辅助性T细胞17/调节性T细胞及维甲酸相关孤儿受体γt/叉头框转录因子P3失衡在妊娠相关疾病中的研究进展

在免疫学领域,妊娠相当于一次成功的半同种移植现象,母体对半异体胎儿的免疫耐受情况关乎妊娠的结局。辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)是最新发现的CD^(+)_(4)T淋巴细胞亚群,相关转录因子维甲酸相关孤儿受体γt和叉头框转录因子P3的表达水平与Th17/Treg之间的平衡密切相关。Th17/Treg免疫失衡会导致母体对胎儿的异常攻击,造成母胎耐受紊乱,并与复发性流产、先兆子痫、妊娠糖尿病等病理妊娠有关。

叉头框蛋白P3在乳腺癌放疗患者中的表达及临床意义

目的 探讨叉头框蛋白P3(FOXP3)在乳腺癌放疗患者中的表达及临床意义。方法 选取90例乳腺癌放疗患者和30例乳腺纤维腺病患者,采用免疫组化染色法检测FOXP3表达情况,比较乳腺癌组织和乳腺纤维腺病组织中FOXP3表达情况,比较不同临床特征及分子分型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3表达情况,采用多因素Logistic回归模型分析乳腺癌患者中FOXP3阳性表达的影响因素。比较不同FOXP3表达情况乳腺癌患者的放疗疗效及无病生存期(DFS),采用Cox比例风险模型分析乳腺癌放疗患者DFS的影响因素。结果 乳腺癌组织中FOXP3阳性表达率为38.9%,明显低于乳腺纤维腺病组织的76.7%(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,临床分期、Ki-67表达情况、淋巴结转移情况均是乳腺癌患者中FOXP3阳性表达的独立影响因素(P﹤0.05)。Luminal A型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3阳性表达率高于Luminal B型、三阴性、人表皮生长因子受体2(HER2)过表达型乳腺癌患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。FOXP3阳性表达乳腺癌患者的局部失败率为2.9%,明显低于FOXP3阴性表达患者的25.5%(P﹤0.01)。FOXP3阳性表达乳腺癌患者的DFS明显优于FOXP3阴性表达患者(P﹤0.01)。Cox比例风险回归分析结果显示,FOXP3阳性表达、雌激素受体(ER)阳性表达均是乳腺癌放疗患者DFS的独立保护因素(P﹤0.05)。结论 乳腺癌组织中FOXP3阳性表达率较低,FOXP3阳性表达乳腺癌患者放疗局部失败率低于FOXP3阴性表达患者,且预后优于FOXP3阴性表达患者,FOXP3有望为乳腺癌的诊断、个体化治疗及预后评估提供新思路。

叉头框蛋白P3阳性调节性T细胞和程序性死亡受体1/程序性死亡受体配体1通路在早期胃癌中的表达及相关性分析

目的探讨叉头框蛋白P3阳性调节性T细胞(FOXP3+Tregs)与程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)通路在早期胃癌患者中的表达及相关性。方法收集2020年10月至2022年6月南京市浦口区中医院收治的早期胃癌患者(早期胃癌组)和慢性胃炎患者的胃黏膜组织(对照组)各10例,采用组织免疫荧光法分别检测早期胃癌组和对照组的胃黏膜组织中FOXP3+Tregs及PD-1/PD-L1通路的表达情况,分析早期胃癌组织中两者表达的相关性。结果早期胃癌组FOXP3+Tregs、PD-1、PD-L1表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。早期胃癌组胃黏膜组织中FOXP3+Tregs分别与PD-1、PD-L1表达水平呈正相关(r>0,P<0.01)。结论早期胃癌组织中存在FOXP3+Tregs和PD-1/PD-L1通路的共同表达,提示联合二者可为临床早期胃癌的判定提供重要参考。

