叉头状转录因子P3基因突变致新生儿糖尿病三例分子遗传学及临床特征分析

目的研究中国人群中叉头状转录因子P3（FOXP3）基因突变所致新生儿糖尿病（NDM）患者的临床特点以及基因型一临床表型关系。方法纳入自2007年8月至2016年8月就诊于北京协和医院的可疑NDM患者50例，详细收集临床资料，通过目标区域捕获测序技术对21个已知NDM致病基因进行测序，寻找可疑致病基因，用Sanger测序进行验证，明确分子遗传学诊断。结果遗传学确诊FOXP3-NDM患者3例，分别携带FOXP3p．R312H、p．V408M、p．P133L半合子突变。此3例患者均表现为单纯的永久性NDM，随访至9-12岁均未合并IPEX综合征常见的其他相关临床表现，仅需使用胰岛素降糖治疗。而国外已报道的、甚至是携带相同致病突变的FOXP3-NDM病例均表现为除NDM外还合并其他多种自身免疫相关疾病，均需使用免疫抑制治疗。结论本研究首次报道中国人群中的FOXP3-NDM患者，且表现为与国外已报道病例截然不同的临床表型。相同致病基冈型、不同临床表型背后的分子机制尚有待进一步研究。

哮喘患儿外周血单个核细胞瘦素及Foxp3的表达

目的 探讨哮喘患儿瘦素及CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）特异性转录因子叉头状转录因子P3（Foxp3）在外周血单个核细胞（PBMC）中的表达及意义。方法 选取2013年8月-2015年5月在沭阳县人民医院门诊及住院的28例哮喘患儿发作期（发作组）,26例哮喘患儿缓解期（缓解组）及25例健康体检儿童（对照组）,采用ELISA法检测各组血浆及PBMC培养上清液中的瘦素浓度,实时荧光定量PCR法测定PBMC中Foxp3的相对表达量,进行统计学分析。结果 发作组、缓解组和对照组三组血浆浓度（19.98±5.40 ng/ml,13.73±2.28 ng/ml,12.17±3.95 ng/ml）及PBMC培养上清液瘦素浓度（55.94±11.09 pg/ml,31.97±7.71 pg/ml,27.85±7.67 pg/ml）差异均有统计学意义（F=27.07,75.96,P均〈0.01）; 组间两两比较,发作组均高于缓解组与对照组（P均〈0.01）,而缓解组与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。发作组、缓解组和对照组三组PBMC Foxp3相对表达量（2.70±0.48,3.84±0.45,3.77±0.38）差异有统计学意义（F=57.35,P〈0.01）; 组间两两比较,发作组低于缓解组与对照组（P〈0.01）,而缓解组与对照组差异无统计学意义（P〉0.05）。发作组患儿PBMC培养上清液瘦素浓度与PBMC Foxp3相对表达量呈负相关（R=-0.730,P〈0.01）,而血浆瘦素浓度与PBMC Foxp3相对表达量无明显相关性（R=-0.367,P=0.550）。结论 哮喘患儿PBMC分泌瘦素增加,且分泌的瘦素抑制了Foxp3的表达。

Foxp3^+调节性T细胞及其与鼻部炎性疾病的关系

CD4+CD25+调节性T细胞(Tregulatory cells,Treg)能抑制病理性免疫反应,维持自身免疫耐受和免疫平衡。CD4+CD25+Treg主要由两类细胞亚群组成,一类是胸腺来源的自然Treg,另一类是在外周由幼稚T细胞分化而来的诱导性Treg。叉头状转录因子p3是CD4+CD25+Treg的特异性标志,在其发生及功能发挥中起关键作用。同时,CD4+CD25+Treg的扩增和激活也受到细胞因子、共刺激分子等多种分子和信号通路的控制。目前研究认为,变应性鼻炎、慢性鼻窦炎和鼻息肉等鼻部炎性疾病与CD4+CD25+Treg功能障碍密切相关。

儿童支气管哮喘患者外周血Th17百分数及FOXP3水平的变化及意义

目的探讨外周血Th17细胞百分数和叉头状转录因子P3(FOXP3)水平在儿童支气管哮喘患者中的变化及意义。方法选取支气管哮喘患儿(哮喘组)和健康儿童(对照组)各30例,采用流式细胞术检测外周血Th17细胞及CD4+CD25+调节性T细胞的百分数、实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3mRNA的表达,ELISA法检测血浆中IL-17和IL-10的表达水平。结果哮喘组外周血Th17细胞百分数及血浆IL-17水平均高于对照组(P<0.05);哮喘组外周血FOXP3表达及血浆IL-10水平均低于对照组(P<0.05)。结论 Th17/FOXP3的失衡可能在儿童支气管哮喘的发病机制中起重要作用。

