表达胃癌患者的平均总生存期为34.959个月,短于FOXP3高表达患者的44.278个月(P﹤0.05)。结论FOXP3在胃癌组织和癌旁组织中的表达情况无明显差异,其高表达往往提示肿瘤最大径更小、区域淋巴结转移范围更小且程度更轻,患者生存期更长。

CD4＋CD25＋叉头框蛋白p3＋调节性T细胞在结直肠癌中抑制肿瘤免疫的机制

目的 探讨CD4＋CD25＋叉头框蛋白p3（Foxp3）-＋调节性T细胞在结直肠癌中抑制肿瘤免疫的机制。方法收集结直肠癌组织48例,息肉组织22例,正常组织21例,采用免疫组织化学法检测Foxp3-＋调节性T细胞及白细胞介素（IL）-10阳性肿瘤细胞在上述组织中的含量,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法检测Foxp3及信号转导与转录激活因子（STAT3）mRNA在不同组织中的基因表达,同时采用x2检验分析上述指标与肿瘤临床病理特征之间的关系。结果 Foxp3及IL-10在结直肠癌组织中阳性细胞表达率分别为45.8%和68.8%,较息肉组织（13.6%和31.8%）及正常组织（9.5%和23.8%）显著升高（P〈0.01）,肿瘤组织中Foxp3及STAT3 mRNA的相对表达量分别为0.644±0.059、0.343±0.036,较息肉组织（0.322±0.020、0.212±0.028）及正常组织（0.309±0.016、0.202±0.021）明显升高（P〈0.01）,结直肠癌组织中Foxp3与STAT3基因表达量呈正相关（r=0.526,P〈0.05）,Foxp3与IL-10蛋白表达呈正相关（r=0.314,P〈0.05）,肿瘤组织中Foxp3的表达量与组织学分级、淋巴结转移、TNM分期明显相关（P〈0.05）,与年龄、性别无明显相关（P〈0.05）。结论 CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞通过Foxp3及其他相关抑制性细胞因子的表达抑制肿瘤免疫,进而引起肿瘤免疫逃逸,从而促进肿瘤的发生发展。

宫颈癌组织中叉头框蛋白P3程序性死亡蛋白-1及程序性死亡蛋白-1受体蛋白的表达情况及与临床病理特征的关系

目的 探讨宫颈癌组织中叉头框蛋白P3(FOXP3)、程序性死亡蛋白-1(PD-1)及程序性死亡蛋白-1受体(PD-L1)蛋白的表达情况及与临床病理特征的关系。方法 选择中宁县中医医院2016年11月—2018年11月手术切除的宫颈癌患者的癌组织为观察组60例作为研究对象;另选择60例宫颈组织正常者作为对照组。采用免疫组化SP法检测FOXP3、PD-1及PD-L1蛋白表达。比较两组PD-1、PD-L1及FOXP3阳性表达率,通过不同病理特征比较PD-1、PD-L1及FOXP3阳性表达。结果 观察组PD-1、PD-L1及FOXP3阳性表达率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄和淋巴结转移PD-1阳性表达比较差异无统计学意义(P>0.05);FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期PD-1阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期,低分化PD-1阳性表达率高于高、中分化,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄和淋巴结转移PD-L1阳性表达比较差异无统计学意义(P>0.05);FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期PD-L1阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期,低分化PD-L1阳性表达率高于高、中分化,差异有统计学意义(P<0.05)。不同年龄和淋巴结转移FOXP3阳性表达比较差异无统计学意义(P>0.05);FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期FOXP3阳性表达率高于Ⅰ~Ⅱ期,低分化FOXP3阳性表达率高于高、中分化,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宫颈癌组织中PD-1、PD-L1及FOXP3蛋白高表达,且随着FIGO分期延长和分化程度加重表达明显升高,有重要研究价值。