叉头框蛋白P3在老年乳腺癌不同分子分型中的表达

目的探讨叉头框蛋白P3(FOXP3)在不同分子分型老年乳腺癌中的表达及其与患者临床特征的关系。方法免疫组化法检测120例老年乳腺癌组织及相应癌旁组织中FOXP3蛋白的表达情况;观察不同分子分型老年乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3蛋白阳性表达情况。收集120例老年乳腺癌患者的临床资料,分析影响不同分子分型老年乳腺癌患者FOXP3蛋白表达的因素。结果乳腺癌组织中FOXP3蛋白阳性率为50.83%,明显高于癌旁正常组织的39.17%,差异有统计学意义(P﹤0.01)。Luminal A型、Luminal B型、人表皮生长因子受体2(HER2)过表达型和三阴性乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3蛋白阳性率分别为46.67%、51.11%、68.75%和44.83%,组间比较差异无统计学意义(P﹥0.05)。有淋巴结转移的Luminal A型和Luminal B型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3蛋白的阳性表达率,均明显高于无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。有淋巴结转移和组织学分级为3级的HER2过表达型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3蛋白的阳性表达率,均高于无淋巴结转移和组织学分级为1~2级的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Logistic回归分析结果显示,淋巴结转移是Luminal A型、Luminal B型乳腺癌患者乳腺癌组织FOXP3蛋白阳性表达的影响因素(P﹤0.05)。结论FOXP3蛋白在老年乳腺癌的浸润及转移中发挥作用,是老年乳腺癌进展的重要因子,FOXP3蛋白阳性表达率高的患者易发生淋巴结转移,预后较差。

雷帕霉素对自发性系统性红斑狼疮小鼠外周血调节性T细胞叉头框家族转录因子P3表达量的影响

系统性红斑狼疮、银屑病及白癜风等是临床常见的皮肤疾病,机体免疫功能失调是其发生的重要原因。调节性T细胞（regulatory T cells,Tregs）是一类可以调节其他免疫细胞功能的T细胞亚型,可以通过多种机制抑制免疫效应从而维持体内免疫稳态[1]。近年来研究发现叉头框家族成员P3（forkhead box P3,Foxp3）是调节性T细胞的特异性分子。

叉头框蛋白P3在胃癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系

目的探讨叉头框蛋白P3(FOXP3)在胃癌中的表达及与患者临床特征和预后的关系。方法选取115例胃癌患者的胃癌组织及相应的癌旁组织,免疫组化法检测胃癌组织和癌旁组织中FOXP3的表达情况及与患者临床特征的关系,随访3年,比较胃癌组织和癌旁组织中FOXP3不同表达情况胃癌患者的总生存期。结果胃癌组织中FOXP3高表达52例,低表达63例;癌旁组织中FOXP3高表达47例,低表达68例;胃癌组织与癌旁组织中FOXP3表达情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。不同肿瘤最大径、N分期胃癌患者胃癌组织中FOXP3表达情况比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。胃癌组织中FOXP3低表达胃癌患者的平均总生存期为34.837个月,短于FOXP3高表达组患者43.392个月(P﹤0.05);癌旁组织中FOXP3低表达胃癌患者的平均总生存期为34.959个月,短于FOXP3高表达患者的44.278个月(P﹤0.05)。结论FOXP3在胃癌组织和癌旁组织中的表达情况无明显差异,其高表达往往提示肿瘤最大径更小、区域淋巴结转移范围更小且程度更轻,患者生存期更长。

外周血叉头框蛋白P3的表达与原因不明复发性流产关系的研究

目的:探讨外周血叉头框蛋白P3(Foxp3)的表达与原因不明复发性流产(URSA)的关系。方法:选择2018年5月至2020年5月于本院进行治疗的126例URSA患者作为URSA组,选择同期于本院进行产前检查的82例健康孕妇作为对照组。比较两组的一般资料;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测Foxp3的mRNA表达;多因素Logisitic回归分析影响URSA发生的相关因素;Pearson相关性分析外周血Foxp3水平与导致URSA发生的危险因素的相关性;流式细胞术检测Foxp3对Th17/Treg平衡的调控作用;ROC曲线分析Foxp3水平对发生URSA的预测价值,并评价其准确度和有效性。结果:两组的孕酮、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-17、转化生长因子-β(TGF-β)、Foxp3、Th17、Treg、Th17/Treg差异均有统计学意义(P<0.05)。孕酮、IL-10、TGF-β、Treg、Foxp3水平及IL-6、IL-17、Th17水平、Th17/Treg比值均是影响URSA发生的独立危险因素(OR>1,P<0.05)。Foxp3分别与孕酮、IL-10、TGF-β、Treg呈显著正相关(r>0,P<0.05),与IL-6、IL-17、Th17、Th17/Treg呈显著负相关(r<0,P<0.05);Foxp3刺激CD4+T细胞12小时和24小时能够显著降低Th17细胞比例和Th17/Treg比值,增加Treg细胞比例。ROC曲线分析Foxp3预测URSA发生的曲线下面积为0.795,准确度和有效性较好。结论:孕酮、IL-10、TGF-β、Treg、Foxp3水平降低及IL-6、IL-17、Th17水平及Th17/Treg比值增加均可能导致URSA的发生风险增加,Foxp3对Th17/Treg平衡具有调控作用。