哮喘患儿外周血单个核细胞瘦素与RORγt和Foxp3表达的关系

目的:探讨哮喘患儿外周血单个核细胞(PBMC)分泌的瘦素水平变化及其与Th17特异性转录因子维甲酸相关孤儿核受体γt(RORγt)和Foxp3+调节性T细胞(Treg)特异性转录因子叉头状转录因子p3(Foxp3)表达的关系。方法:选取2018年6月-2020年6月本院收治的25例哮喘患儿设为哮喘组。根据哮喘组患儿疾病所处的时期不同,分为发作期和缓解期。对哮喘发作期儿童经规则联合吸入糖皮质激素/长效β2受体激动剂(ICS/LABA)治疗后定期随访,无症状和体征超过3个月以上作为缓解期。选取同期在本院体检25例的健康儿童为对照组。比较哮喘组发作期和缓解期及对照组的瘦素、FEV1%、RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平,并分析哮喘组发作期患儿瘦素与PBMC的FEV1%、RORγt mRNA、Foxp3 mRNA及RORγt mRNA与Foxp3 mRNA的相关性。结果:对照组、哮喘组发作期和缓解期的瘦素、FEV1%、RORγt mRNA、Foxp3 mRNA比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。哮喘组发作期的瘦素、RORγt mRNA相对表达量均高于对照组和哮喘组缓解期,FEV1%、Foxp3 mRNA均低于对照组和哮喘组缓解期,差异均有统计学意义(P<0.01)。对照组和哮喘组发作期的瘦素、FEV1%、RORγt mRNA、Foxp3 mRNA比较,差异均无统计学意义(P>0.01)。哮喘组患儿发作期PBMC培养上清液瘦素浓度与PBMC的RORγt mRNA呈正相关(r=0.884,P<0.01);与PBMC的Foxp3 mRNA呈负相关(r=-0.926,P<0.01);与FEV1%呈负相关(r=-0.936,P<0.01);Foxp3 mRNA与RORγt mRNA呈负相关(r=-0.854,P<0.01)。结论:哮喘患儿PBMC分泌的瘦素与RORγt mRNA呈正相关,与Foxp3 mRNA呈负相关。

艾滋病患者血清CXCL8、FOXP3的表达及临床意义

目的探讨趋化因子8(CXCL8)、叉头状转录因子P3(FOXP3)在艾滋病患者血清中的表达及临床意义。方法选取2018年5月—2021年5月郑州市疾病预防控制中心收治的72例艾滋病患者为艾滋组,选取同期到本中心体检且与患者一般资料匹配的健康人群60例为对照组。收集一般资料,比较两组研究对象的年龄、性别、T淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)以及血清免疫球蛋白IgG、IgM、IgA水平;采用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)法检测血清中FOXP3 mRNA表达水平;采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中CXCL8表达水平;Pearson法分析CXCL8与FOXP3表达的相关性;利用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清CXCL8、FOXP3水平对艾滋病的诊断价值。结果与对照组比较,艾滋组患者血清中CXCL8表达水平明显上调,FOXP3 mRNA表达水平下调,差异均具有统计学意义(P<0.05),CXCL8和FOXP3 mRNA的表达呈明显负相关(r=-0.350,P<0.05);艾滋病患者血清中CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)细胞计数显著低于健康人群,IgG、IgM、IgA水平显著高于健康人群,差异有统计学意义(P<0.05);艾滋病患者血清中CXCL8表达与CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(P<0.05),与IgG、IgM、IgA呈正相关(P<0.05),FOXP3 mRNA与CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)表达呈正相关(P<0.05),与IgG、IgM、IgA表达呈负相关(P<0.05);血清CXCL8、FOXP3水平联合预测艾滋病患者的ROC曲线下面积为0.981(95%CI:0.940~0.997),敏感度为98.61%,特异度为91.67%,显著高于CXCL8、FOXP3单独诊断。结论CXCL8在艾滋病患者血清中呈高表达,FOXP3呈低表达,二者呈明显负相关,与艾滋病疾病的发生发展密切相关,且对诊断艾滋病患者具有重要意义。