GARP、Foxp3及TGF-β在桥本甲状腺炎病人PBMC中的表达及意义

目的:探讨桥本甲状腺炎(HT)病人外周血单个核细胞(PBMC)中糖蛋白A重复序列为主的蛋白(GARP)、叉头框蛋白p3(Foxp3)、转化生长因子β(TGF-β)mRNA表达水平和意义。方法:选取HT病人32例作为观察组,选取同期健康体检者32名作为对照组。采用化学发光免疫法测定2组血清促甲状腺激素(TSH)、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)水平,放射免疫法检测甲状腺抗体TmAb、TgAb水平。采用实时荧光定量PCR检查HT病人PBMC中GARP、Foxp3、TGF-βmRNA,分析HT病人PBMC中GARP、Foxp3、TGF-βmRNA表达量与甲状腺功能指标水平的相关性。结果:2组TT3、TT4、TSH水平差异均无统计学意义(P>0.05),观察组TgAb和TmAb水平均明显高于对照组(P<0.01)。观察组GARP、Foxp3、TGF-βmRNA表达水平均明显低于对照组(P<0.01)。Pearson相关分析显示,HT病人PBMC中GARP mRNA表达水平与TgAb水平呈负相关关系(P<0.05),与TT3水平呈明显正相关关系(P<0.01)。结论:HT病人PBMC中GARP、Foxp3、TGF-βmRNA表达降低。GARP mRNA与TgAb水平呈负相关关系,与TT3水平呈明显正相关关系,可能与HT的发生、发展相关。

乳腺癌组织中FOXP3、CMTM6、Shoc2表达及其临床意义

目的探讨叉头框蛋白P3(FOXP3)、趋化素样因子超家族6(CMTM6)、Shoc2在乳腺癌组织中的表达及与患者临床病理特征、预后的关系。方法选取51例女性乳腺癌患者为研究对象,采集癌组织与癌旁正常组织,以免疫组织化学法测定FOXP3、CMTM6、Shoc2的阳性表达。收集患者的年龄等一般资料,分析FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与乳腺癌临床病理特征之间的关系;随访3年,分析三项指标表达与患者预后的关系。结果癌组织FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与乳腺癌患者的年龄、体重指数(BMI)、肿瘤大小无关(P>0.05);FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与患者的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达患者的3年生存率低于阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FOXP3、CMTM6、Shoc2在乳腺癌组织内呈高表达,与患者的分化程度、临床分期、淋巴结转移联系紧密,参与疾病的发生与发展,且三项指标表达水平越高,则患者预后越差。

IRF4通过调控FOXP3影响支气管肺发育不良模型小鼠肺血管内皮细胞增殖

目的:通过分析干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4,IRF4)和叉头框蛋白P3(forkhead box P3,FOXP3)的相互作用及其与肺血管内皮细胞(pulmonary vascular endothelial cells,PVECs)增殖的关系,探讨IRF4在支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型小鼠肺发育中的作用。方法:利用85%高氧暴露建立C57BL/6小鼠BPD模型,以空气暴露为正常对照,将小鼠分为常氧7 d(normoxia for 7 d,N7)组、高氧7 d(hyperoxia for 7 d,H7)组、常氧14 d(normoxia for 14 d,N14)组和高氧14 d(hyperoxia for 14 d,H14)组,每组6只。分别在空气或高氧暴露7 d和14 d取肺组织,苏木素-伊红染色观察肺组织病理情况;免疫组化染色检测PVECs增殖标志物血小板内皮细胞黏附分子1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)的表达;Western blot检测血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)、FOXP3和IRF4蛋白的表达水平;免疫共沉淀检测IRF4和FOXP3蛋白的相互作用。结果:与同时间点常氧组相比,高氧组小鼠肺组织CD31阳性细胞平均光密度和肺血管密度均显著降低(P<0.01);高氧组小鼠肺组织VEGFA、Ang-1和FOXP3蛋白表达水平均显著降低,IRF4蛋白表达水平显著升高(P<0.01);免疫共沉淀提示IRF4和FOXP3存在相互作用,且高氧组较常氧组相互作用显著增强(P<0.01);IRF4和FOXP3蛋白表达呈显著负相关(R=-0.932,P<0.01),FOXP3蛋白表达与CD31呈显著正相关(R=0.865,P<0.01)。结论:在高氧诱导的BPD模型小鼠中,IRF4可能通过抑制FOXP3蛋白表达影响PVECs的增殖和肺血管发育。