EBV miR-BART17-3p对原发免疫性血小板减少症患儿Treg/Th17平衡的影响

目的探讨EBV mi R-BART17-3p影响原发免疫性血小板减少症(ITP)患儿Treg/Th17平衡的机制。方法收集ITP患儿(ITP组,20例)和健康儿童(对照组,20例)外周血并分离CD_(4)^(+)T细胞。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法、Western blot法、酶联免疫吸附法检测EBV mi R-BART17-3p、T细胞免疫球蛋白黏蛋白3(Tim-3)、叉头框蛋白P3(Fox P3)、白细胞介素17A(IL-17A)和转化生长因子-β(TGF-β)的m RNA、蛋白表达水平及含量。采用双荧光素酶报告基因实验考察EBV mi R-BART17-3p对Tim-3表达水平的影响。将15只BALB/C小鼠随机分为空白对照组、模型组、观察组,各5只。腹腔注射抗血小板抗体MWReg30以复制ITP小鼠模型,建模4 d后观察组小鼠予尾静脉注射携带EBV mi R-BART17-3p inhibitor的腺病毒载体。细胞染色并观察形态,检测外周血中TGF-β、IL-17A含量及血小板计数,采用流式细胞仪分别检测CD_(4)^(+)T细胞中Th17和Treg水平,并计算二者百分比。结果与对照组比较,ITP组患儿外周血EBV mi R-BART17-3p表达水平显著升高,Tim-3和TGF-βm RNA表达水平显著降低(P<0.05);Tim-3 m RNA表达水平与EBV mi R-BART17-3p表达水平呈显著负相关(r=-0.732,P<0.001)。Tim-3慢病毒载体p LKO.1-sh-Tim-3(sh-Tim-3)可显著降低Tim-3、Fox P3、TGF-β水平(P<0.05)。mi R-BART17-3p mimic显著升高了CD_(4)^(+)T细胞中mi R-BART17-3p的表达水平,并显著降低了Tim-3、Fox P3、TGF-βm RNA和蛋白表达水平(P<0.05);mi R-BART17-3p mimic可显著降低TGF-β含量,Tim-3+mi R-BART17-3p过表达逆转了mi R-BART17-3p mimic对TGF-β的抑制作用。动物实验结果显示,沉默EBV mi R-BART17-3p可促进Treg分化,减少脾脏和骨髓组织中的巨核细胞计数,并显著增加外周血中血小板计数。结论EBV mi R-BART17-3p可通过Fox P3/Tim-3途径调节ITP患儿Treg/Th17的免疫失衡。