皮肤鳞癌及癌前病变中Foxp3蛋白的表达

目的:探讨正常皮肤和不同表皮肿瘤组织中叉头状转录因子p3(Forkhead box p3,Foxp3)的表达与临床意义。方法:应用免疫组化法检测15例日光性角化症(Actinic keratosis,AK),28例鲍温病(Bowens’disease,BD),26例皮肤鳞癌(Squamous cellcarcinoma,SCC)和8例正常表皮组织(Normal epidermal tissue,NET)中Foxp3的表达。结果:Foxp3+调节性T细胞和Foxp3在皮肤癌前病变和恶性肿瘤中均有表达,在正常表皮组织中未见表达。其中,在肿瘤实质细胞中,Foxp3蛋白在AK、BD和SCC中的表达阳性率分别为46.7%、100%和100%。Foxp3蛋白在BD和SCC上的表达率均高于AK(P值均小于0.05),而在BD和SCC的表达率则无显著差异(P>0.05)。结论:Foxp3蛋白的表达在正常表皮、癌前病变、恶性肿瘤中的表达呈现逐渐增高的趋势,与表皮肿瘤的发展相关。

老年口腔癌患者Foxp3 mRNA、CD4+/CD8+、生存素表达及与病理特征相关性

目的:探讨老年口腔癌(OC)患者癌组织中生存素(Survivin)、CD4+/CD8+、叉头状转录因子P3(Foxp3)mRNA表达及与病理特征相关性。方法:纳入85例OC患者(OC组)及85例口腔溃疡患者(溃疡组),比较两组人口学资料、Survivin、CD4+/CD8+、Foxp3 mRNA,比较OC组不同病理特征患者癌组织中Survivin、CD4+/CD8+、Foxp3 mRNA的表达水平,采用Spearman分析各指标与T分期相关性。结果:OC组Survivin、Foxp3 mRNA较溃疡组更高,CD4+/CD8+较溃疡组更低(P<0.05);不同T分期、淋巴结转移、远处转移患者Survivin、CD4+/CD8+、Foxp3 mRNA比较,差异有统计学意义(P<0.05);Survivin、Foxp3 mRNA与T分期呈正相关,CD4+/CD8+与T分期呈负相关(P<0.05)。结论:老年口腔癌患者Survivin、Foxp3 mRNA表达升高,CD4+/CD8+降低,并与T分期、淋巴结转移、远处转移有关。

乙型肝炎肝硬化患者HBV复制对外周血单个核细胞FoxP^3 mRNA基因表达的影响

目的:探讨乙型肝炎肝硬化患者HBV复制对外周血单个核细胞叉头状螺旋转录因子P^3(forkhead winged helix transcription factor P^3,Fox P^3)m RNA基因表达的影响。方法 :提取正常组、慢性乙肝组、肝硬化组血液标本中的RNA,采用realtime PCR扩增法检测3组病例Fox P^3 m RNA基因表达,实时荧光定量检测HBV-DNA。结果 :慢性乙肝组、肝硬化组Fox P^3m RNA基因表达水平高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);HBV-DNA与Fox P^3m RNA呈正相关(r=0.830,P=0.031)。结论 :在慢性乙肝、肝硬化组,Fox P^3 m RNA较正常对照组明显升高,提示慢性肝病时机体免疫受到抑制,导致HBVDNA复制活跃,HBV持续感染,乙肝慢性化。

玉屏风颗粒对变应性鼻炎大鼠Th17/Treg平衡及相关细胞因子的影响

目的研究玉屏风颗粒对变应性大鼠Th17/Treg免疫平衡的影响。方法采用OVA制备AR大鼠模型,大鼠随机分为正常组、模型组、氯雷他定组、玉屏风颗粒组(12、6 g/kg)。各组干预后评估大鼠AR行为学总分,HE和AB-PAS染色观察鼻黏膜组织病变情况,ELISA检测AR大鼠血清中的IL-17、TGF-β1水平,RT-PCR检测鼻黏膜组织中RORγt mRNA、Foxp3 mRNA的表达,Western blot检测鼻黏膜组织中RORγt、Foxp3蛋白表达。结果与模型组比较,玉屏风颗粒组(12、6 g/kg)大鼠挠鼻次数、打喷嚏次数等行为学总分降低(P<0.05);上皮细胞结构完整、少量炎症细胞浸润、杯状细胞化生明显减少;血清中的IL-17水平降低、TGF-β1水平升高(P<0.05);鼻黏膜RORγt mRNA表达降低、Foxp3 mRNA表达升高(P<0.05);鼻黏膜组织RORγt/Foxp3蛋白表达比例升高(P<0.05)。结论玉屏风颗粒能明显改善变应性大鼠鼻黏膜炎性症状,其作用机制可能与调节Th17/Treg平衡及相关细胞因子有关。