直肠癌患者MDSC百分比和RORαmRNA、IL-17E mRNA、FOXP3 mRNA表达的临床意义

目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)中视黄酸相关孤儿核受体α(RORα)mRNA、白细胞介素17E(IL-17E)mRNA、叉头框蛋白P3(FOXP3)mRNA和髓源性抑制细胞(MDSC)百分比在直肠癌中的临床价值。方法选取直肠癌患者95例(直肠癌组)、健康体检者45名(正常对照组),收集所有研究对象的临床资料,检测所有研究对象PBMC中RORαmRNA、FOXP3 mRNA、IL-17E mRNA水平和MDSC百分比。结果直肠癌组FOXP3 mRNA、IL-17E mRNA相对表达量和MDSC百分比均高于正常对照组(P<0.05),RORαmRNA相对表达量低于正常对照组(P<0.05)。有淋巴转移、TNM分期Ⅲ期的直肠癌患者FOXP3mRNA、IL-17E mRNA相对表达量和MDSC百分比分别高于无淋巴转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期的患者(P<0.05),RORαmRNA相对表达量分别低于无淋巴转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期的患者(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤直径的直肠癌患者之间RORαmRNA、FOXP3 mRNA、IL-17E mRNA相对表达量和MDSC百分比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论直肠癌患者IL-17E mRNA、FOXP3 mRNA水平和MDSC显著升高,RORαmRNA水平显著降低,且与TNM分期和淋巴转移有关,或可作为直肠癌筛查和病情监测的指标。

基于FoxP3、RORγt及相关细胞因子探讨半夏泻心汤对慢性萎缩性胃炎的干预机制

目的基于叉头框蛋白P3(FoxP3)、RAR相关孤儿受体γt(RORγt)及相关细胞因子探讨半夏泻心汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)的干预机制。方法将48只大鼠随机分为空白组6只和模型制备组42只,模型制备组以脱氧胆酸钠加氨水联合法建立CAG模型。造模成功后,除去意外死亡及用于模型验证的12只大鼠,将剩余的30只大鼠随机分为模型组、半夏泻心汤低剂量组、半夏泻心汤中剂量组、半夏泻心汤高剂量组、叶酸组,各6只。给予空白组和模型组大鼠灌胃生理盐水,给予叶酸组大鼠灌胃叶酸,分别按照4.185 g/kg、8.370 g/kg、16.740 g/kg给予半夏泻心汤低剂量、半夏泻心汤中剂量、半夏泻心汤高剂量组大鼠灌胃半夏泻心汤,均连续干预12周。实验期间观察各组大鼠一般情况。给药结束后,取各组大鼠胃黏膜组织观察病理学变化及细胞凋亡情况,并检测FoxP3 mRNA、RORγt mRNA表达水平,取血清标本检测白细胞介素(IL)-10、IL-17、转化生长因子β(TGF-β)含量。结果与空白组相比,模型组大鼠毛色泛黄且光泽度下降,食欲降低,大便稀溏,肛周潮湿,体质量下降,胃黏膜固有层腺体数量减少,凋亡细胞增多,血清IL-10、IL-17、TGF-β含量及胃黏膜组织FoxP3 mRNA、RORγt mRNA表达水平均升高(均P<0.05)。与模型组比较,半夏泻心汤各剂量组和叶酸组大鼠毛色光泽度及大便性状有所改善,食欲增大,肛周毛发干燥,体质量增长,胃黏膜固有层腺体数量不同程度增加,凋亡细胞减少,血清IL-10、IL-17、TGF-β含量及胃黏膜组织FoxP3 mRNA、RORγt mRNA表达水平均下降(均P<0.05)。在半夏泻心汤各剂量组中,半夏泻心汤低剂量组上述指标改善最为明显。结论半夏泻心汤能够有效改善CAG大鼠的临床症状和病理改变,低剂量的半夏泻心汤可获得最佳的干预效果。半夏泻心汤干预CAG的机制可能与其下调大鼠胃黏膜Foxp3、RoRγt的mRNA表达及相关细胞因子的表达有关。