GARP、Foxp3及TGF-β在桥本甲状腺炎病人PBMC中的表达及意义

目的:探讨桥本甲状腺炎(HT)病人外周血单个核细胞(PBMC)中糖蛋白A重复序列为主的蛋白(GARP)、叉头框蛋白p3(Foxp3)、转化生长因子β(TGF-β)mRNA表达水平和意义。方法:选取HT病人32例作为观察组,选取同期健康体检者32名作为对照组。采用化学发光免疫法测定2组血清促甲状腺激素(TSH)、总三碘甲状腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)水平,放射免疫法检测甲状腺抗体TmAb、TgAb水平。采用实时荧光定量PCR检查HT病人PBMC中GARP、Foxp3、TGF-βmRNA,分析HT病人PBMC中GARP、Foxp3、TGF-βmRNA表达量与甲状腺功能指标水平的相关性。结果:2组TT3、TT4、TSH水平差异均无统计学意义(P>0.05),观察组TgAb和TmAb水平均明显高于对照组(P<0.01)。观察组GARP、Foxp3、TGF-βmRNA表达水平均明显低于对照组(P<0.01)。Pearson相关分析显示,HT病人PBMC中GARP mRNA表达水平与TgAb水平呈负相关关系(P<0.05),与TT3水平呈明显正相关关系(P<0.01)。结论:HT病人PBMC中GARP、Foxp3、TGF-βmRNA表达降低。GARP mRNA与TgAb水平呈负相关关系,与TT3水平呈明显正相关关系,可能与HT的发生、发展相关。

乳腺癌组织中FOXP3、CMTM6、Shoc2表达及其临床意义

目的探讨叉头框蛋白P3(FOXP3)、趋化素样因子超家族6(CMTM6)、Shoc2在乳腺癌组织中的表达及与患者临床病理特征、预后的关系。方法选取51例女性乳腺癌患者为研究对象,采集癌组织与癌旁正常组织,以免疫组织化学法测定FOXP3、CMTM6、Shoc2的阳性表达。收集患者的年龄等一般资料,分析FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与乳腺癌临床病理特征之间的关系;随访3年,分析三项指标表达与患者预后的关系。结果癌组织FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与乳腺癌患者的年龄、体重指数(BMI)、肿瘤大小无关(P>0.05);FOXP3、CMTM6、Shoc2表达与患者的分化程度、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。FOXP3、CMTM6、Shoc2阳性表达患者的3年生存率低于阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论FOXP3、CMTM6、Shoc2在乳腺癌组织内呈高表达,与患者的分化程度、临床分期、淋巴结转移联系紧密,参与疾病的发生与发展,且三项指标表达水平越高,则患者预后越差。

叉头框蛋白P3在子宫颈鳞癌中的表达及与细胞增殖和凋亡指标的关系

目的探究叉头框蛋白P3(FOXP3)在子宫颈鳞癌中的表达,探讨其临床意义,分析其与细胞增殖和凋亡指标的关系。方法选取2016年2月—2017年5月在锦州医科大学附属第一医院确诊为子宫颈鳞癌并行根治手术治疗的55例患者作为研究对象,留取术后肿瘤组织;另收集同期在该院因子宫肌瘤行子宫全切后留取的正常子宫颈组织55例作为对照,应用免疫组化法检测FOXP3、增殖细胞核抗原(PCNA)、Ki-67、Bcl-2相关X蛋白(BAX)及Caspase-3的表达。结果子宫颈鳞癌肿瘤细胞中FOXP3表达阳性率(58.18%)明显高于子宫颈上皮组织(16.36%),差异均有统计学意义(χ^(2)=20.5712,均P<0.05)。FOXP3在不同病理分型、有无淋巴结转移及肿瘤是否限于子宫体的表达中差异均有统计学意义(均P<0.05)。子宫颈鳞癌中FOXP3与PCNA、FOXP3及Ki-67均呈正相关关系(均P<0.05),FOXP3与BAX、FOXP3及Caspase-3均呈负相关关系(均P<0.05)。生存分析显示FOXP3与生存时间相关(P<0.05)。结论FOXP3在子宫颈鳞癌肿瘤细胞中高表达,与细胞增殖和凋亡指标具有相关性,FOXP3可能为子宫颈鳞癌独立的预后因子。