肿瘤组织T细胞亚群对结直肠癌患者术后疾病进展风险的预测价值

目的探讨肿瘤组织T细胞亚群对结直肠癌患者术后疾病进展风险的预测价值。方法选取2018年12月至2020年6月我院收治的102例结直肠癌手术患者为研究对象,患者术后接受辅助治疗6个月,收集患者入院时的临床资料,采用免疫组织化学方法检测患者术后CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)/CD8^(+)和Foxp3^(+)Tregs表达状况。对患者辅助化疗后随访观察1年,根据是否出现疾病进展分为进展组和非进展组,通过多因素Logistic回归分析探讨结直肠癌患者术后疾病进展风险的影响因素。结果截止2022年1月1日,99例获得随访,其中41例(41.41%)疾病进展归为进展组,58例(58.59%)未发生疾病进展归为非进展组。两组CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、CD4^(+)/CD8^(+)及Foxp3^(+)Tregs细胞水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,CD4^(+)/CD8^(+)为结直肠癌术后疾病进展的危险因素(OR=8.292,95%CI:1.154~59.577,P<0.05),Foxp3^(+)Tregs为结直肠癌术后疾病进展的保护因素(OR=0.570,95%CI:0.415~0.784,P<0.05)。ROC曲线显示,CD4^(+)/CD8^(+)与Foxp3^(+)Tregs联合预测的AUC为0.946,显著高于CD4^(+)/CD8^(+)或Foxp3^(+)Tregs单独检测(P<0.05)。结论CD4^(+)/CD8^(+)、Foxp3^(+)Tregs水平可预测结直肠癌患者术后疾病进展风险。

T细胞亚群与CD4^+ CD25^+调节性T细胞及Foxp3 mRNA在肾移植大鼠急性排斥反应中的作用

目的探讨大鼠肾移植术后急性排斥反应中外周血T淋巴细胞亚群、CD4^+CD25^+调节性T细胞比率和叉头状转录因子p3(forkhead transcription factor p3,Foxp3)mRNA表达水平及意义。方法 SD大鼠15只为对照组;SD大鼠15只为受体、SD大鼠15只为供体建立同系基因移植非急性排斥组;SD大鼠15只为受体、Wistar大鼠15只为供体建立非同系基因移植急性排斥组。于肾移植术后第7天检测3组受体大鼠外周血T淋巴细胞亚群、CD4^+CD25^+调节性T细胞比率、Foxp3 mRNA水平及血清肌酐、尿素氮水平,对移植肾行组织病理学检査并进行肾移植急性排斥反应分级,并进行比较。结果肾脏组织病理显示,对照组大鼠无明显病理变化;非急性排斥组4只受体大鼠呈现交界性改变,小灶状间质炎性细胞浸润,3只出现急性排斥反应Ⅰ级病变,其余8只受体大鼠未见明显病理变化;急性排斥组大鼠肾脏呈急性排斥反应典型病理改变,可见交界性改变、灶状间质炎性细胞浸润、多灶状间质炎性细胞浸润、弥漫状间质炎性细胞浸润病理变化,其中急性排斥反应Ⅰ级2例、Ⅱ级2例、Ⅲ级5例、Ⅲb级6例。术后第7天急性排斥组血清肌酐[(123.50±8.06)μmol/L]、尿素氮[(7.40±0.75)mmol/L]水平高于非急性排斥组[(107.99±5.73)μmol/L、(6.04±0.84)mmol/L]和对照组[(49.28±6.85)μmol/L、(3.02±0.67)mmol/L](P<0.05);急性排斥组CD3^+T细胞比率[(50.68±7.59)%]、CD4^+T细胞比率[(35.81±5.49)%]、CD4^+/CD8^+(2.80±0.22)高于非急性排斥组[(41.97±9.01)%、(24.89±6.04)%、1.61±0.14]和对照组[(39.07±10.91)%、(21.74±6.02)%、1.43±0.14](P<0.05);急性排斥组CD8^+T细胞比率[(11.01±3.30)%]低于非急性排斥组[(15.39±4.07)%]和对照组[(15.61±4.81)%],CD4^+CD25^+调节性T细胞比率[(1.30±0.20)%]与Foxp3 mRNA[(0.33±0.08)×10^(-3)]水平低于非急性排斥组[(2.90±0.40)%、(1.02±0.21)×10^(-3)]和对照组[(4.97±0.50)%、(2.13±0.26)×10^(-3)](P<0.05)。结论外周血T细胞亚群参与调控肾移植术后急性排斥反应,急性排斥反应的发生可能与Foxp3 mRNA及CD4^+CD25^+调节性T细胞比率降低有关,Foxp3 mRNA及CD4^+CD25^+调节性T细胞可作为评估受体免疫状态、判断免疫耐受的参考指标。

