FOXO4对高糖环境下视网膜血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响

目的:研究叉头框转录因子O4(FOXO4)对高糖环境下视网膜血管内皮细胞氧化应激和凋亡的影响。方法:以高糖培养人视网膜血管内皮细胞,Real-Time PCR和Western blot检测细胞中FOXO4表达变化。以FOXO4RNAi慢病毒、对照载体慢病毒感染视网膜血管内皮细胞,以高糖培养液培养,Real-Time PCR和Western blot检测干扰效率。收集培养液上清和细胞,用试剂盒检测培养液上清中超氧化物歧化酶(superoxide orgotein dismutase,SOD)活性、丙二醛(malonaldehyde,MDA)含量和细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。流式细胞术测定细胞凋亡变化,Western blot检测细胞中凋亡蛋白Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9的表达变化。结果:高糖处理后的视网膜血管内皮细胞中FOXO4表达上调,FOXO4 RNAi慢病毒感染下调高糖环境下视网膜血管内皮细胞中FOXO4表达水平,对照载体慢病毒对细胞中FOXO4表达水平没有影响。高糖诱导视网膜血管内皮细胞中ROS水平升高,降低细胞培养液中SOD活性,提高MDA含量,增加细胞凋亡率,促进细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白表达。下调FOXO4表达的视网膜血管内皮细胞经高糖诱导后,细胞培养液中的SOD活性升高,MDA水平降低,细胞中ROS水平降低,细胞凋亡减少,细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平降低,与未干扰FOXO4表达的视网膜血管内皮细胞比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:高糖诱导视网膜血管内皮细胞表达FOXO4,敲低其表达降低高糖诱导的细胞氧化应激和凋亡水平。

FOXO4和nNOS在星型胶质细胞瘤中的表达及意义

目的:观察转录因子叉头框蛋白O4(FOXO4)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)在星型胶质细胞瘤中的表达,探讨星型胶质细胞瘤恶性程度发生发展的的机制,进而寻找可能的药物治疗靶点。方法:从弋矶山医院病理科调取星形胶质细胞瘤27例蜡块标本。运用双盲法进行免疫组织化学和免疫荧光染色,检测各例星型胶质细胞瘤组织中FOXO4、nNOS的表达。结果:FOXO4在Ⅰ~Ⅳ级星形胶质细胞瘤组织中的阳性表达,随着肿瘤级别的升高而逐渐降低(P<0.05)。而随着星形胶质细胞瘤级别升高,nNOS的阳性表达也越来越高(P<0.05)。结论:FOXO4阳性表达的减少,nNOS阳性表达的增强,可能与星形胶质细胞瘤瘤恶性程度发生发展有关;调控FOXO4、nNOS的异常表达可能是新的治疗药物靶点之一。

急性ST段抬高型心肌梗死患者PCI术后血清Foxo4和miR-23b-3p表达水平及临床意义

目的探讨急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后血清转录因子叉头框蛋白O4(Foxo4)、微小RNA-23b-3p(miR-23b-3p)表达水平及临床意义。方法选取2019年1月-2021年1月于驻马店市中心医院行PCI手术的STEMI患者210例,按照PCI术后6个月内是否发生主要心血管不良事件(MACE)分为MACE组(47例)和非MACE组(163例)。收集患者术前一般资料、临床指标水平及术中、术后相关资料,采用qRTPCR法检测血清miR-23b-3p表达水平,ELISA法检测血清Foxo4表达水平。按照血清Foxo4表达水平的四分位数间距,将STEMI患者分为A1组(≤2.76 ng/L,53例)、B1组(>2.76~3.27 ng/L,52例)、C1组(>3.27~3.94 ng/L,53例)、D1组(>3.94 ng/L,52例);按照血清miR-23b-3p表达水平的四分位数间距分为A2组(≤0.95,53例)、B2组(>0.95~0.99,52例)、C2组(>0.99~1.03,53例)、D2组(>1.03,52例)。Pearson法分析血清Foxo4与miR-23b-3p的相关性及二者与临床指标的相关性,Kaplan-Meier曲线分析血清Foxo4、miR-23b-3p表达水平与STEMI患者PCI术后MACE的关系,COX回归分析影响STEMI患者PCI术后6个月内发生MACE的影响因素。结果MACE组入院时Killip分级≥2级及无复流患者占比、肌钙蛋白T(cTnT)峰值及血清Foxo4表达水平均高于非MACE组,差异均有统计学意义(t/Z=6.113、10.234、3.782、9.284,P均<0.05),左室射血分数(LVEF)及血清miR-23b-3p表达水平低于非MACE组,差异均有统计学意义(t/Z=5.235、10.437,P均<0.05)。STEMI患者血清Foxo4与miR-23b-3p、LVEF表达水平成负相关,与cTnT峰值水平成正相关(r=-0.627、-0.412、0.369,P<0.05);血清miR-23b-3p与LVEF表达水平成正相关,与cTnT峰值水平成负相关(r=0.503、-0.384,P<0.05)。Kaplan-Meier曲线分析显示,STEMI患者PCI术后MACE发生率A1组、B1组、C1组、D1组分别为9.43%、15.39%、26.42%、38.46%,A2组、B2组、C2组、D2组分别为45.28%、32.69%、9.43%、1.92%,差异均有统计学意义(χ^(2)=15.561、38.273,P均<0.05)。COX多因素回归分析显示,入院时Killip分级、LVEF、Foxo4及miR-23b-3p表达水平是STEMI患者PCI术后发生MACE的独立影响因素(P<0.05)。结论STEMI患者PCI术后6个月发生MACE的患者血清Foxo4表达水平上升,miR-23b-3p表达水平下降,二者均是MACE发生的独立影响因素,可作为评估MACE的有效指标。

熊果酸对酒精诱导的大鼠小肠黏膜屏障损伤的保护作用

目的:研究熊果酸(UA)对酒精诱导的大鼠小肠黏膜屏障损伤的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组,每日给予生理盐水灌胃;酒精模型组,每日给予体积分数50%酒精8 mL/(kg bw·d)灌胃2周,第3周开始以12 mL/(kg bw·d)灌胃;熊果酸组,每日给予150 mg/(kg bw·d)熊果酸,1 h后再灌酒精,剂量同酒精模型组;谷氨酰胺组,每日给予300 mg/(kg bw·d)谷氨酰胺,酒精灌胃同熊果酸组,试验持续8周。采用HE染色法观察大鼠小肠黏膜组织病理学变化;利用透射电镜观察小肠黏膜细胞超微结构的改变;检测了大鼠血浆D-乳酸(D-LA)、肠脂肪酸结合蛋白(FABP2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)质量浓度的改变;测定了小肠组织中叉头框转录因子O4(FOXO4)、磷酸化叉头框转录因子O4(p-FOXO4)、和闭锁小带蛋白-1(ZO-1)的表达水平。结果:酒精模型组小肠绒毛萎缩、变短,排列不整,紧密连接肿胀,有炎性细胞浸润。与酒精模型组相比,熊果酸组和谷氨酰胺组大鼠小肠黏膜病理变化有所改善;血浆D-LA、FABP2、TNF-α和IL-1β质量浓度明显降低;p-FOXO4表达量减少、ZO-1表达量升高;各组FOXO4表达水平无显著差异。结论:熊果酸可以改善酒精诱导的大鼠小肠黏膜屏障损伤,其作用机制可能与改善肠黏膜通透性,抑制FOXO4蛋白发生磷酸化,进而减少促炎因子TNF-α和IL-1β的释放有关。