基于FoxP3、RORγt及相关细胞因子探讨半夏泻心汤对慢性萎缩性胃炎的干预机制

目的基于叉头框蛋白P3(FoxP3)、RAR相关孤儿受体γt(RORγt)及相关细胞因子探讨半夏泻心汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)的干预机制。方法将48只大鼠随机分为空白组6只和模型制备组42只,模型制备组以脱氧胆酸钠加氨水联合法建立CAG模型。造模成功后,除去意外死亡及用于模型验证的12只大鼠,将剩余的30只大鼠随机分为模型组、半夏泻心汤低剂量组、半夏泻心汤中剂量组、半夏泻心汤高剂量组、叶酸组,各6只。给予空白组和模型组大鼠灌胃生理盐水,给予叶酸组大鼠灌胃叶酸,分别按照4.185 g/kg、8.370 g/kg、16.740 g/kg给予半夏泻心汤低剂量、半夏泻心汤中剂量、半夏泻心汤高剂量组大鼠灌胃半夏泻心汤,均连续干预12周。实验期间观察各组大鼠一般情况。给药结束后,取各组大鼠胃黏膜组织观察病理学变化及细胞凋亡情况,并检测FoxP3 mRNA、RORγt mRNA表达水平,取血清标本检测白细胞介素(IL)-10、IL-17、转化生长因子β(TGF-β)含量。结果与空白组相比,模型组大鼠毛色泛黄且光泽度下降,食欲降低,大便稀溏,肛周潮湿,体质量下降,胃黏膜固有层腺体数量减少,凋亡细胞增多,血清IL-10、IL-17、TGF-β含量及胃黏膜组织FoxP3 mRNA、RORγt mRNA表达水平均升高(均P<0.05)。与模型组比较,半夏泻心汤各剂量组和叶酸组大鼠毛色光泽度及大便性状有所改善,食欲增大,肛周毛发干燥,体质量增长,胃黏膜固有层腺体数量不同程度增加,凋亡细胞减少,血清IL-10、IL-17、TGF-β含量及胃黏膜组织FoxP3 mRNA、RORγt mRNA表达水平均下降(均P<0.05)。在半夏泻心汤各剂量组中,半夏泻心汤低剂量组上述指标改善最为明显。结论半夏泻心汤能够有效改善CAG大鼠的临床症状和病理改变,低剂量的半夏泻心汤可获得最佳的干预效果。半夏泻心汤干预CAG的机制可能与其下调大鼠胃黏膜Foxp3、RoRγt的mRNA表达及相关细胞因子的表达有关。

IRF4通过调控FOXP3影响支气管肺发育不良模型小鼠肺血管内皮细胞增殖

目的:通过分析干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4,IRF4)和叉头框蛋白P3(forkhead box P3,FOXP3)的相互作用及其与肺血管内皮细胞(pulmonary vascular endothelial cells,PVECs)增殖的关系,探讨IRF4在支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型小鼠肺发育中的作用。方法:利用85%高氧暴露建立C57BL/6小鼠BPD模型,以空气暴露为正常对照,将小鼠分为常氧7 d(normoxia for 7 d,N7)组、高氧7 d(hyperoxia for 7 d,H7)组、常氧14 d(normoxia for 14 d,N14)组和高氧14 d(hyperoxia for 14 d,H14)组,每组6只。分别在空气或高氧暴露7 d和14 d取肺组织,苏木素-伊红染色观察肺组织病理情况;免疫组化染色检测PVECs增殖标志物血小板内皮细胞黏附分子1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)的表达;Western blot检测血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)、血管生成素1(angiopoietin-1,Ang-1)、FOXP3和IRF4蛋白的表达水平;免疫共沉淀检测IRF4和FOXP3蛋白的相互作用。结果:与同时间点常氧组相比,高氧组小鼠肺组织CD31阳性细胞平均光密度和肺血管密度均显著降低(P<0.01);高氧组小鼠肺组织VEGFA、Ang-1和FOXP3蛋白表达水平均显著降低,IRF4蛋白表达水平显著升高(P<0.01);免疫共沉淀提示IRF4和FOXP3存在相互作用,且高氧组较常氧组相互作用显著增强(P<0.01);IRF4和FOXP3蛋白表达呈显著负相关(R=-0.932,P<0.01),FOXP3蛋白表达与CD31呈显著正相关(R=0.865,P<0.01)。结论:在高氧诱导的BPD模型小鼠中,IRF4可能通过抑制FOXP3蛋白表达影响PVECs的增殖和肺血管发育。