FOXP3在正常人皮肤和表皮肿瘤中的表达及意义

目的探讨叉头状转录因子P3(forkhead box protein-3,FOXP3)在正常人皮肤和不同表皮肿瘤皮损中的表达及意义。方法应用免疫组织化学EnVision法检测20例脂溢性角化、19例日光性角化、21例鲍恩病、13例鳞状细胞癌及13例正常人皮肤中FOXP3的表达。结果脂溢性角化、日光性角化、鲍恩病、鳞状细胞癌皮损中FOXP3+淋巴细胞阳性率均高于正常皮肤(P<0.01);脂溢性角化、日光性角化、鲍恩病、鳞状细胞癌间FOXP3+淋巴细胞阳性率差异有统计学意义(P<0.01);日光性角化FOXP3+淋巴细胞阳性率高于脂溢性角化(P<0.05);鲍恩病、鳞状细胞癌FOXP3+淋巴细胞阳性率均高于日光性角化(P<0.05),而其在鲍恩病与鳞状细胞癌间表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论FOXP3+淋巴细胞在表皮良性肿瘤、癌前病变、恶性肿瘤中的表达呈逐渐增高趋势,在表皮肿瘤的免疫逃逸中发挥重要作用,促进了其发生发展。

Foxp3 mRNA在抗病毒治疗的HIV/AIDS患者外周血单个核细胞中的表达及临床意义

目的探讨在抗病毒治疗的HIV/AIDS患者外周血单个核细胞中叉头状转录因子P3(Foxp3) mRNA相对表达量和患者疾病进展的关系。方法采集丽水辖区内95例正接受高效抗病毒(HAART)治疗的HIV/AIDS患者及83例健康对照者的抗凝全血,流式细胞技术检测CD4细胞的数量,荧光定量PCR技术检测HIV核酸、Foxp3 mRNA表达量,对Foxp3 mRNA表达量高于检测下限的患者进行分析。结果在接受抗病毒治疗的95例患者中,患者病毒载量高于检测下限的仅5例。Foxp3 mRNA高于检测下限的有60例。在60例患者中,Foxp3 mRNA基因的表达水平与CD4细胞数量呈正相关。结论对于接受抗病毒治疗的人群,通过检测外周血Foxp3 mRNA的相对表达水平可以推测机体在疾病变化中的免疫状态,Foxp3 mRNA基因的表达水平可以作为预测疾病严重程度的参考指标之一,为患者预后评估及临床治疗开辟了新思路。

FOXP3在玫瑰糠疹、扁平苔藓、大斑块型副银屑病及蕈样肉芽肿中的表达及意义

目的探讨叉头状转录因子P3(FOXP3)在玫瑰糠疹、扁平苔藓、大斑块型副银屑病及蕈样肉芽肿中的表达及意义。方法采用免疫组织化学EnVision法检测21例玫瑰糠疹、19例扁平苔藓、17例大斑块型副银屑病、22例蕈样肉芽肿及10例正常人皮肤中FOXP3的表达。结果玫瑰糠疹、扁平苔藓皮损中FOXP3+淋巴细胞阳性率与正常人皮肤中的表达差异无统计学意义(P>0.05);大斑块型副银屑病与蕈样肉芽肿皮损中FOXP3+淋巴细胞阳性率均高于玫瑰糠疹、扁平苔藓及正常皮肤(P<0.05),但其二者之间的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FOXP3+淋巴细胞阳性率在炎症性皮肤病、有肿瘤发展倾向的炎症性皮肤病及皮肤淋巴瘤中的表达有逐步增高的趋势。其增多可能为肿瘤细胞的免疫逃逸提供了条件,进而促进了肿瘤的发生、发展。