雷公藤多甙对骨缺损模型大鼠Foxp3及骨形态发生蛋白7表达的影响

目的探讨雷公藤多甙对骨缺损模型大鼠叉头框蛋白P3(Foxp3)及骨形态发生蛋白7(BMP7)表达的影响。方法清洁级雌性SD大鼠36只,随机数字表法分为2组:雷公藤多甙组与对照组,每组各18只。2组均建立骨缺损模型,雷公藤多甙组给予雷公藤多甙20 mg处理缺损部位,对照组于缺损部位放入等体积的小牛血清。术后6周与12周,记录2组大鼠形态变化、最大载荷与最大应变量;测量椎体骨组织学形态参数,包括骨小梁体积(TBV)百分比和骨小梁表面(TRS)百分比;免疫组化分析Foxp3和BMP7表达情况;观察2组大鼠病理组织情况。结果所有大鼠均顺利建模成功,精神状况良好,反应灵敏、迅速,饮食、饮水均正常,毛发整洁。术后6周与12周,雷公藤多甙组大鼠的最大载荷、最大应变量均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。雷公藤多甙组大鼠TBV%显著高于对照组,TRS%显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。雷公藤多甙组大鼠Foxp3、BMP-7相对表达水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。雷公藤多甙组缺损部位病理病变较对照组轻,炎性细胞浸润明显减少,软骨基质及软骨细胞无退行性变,关节软骨表面光滑。结论雷公藤多甙在骨缺损模型大鼠中的应用安全性佳,能促进Foxp3及BMP-7的表达,可改善骨缺损组织的组织学形态与椎体力学状况,有利于提高修复效果。

外周血Foxp3、RANTES联合检测对原因不明复发性流产的临床诊断价值

目的探讨外周血叉头框蛋白p3(Foxp3)、T细胞正常表达和分泌刺激因子(RANTES)联合检测对原因不明复发性流产的临床诊断价值。方法选择2021年7月至2022年9月本院收治的128例原因不明复发性流产患者为病例组,另选取同期于本院体检的128例健康早孕者为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有研究对象外周血的Foxp3和RANTES水平,流式细胞仪检测外周血辅助性T细胞(Th17)和调节性T细胞(Treg)水平。采用Pearson和Spearman相关性分析法分析外周血Foxp3和RANTES水平与免疫指标和原因不明复发性流产的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血Foxp3和RANTES水平对原因不明复发性流产的诊断价值。结果与对照组比较,病例组外周血Foxp3、RANTES水平和Treg比例显著下降(P<0.05),Th17比例和Th17/Treg显著升高(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,病例组外周血Foxp3和RANTES水平与Th17、Th17/Treg均呈显著负相关(P<0.05),与Treg均呈显著正相关(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,外周血Foxp3和RANTES水平均与原因不明复发性流产的发生呈显著负相关(r=-0.539,-0.554,P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清Foxp3水平单独诊断原因不明复发性流产发生的曲线下面积(AUC)为0.820[95%CI(0.767,0.865)],其敏感度、特异度分别为70.31%、85.94%;血清RANTES水平单独诊断原因不明复发性流产发生的AUC为0.840[95%CI(0.789,0.883)],其敏感度、特异度分别为69.53%、85.16%;血清Foxp3和RANTES联合诊断原因不明复发性流产发生的AUC为0.909[95%CI(0.867,0.942)],显著大于Foxp3单独诊断的AUC(Z=4.165,P=0.000)和RANTES单独诊断的AUC(Z=3.183,P=0.002)。结论Foxp3和RANTES水平均与原因不明复发性流产孕妇的免疫平衡失调有关,二者联合对原因不明复发性流产具有较高的诊断价值。

Foxp3在肿瘤转移中的研究进展

叉头框蛋白p3（fork head box p3，Foxp3）是叉头样转录因子家族的成员之一，其主要表达于CD4＋CD5＋调节性T细胞（regulatory T cell，Treg），与该细胞的发育及生物学功能有密切的关系。Foxp3的表达与人类自身免疫系统疾病及多种类型肿瘤的发生、发展密切相关。现就Foxp3与CD4＋CD5＋Treg细胞关系及其在肿瘤转移中作用的研究进行综述。

针刺对胚胎着床障碍大鼠CD4^+ CD25^+ Foxp3^+调节性T细胞的影响

目的:观察针刺对胚胎着床障碍大鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的影响。方法:144只孕鼠随机分为对照组(N)、米非司酮组(M)、米非司酮+针刺组(A)和米非司酮+黄体酮组(W),每组随机再分为6 d组、8 d组和10 d组。其中M组、A组和W组妊娠1 d给予米非司酮-麻油溶液造模,N组则给予等量麻油溶液。同时,每天下午A组固定并行针刺三阴交和后三里,N组和M组仅固定,W组肌肉注射黄体酮,直到处死当天结束。统计孕鼠胚胎着床数,用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜的CD4+Foxp3+Treg细胞的比例,Western blotting和real-time PCR测定着床点的子宫内膜Foxp3的表达。结果:与N组相比,M组的着床胚胎数、外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜CD4+Foxp3+Treg细胞的比例、着床点子宫内膜Foxp3蛋白和mRNA的表达均明显下降(P<0.05);与M组相比,A组和W组的着床胚胎数、外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜CD4+Foxp3+Treg细胞的比例以及着床点子宫内膜Foxp3蛋白和mRNA的表达均有不同程度地升高。结论:针刺改善胚胎着床障碍大鼠的胚胎着床可能与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的调节密切相关。