直肠癌患者MDSC百分比和RORαmRNA、IL-17E mRNA、FOXP3 mRNA表达的临床意义

目的探讨外周血单个核细胞(PBMC)中视黄酸相关孤儿核受体α(RORα)mRNA、白细胞介素17E(IL-17E)mRNA、叉头框蛋白P3(FOXP3)mRNA和髓源性抑制细胞(MDSC)百分比在直肠癌中的临床价值。方法选取直肠癌患者95例(直肠癌组)、健康体检者45名(正常对照组),收集所有研究对象的临床资料,检测所有研究对象PBMC中RORαmRNA、FOXP3 mRNA、IL-17E mRNA水平和MDSC百分比。结果直肠癌组FOXP3 mRNA、IL-17E mRNA相对表达量和MDSC百分比均高于正常对照组(P<0.05),RORαmRNA相对表达量低于正常对照组(P<0.05)。有淋巴转移、TNM分期Ⅲ期的直肠癌患者FOXP3mRNA、IL-17E mRNA相对表达量和MDSC百分比分别高于无淋巴转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期的患者(P<0.05),RORαmRNA相对表达量分别低于无淋巴转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期的患者(P<0.05)。不同性别、年龄、肿瘤直径的直肠癌患者之间RORαmRNA、FOXP3 mRNA、IL-17E mRNA相对表达量和MDSC百分比差异均无统计学意义(P>0.05)。结论直肠癌患者IL-17E mRNA、FOXP3 mRNA水平和MDSC显著升高,RORαmRNA水平显著降低,且与TNM分期和淋巴转移有关,或可作为直肠癌筛查和病情监测的指标。

外周血Foxp3、RANTES联合检测对原因不明复发性流产的临床诊断价值

目的探讨外周血叉头框蛋白p3(Foxp3)、T细胞正常表达和分泌刺激因子(RANTES)联合检测对原因不明复发性流产的临床诊断价值。方法选择2021年7月至2022年9月本院收治的128例原因不明复发性流产患者为病例组,另选取同期于本院体检的128例健康早孕者为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测所有研究对象外周血的Foxp3和RANTES水平,流式细胞仪检测外周血辅助性T细胞(Th17)和调节性T细胞(Treg)水平。采用Pearson和Spearman相关性分析法分析外周血Foxp3和RANTES水平与免疫指标和原因不明复发性流产的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血Foxp3和RANTES水平对原因不明复发性流产的诊断价值。结果与对照组比较,病例组外周血Foxp3、RANTES水平和Treg比例显著下降(P<0.05),Th17比例和Th17/Treg显著升高(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,病例组外周血Foxp3和RANTES水平与Th17、Th17/Treg均呈显著负相关(P<0.05),与Treg均呈显著正相关(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,外周血Foxp3和RANTES水平均与原因不明复发性流产的发生呈显著负相关(r=-0.539,-0.554,P<0.05)。ROC曲线结果显示,血清Foxp3水平单独诊断原因不明复发性流产发生的曲线下面积(AUC)为0.820[95%CI(0.767,0.865)],其敏感度、特异度分别为70.31%、85.94%;血清RANTES水平单独诊断原因不明复发性流产发生的AUC为0.840[95%CI(0.789,0.883)],其敏感度、特异度分别为69.53%、85.16%;血清Foxp3和RANTES联合诊断原因不明复发性流产发生的AUC为0.909[95%CI(0.867,0.942)],显著大于Foxp3单独诊断的AUC(Z=4.165,P=0.000)和RANTES单独诊断的AUC(Z=3.183,P=0.002)。结论Foxp3和RANTES水平均与原因不明复发性流产孕妇的免疫平衡失调有关,二者联合对原因不明复发性流产具有较高的诊断价值。