Foxp3/Treg与RORγt/Th17细胞失衡在慢性阻塞性肺疾病大鼠中的作用

目的 观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠叉头状/翅膀状螺旋转录因子p3（Foxp3）、调节性T细胞（Treg）、辅助性T细胞17特异性转录因子T孤独核受体（RORγt）的表达。方法 将20只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组和COPD模型组，每组10只。采用烟熏加脂多糖（LPS）气管滴入的方法建立COPD模型；正常对照组不予任何处理。28 d后测定两组大鼠肺功能；苏木素-伊红（HE）染色观察肺组织病理学改变；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清白细胞介素（IL-6、IL-10）水平；流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg表达；蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测肺组织Foxp3、RORγt、IL-17蛋白表达。结果 光镜下观察模型大鼠肺泡腔及肺间质内大量炎性细胞浸润，病变区肺泡结构破坏，肺泡壁变薄、甚至断裂融合成大疱，部分肺泡腔内有不同程度的出血。与正常对照组比较，模型组用力肺活量（FVC）、0.3 s用力呼气容积（FEV0.3）、FEV0.3/FVC、用力呼气峰值流速（PEF）明显下降〔FVC（mL）：8.04±2.03比9.97±2.14，FEV0.3（mL）：6.16±2.23比8.84±2.12，FEV0.3/FVC：0.70±0.09比0.85±0.11，PEF（mL/s）：33.56±4.76比40.14±5.64，P＜0.05或P＜0.01〕；血清IL-6明显升高（ng/L：93.17±20.96比76.28±13.24， P＜0.05），IL-10明显降低（ng/L：78.62±15.17比104.34±19.46，P＜0.01），CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg表达明显降低〔（2.75±0.83）%比（4.16±1.14）%，P＜0.01〕；肺组织Foxp3蛋白表达明显降低（灰度值：0.38±0.15比0.63±0.11，P＜0.01），RORγt、IL-17蛋白表达明显升高〔RORγt（灰度值）：0.96±0.23比0.47±0.11，IL-17（灰度值）：1.02±0.24比0.34±0.08，均P＜0.01〕。相关性分析显示，肺功能参数FEV0.3与Foxp3呈正相关（r＝0.585，P＜0.05）；FEV0.3/FVC与IL-6、RORγt呈负相关（r＝-0.655、r＝-0.607，均P＜0.05）；PEF与Treg呈正相关（r＝0.573，P＜0.05），与IL-17呈负相关（r＝-0.198，P＜0.05）。IL-6与Foxp3呈负相关（r＝-0.603， P＜0.05），与RORγt呈正相关（r＝0.588，P＜0.05）；IL-10与Treg呈正相关（r＝0.573，P＜0.05）；Treg与Foxp3呈正相关（r＝0.607，P＜0.05），与IL-17呈负相关（r＝-0.569，P＜0.05）；Foxp3与RORγt呈负相关（r＝-0.591，P＜0.05）；RORγt与IL-17呈正相关（r＝0.578，P＜0.05）。结论 COPD肺功能降低、炎症反应升高与Foxp3/Treg、RORγt/Th17表达失衡有关。