子宫内膜异位症患者异位内膜组织NFAT、FOXP3表达及其临床意义

目的探讨子宫内膜异位症(EMT)患者异位内膜组织中活化T细胞核因子(NFAT)、叉头框蛋白P3(FOXP3)的表达及其临床意义。方法选取2017年1月至2018年6月北京市朝阳区妇幼保健院收治的行宫腔镜联合腹腔镜手术的68例EMT患者作为EMT组,另选取同期因子宫肌瘤行子宫全切的60例患者作为对照组。免疫组化法检测内膜组织中NFAT、FOXP3的表达;EMT组患者进行术后3年随访,采用Kaplan-Meier生存曲线分析NFAT、FOXP3表达与EMT复发的关系。结果 EMT组异位内膜组织中NFAT、FOXP3阳性表达率显著高于对照组正常内膜组织(P<0.05);EMT组不同分期患者NFAT、FOXP3阳性表达率比较,差异具有统计学意义(P<0.05),且随着分期的增加,患者NFAT、FOXP3阳性表达率显著增加(P<0.05);EMT组患者NFAT和FOXP3阳性表达呈正相关(r=0.373,P<0.05);NFAT、FOXP3阳性表达患者EMT术后3年复发率高于阴性表达患者,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EMT患者异位内膜组织中NFAT、FOXP3阳性表达率显著高于正常内膜组织,与患者EMT分期有关,而与患者3年内是否复发无显著相关性。

肺癌患者癌组织及癌旁组织中IL-32、Foxp3、CXCL8的表达水平及意义

目的探讨白介素32(interleukin 32,简称IL-32),叉头框P3蛋白(Foxp3)以及CXC趋化因子配体8(CXCL8)在肺癌患者癌组织和癌旁组织中的表达。方法收集2015年1月-2016年12月于我院行手术治疗并经术后病理证实为肺癌患者的癌组织标本83例及癌旁组织标本129例,行免疫组化检查,分别检测标本中IL-32、Foxp3以及CXCL8的表达。计数资料组间比较采用χ~2检验。结果 IL-32在肺癌组织中的阳性表达率(71/83,85.5%)明显高于癌旁组织(35/129,27.1%),差异具有统计学意义(χ~2=35.47,P<0.01)。在中分化(23/34,67.7%)和低分化(12/18,66.7%)的肺癌组织中IL-32的表达强度明显高于高分化(4/19,21.1%)肿瘤组织,三者间差异具有统计学意义(χ~2=11.64,P<0.01)。83例肺癌标本中61例有不同程度Foxp3表达,阳性率为73.5%;129例癌旁组织中有58例Foxp3表达,阳性率为45.0%。Foxp3在肺癌组织中的阳性表达率(61/83,73.5%)明显高于癌旁组织(58/129,45.0%),差异具有统计学意义(χ~2=27.74,P<0.01);高分化(15/23,65.2%)的肺癌组织中Foxp3的表达强度明显高于中分化(5/25,20.0%)和低分化(1/13,7.7%)肿瘤组织,三者间差异具有统计学意义(χ~2=12.51,P<0.01)。83例肺癌标本中58例有不同程度CXCL8表达,阳性率为69.9%;129例癌旁组织中有84例CXCL8表达,阳性率为65.1%。高分化(11/19,57.9%)的肺癌组织中CXCL8的表达强度明显高于中分化(3/17,17.6%)和低分化(2/22,9.1%)肿瘤组织,三者间差异具有统计学意义(χ~2=12.84,P<0.01)。结论肺癌组织中IL-32表达水平明显高于癌旁组织,其强阳性率随肿瘤分化程度降低而升高;Foxp3在肺癌中的表达高于癌旁组织,其强阳性率随肿瘤分化程度的降低而降低;CXCL8在肺癌组织与癌旁组织中的表达水平无明显差异,其强阳性率随肿瘤分化程度的降低而降低。IL-32,Foxp3以及CXCL8的表达水平可能与肺癌的发生发展有关。