针刺对胚胎着床障碍大鼠CD4^+ CD25^+ Foxp3^+调节性T细胞的影响

目的:观察针刺对胚胎着床障碍大鼠CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的影响。方法:144只孕鼠随机分为对照组(N)、米非司酮组(M)、米非司酮+针刺组(A)和米非司酮+黄体酮组(W),每组随机再分为6 d组、8 d组和10 d组。其中M组、A组和W组妊娠1 d给予米非司酮-麻油溶液造模,N组则给予等量麻油溶液。同时,每天下午A组固定并行针刺三阴交和后三里,N组和M组仅固定,W组肌肉注射黄体酮,直到处死当天结束。统计孕鼠胚胎着床数,用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜的CD4+Foxp3+Treg细胞的比例,Western blotting和real-time PCR测定着床点的子宫内膜Foxp3的表达。结果:与N组相比,M组的着床胚胎数、外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜CD4+Foxp3+Treg细胞的比例、着床点子宫内膜Foxp3蛋白和mRNA的表达均明显下降(P<0.05);与M组相比,A组和W组的着床胚胎数、外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞和子宫内膜CD4+Foxp3+Treg细胞的比例以及着床点子宫内膜Foxp3蛋白和mRNA的表达均有不同程度地升高。结论:针刺改善胚胎着床障碍大鼠的胚胎着床可能与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的调节密切相关。

肺癌患者癌组织及癌旁组织中IL-32、Foxp3、CXCL8的表达水平及意义

目的探讨白介素32(interleukin 32,简称IL-32),叉头框P3蛋白(Foxp3)以及CXC趋化因子配体8(CXCL8)在肺癌患者癌组织和癌旁组织中的表达。方法收集2015年1月-2016年12月于我院行手术治疗并经术后病理证实为肺癌患者的癌组织标本83例及癌旁组织标本129例,行免疫组化检查,分别检测标本中IL-32、Foxp3以及CXCL8的表达。计数资料组间比较采用χ~2检验。结果 IL-32在肺癌组织中的阳性表达率(71/83,85.5%)明显高于癌旁组织(35/129,27.1%),差异具有统计学意义(χ~2=35.47,P<0.01)。在中分化(23/34,67.7%)和低分化(12/18,66.7%)的肺癌组织中IL-32的表达强度明显高于高分化(4/19,21.1%)肿瘤组织,三者间差异具有统计学意义(χ~2=11.64,P<0.01)。83例肺癌标本中61例有不同程度Foxp3表达,阳性率为73.5%;129例癌旁组织中有58例Foxp3表达,阳性率为45.0%。Foxp3在肺癌组织中的阳性表达率(61/83,73.5%)明显高于癌旁组织(58/129,45.0%),差异具有统计学意义(χ~2=27.74,P<0.01);高分化(15/23,65.2%)的肺癌组织中Foxp3的表达强度明显高于中分化(5/25,20.0%)和低分化(1/13,7.7%)肿瘤组织,三者间差异具有统计学意义(χ~2=12.51,P<0.01)。83例肺癌标本中58例有不同程度CXCL8表达,阳性率为69.9%;129例癌旁组织中有84例CXCL8表达,阳性率为65.1%。高分化(11/19,57.9%)的肺癌组织中CXCL8的表达强度明显高于中分化(3/17,17.6%)和低分化(2/22,9.1%)肿瘤组织,三者间差异具有统计学意义(χ~2=12.84,P<0.01)。结论肺癌组织中IL-32表达水平明显高于癌旁组织,其强阳性率随肿瘤分化程度降低而升高;Foxp3在肺癌中的表达高于癌旁组织,其强阳性率随肿瘤分化程度的降低而降低;CXCL8在肺癌组织与癌旁组织中的表达水平无明显差异,其强阳性率随肿瘤分化程度的降低而降低。IL-32,Foxp3以及CXCL8的表达水平可能与肺癌的发生发展有关。

胃癌组织中Foxp3^(+)Tregs和pDCs与胃微生物群失调的关系

目的探讨胃癌组织中Foxp3^(+)Tregs和浆细胞样树突状细胞(p DCs)与胃微生物群失调的关系。方法选择我院2018年2月-2020年2月诊治的胃癌患者97例(收集其胃癌组织标本和癌旁标本)和同期健康者40例,胃癌患者根据类型分为肠型、弥漫性和混合型,分别为31例、28例、38例。采用免疫组化染色、Westernblot法测定胃癌组织中Foxp3^(+)Tregs、p DCs表达,16S r RNA法检测胃微生物群,并分析各指标表达差异及相关性。结果肠型、弥漫性和混合型癌巢组织中Foxp3^(+)Tregs、p DCs表达量逐渐升高(P<0.05)。胃癌患者鞘氨醇单胞菌、幽门螺杆菌、单形拟杆菌水平低于健康者,而痤疮丙酸杆菌、咽峡炎链球菌、产黑普氏菌高于健康者;不同类型胃癌患者氨醇单胞菌、幽门螺杆菌、单形拟杆菌、痤疮丙酸杆菌、咽峡炎链球菌、产黑普菌水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。痤疮丙酸杆菌、咽峡炎链球菌、产黑普菌与Foxp3^(+)Tregs、p DCs数量呈正比关系(P<0.05)。结论胃癌癌旁和癌巢组织微生境中细菌丰度降低,不同类型胃癌肿瘤微生境中有不同的优势微生物;组织中Foxp3^(+)Tregs、p DCs与胃微生物群失调相关。

microRNA-325-3p在体外受精-胚胎移植反复自然流产中的作用及机制

目的研究在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)患者中,microRNA-325-3p(miR-325-3p)是否参与反复自然流产的发生和发展,以及在其中的作用机制。方法选取2015年1月至2019年6月在唐山市妇幼保健院就诊的89例IVF-ET反复自然流产患者和202例正常妊娠行人工流产患者作为研究对象。获取其妊娠4~12周的流产组织。通过原位杂交及实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)比较IVF-ET反复自然流产患者组织与正常人工流产患者组织中miR-325-3p表达差异;通过生物信息学网站预测miR-325-3p的可能靶基因,采用免疫印迹(Western blot)、qRT-PCR技术在细胞及组织水平对其进行验证,探究两者在IVF-ET反复自然流产患者中的作用机制。结果原位杂交显示,IVF-ET反复自然流产患者组织均表达miR-325-3p强信号,而正常人工流产患者组织仅存在miR-325-3p弱表达(P<0.01),qRT-PCR进一步证实该结果。Western blot、qRT-PCR检测miR-325-3p模拟物、抑制物转染的细胞,证实叉头框转录因子p3(Foxp3)为miR-325-3p的靶基因之一,且Foxp3蛋白及mRNA水平的表达量被miR-325-3p模拟物显著降调,被抑制物显著上调。与正常人工流产患者组织比较,IVF-ET反复自然流产患者组织Foxp3蛋白及mRNA表达均显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 MiR-325-3p的其中一个靶基因是Foxp3,通过miR-325-3p增高进而降调Foxp3的表达,来实现免疫耐受降低,可能是IVF-ET患者发生反复自然流产的机制之一。

雷公藤多甙对骨缺损模型大鼠Foxp3及骨形态发生蛋白7表达的影响

目的探讨雷公藤多甙对骨缺损模型大鼠叉头框蛋白P3(Foxp3)及骨形态发生蛋白7(BMP7)表达的影响。方法清洁级雌性SD大鼠36只,随机数字表法分为2组:雷公藤多甙组与对照组,每组各18只。2组均建立骨缺损模型,雷公藤多甙组给予雷公藤多甙20 mg处理缺损部位,对照组于缺损部位放入等体积的小牛血清。术后6周与12周,记录2组大鼠形态变化、最大载荷与最大应变量;测量椎体骨组织学形态参数,包括骨小梁体积(TBV)百分比和骨小梁表面(TRS)百分比;免疫组化分析Foxp3和BMP7表达情况;观察2组大鼠病理组织情况。结果所有大鼠均顺利建模成功,精神状况良好,反应灵敏、迅速,饮食、饮水均正常,毛发整洁。术后6周与12周,雷公藤多甙组大鼠的最大载荷、最大应变量均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。雷公藤多甙组大鼠TBV%显著高于对照组,TRS%显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。雷公藤多甙组大鼠Foxp3、BMP-7相对表达水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。雷公藤多甙组缺损部位病理病变较对照组轻,炎性细胞浸润明显减少,软骨基质及软骨细胞无退行性变,关节软骨表面光滑。结论雷公藤多甙在骨缺损模型大鼠中的应用安全性佳,能促进Foxp3及BMP-7的表达,可改善骨缺损组织的组织学形态与椎体力学状况,有利于提高修复效果。