调节性T细胞在阵发性睡眠性血红蛋白尿症异常克隆中的免疫机制研究

目的测定阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者调节性T细胞的变化,探讨其在PNH异常克隆中可能的免疫机制。方法2018年1月至2022年1月在宁德师范学院附属宁德市医院血液科就诊的31例PNH患者为病例组,其中发作性PNH 15例(男10例、女5例,年龄23~69岁)、再生障碍性贫血-阵发性睡眠性血红蛋白尿(AA-PNH)16例(男11例、女5例,年龄20~68岁);25例健康体检者为对照组(男14例、女11例,年龄19~56岁)。用流式细胞仪检测各组外周血T细胞和Th细胞亚群变化以及CD4^(+)CD25^(+)T细胞和Th3细胞数量,用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(RT-PCR)测定转化生长因子-β(TGF-β)和叉头框蛋白P3(FOXP3)的表达水平,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TGF-β和白细胞介素-10(IL-10)浓度。采用F检验、Bonferroni方法、H检验、χ^(2)检验。结果AA-PNH组CD4^(+)/CD3^(+)细胞和CD4^(+)/CD8^(+)比例低于对照组[(44.55±11.91)%比(57.61±6.90)%、0.66(0.38,1.26)比1.32(0.86,1.64)],CD8^(+)/CD3^(+)细胞高于对照组[(62.31±10.76)%比(45.51±5.54)%],差异均有统计学意义(均P<0.05);AA-PNH组Th1/CD3^(+)CD4^(+)细胞高于发作性PNH组及对照组[(24.27±4.30)%比(12.61±3.02)%、(4.07±1.93)%],差异有统计学意义(P<0.05)。AA-PNH组及发作性PNH组CD4^(+)CD25^(+)T细胞和Th3细胞的数量高于对照组[(67.82±15.67)×10^(6)/L、(97.11±17.10)×10^(6)/L比(43.86±9.52)×10^(6)/L,(57.15±10.58)×10^(6)/L、(82.27±15.15)×10^(6)/L比(42.35±9.33)×10^(6)/L],差异均有统计学意义(均P<0.05)。发作性PNH组、AA-PNH组中FOXP3及TGF-β的mRNA的阳性表达率和TGF-β及IL-10浓度均高于对照组[86.67%(13/15)、75.00%(12/16)比40.00%(10/25),73.33%(11/15)、62.50%(10/16)比36.00%(9/25),(49.76±2.03)μg/L、(37.29±1.78)μg/L比(17.01±3.27)μg/L,(7.86±1.17)pg/ml、(5.57±1.13)pg/ml比(1.33±0.49)pg/ml],差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论PNH患者调节性T细胞数量增加,功能亢进,推测其免疫抑制作用可能使其在PNH异常克隆中逃避免疫监视。

三子补血汤对骨髓增生异常综合征患者Treg及Th17细胞水平的影响

目的研究三子补血汤中药疗法对骨髓增生异常综合征(MDS)患者外周血调节性T淋巴细胞(Treg细胞)、辅助性T细胞17(Th17细胞)水平以及转录因子叉头框蛋白p3/维甲酸相关孤儿受体γt(Foxp3/RORγt)表达水平的影响。方法选取2016年1月至2022年12月在上海市东方医院经规范治疗的76例MDS患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为中药组(38例)和对照组(38例)。中药组患者采用三子补血汤治疗,对照组患者采用常规支持治疗。通过Prism 5.0和SPSS 20.0统计软件对临床特征、分型、中医症候群及疗效等指标进行统计学分析。通过流式细胞技术检测MDS患者外周血Treg细胞和Thl7细胞比例。采用免疫组化方法标记MDS患者骨髓中的转录因子Foxp3与RORγt并检测阳性细胞数。结果治疗6个月后,中药组患者外周血Treg和Th17细胞比例低于治疗前,差别有统计学意义(P<0.05)。中药组患者转录因子Foxp3及RORγt水平低于治疗前,差别有统计学意义(P<0.05)。中药组患者的中医症状积分、骨髓原始细胞比例以及输血依赖程度等指标均低于治疗前,差别有统计学意义(P<0.05)。结论三子补血汤中药疗法能够有效调节MDS患者外周血Treg细胞及Th17细胞比例,从而增强细胞免疫功能,改善症状,提高缓解率并降低向急性白血病转化的风险。中药组患者在治疗期间未出现严重不良反应,方剂安全性良好。因此,本研究认为三子补血汤中药疗法是一种极具潜力的MDS治疗方案,值得进一步地研究及推广应用。