穴位注射对变应性鼻炎大鼠Th17/Treg相关转录因子及细胞因子表达的影响

目的:观察穴位注射对变应性鼻炎(AR)大鼠鼻黏膜叉头状转录因子p3(Foxp3)和维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)、血清白细胞介素-17(IL-17)表达的影响,从Th17/Treg平衡角度探讨穴位注射治疗AR的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、穴位注射组、非经非穴组,每组8只。采用卵清蛋白致敏法复制AR模型。穴位注射组每隔3d于"印堂"和双侧"迎香"注射地塞米松、转移因子和利多卡因混合液各0.1mL,共4次。非经非穴组同样方法于大鼠左右臀部"后海"与"环跳"连线中点和左(或右)前肢腋窝直下5cm处注射。采用叠加量化记分法进行行为学评分,采用免疫组织化学法检测鼻黏膜中Foxp3和RORγt的表达,酶联免疫吸附法检测血清中IL-17的表达。结果:模型组症状评分高于正常组(P<0.05),穴位注射组症状评分低于模型组和非经非穴组(P<0.05),非经非穴组症状评分略低于模型组,但差异无具统计学意义(P>0.05)。模型组较正常组鼻黏膜Foxp3阳性细胞率降低(P<0.05),鼻黏膜RORγt阳性细胞率增高、血清IL-17表达升高(P<0.05),Foxp3/RORγt比值下降(P<0.05)。与模型组和非经非穴组比较,穴位注射组鼻黏膜Foxp3阳性细胞率增高(P<0.05),鼻黏膜RORγt阳性细胞率、血清IL-17表达降低(P<0.05),Foxp3/RORγt比值升高(P<0.05)。大鼠鼻黏膜Foxp3表达与症状评分呈负相关(P<0.05),鼻黏膜RORγt表达和血清IL-17表达与症状评分呈正相关(P<0.05),鼻黏膜Foxp3/RORγt与症状评分呈负相关(P<0.05)。结论:穴位注射可通过上调鼻黏膜Foxp3表达水平,下调鼻黏膜RORγt表达水平,纠正其失衡,并抑制IL-17产生,从而缓解鼻部炎性反应。

反复肺炎患儿外周血IL-35及凝血纤溶指标分析

目的观察反复肺炎患儿外周血白细胞介素-35(Interleukin-35,IL-35)及凝血纤溶系统的变化及临床意义。方法选取2015年3月-2018年10月于山东省滨州市人民医院儿科就诊的61例反复肺炎患儿作为反复肺炎组,53例急性肺炎患儿作为急性肺炎组,选取体检中心50名健康儿童作为对照组。酶联免疫吸附试验检测血清中IL-35的含量;荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹分别检测外周血单个核细胞中IL-35和叉头状转录因子p3(Forkhead box P3,Foxp3)mRNA和蛋白的表达;全自动血凝仪检测凝血酶原时间(prothrombin time,PT)、活化部分凝血活酶时间(activated partial thromboplastin time,APTT)、纤维蛋白降解产物(fibrin degradation product,FDP)和D-二聚体。结果对照组、急性肺炎组和反复肺炎组IL-35分别为(51.20±5.84)pg/ml、(34.19±5.06)pg/ml和(26.61±4.52)pg/ml,与对照组比较,急性肺炎组和反复肺炎组儿童血清中IL-35含量降低(P<0.001),与急性肺炎组比较,反复肺炎组儿童血清中IL-35含量降低(P<0.001)。与对照组比较,外周血单个核细胞中IL-35为(0.35±0.19)pg/ml和Foxp3 mRNA和蛋白的表达[(0.42±0.23)pg/ml]降低(P<0.05)。与对照组比较,急性肺炎组和反复肺炎组儿童的PT、APTT、FDP和D-二聚体升高(P<0.05);与急性肺炎组比较,反复肺炎组儿童的PT、APTT、FDP和D-二聚体升高(P<0.05)。结论反复肺炎患儿外周血中IL-35水平降低,凝血纤溶系统紊乱,可能是反复肺炎发病的主要机制。

早期肝癌术后患者调节性T细胞数量及功能变化

目的通过分析早期肝癌患者肝癌切除手术前、后外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞(Treg)数量及功能的变化,从免疫抑制角度探讨手术对肝癌患者免疫功能的影响。方法采集肝癌患者(病例组,15例)手术治疗前、后及正常人群(对照组,5例)外周血,提取淋巴细胞,行细胞外(CD4、CD25)及细胞内(FOXP3)染色,应用流式细胞仪分析Treg的数量及功能。结果 病例组CD4+CD25+T细胞和CD25+FOXP3+T细胞在术前外周血中所占比例均明显高于正常对照组〔(12.43±2.57)%比(5.56±1.02)%,(5.14±1.4)%比(2.18±0.83)%,P<0.05〕,病例组以上两种细胞在术后1周﹝(10.56±2.13)%,(4.28±1.08)%﹞较术前均有所下降,但差异无统计学意义(P>0.05),而术后2周〔(7.30±0.89)%,(3.43±0.83)%〕较术前下降明显(P<0.05)。病例组CD8+T细胞和CD4+CD25-T细胞在术前外周血中所占比例明显低于正常对照组〔(23.42±1.80)%比(29.22±2.26)%,(36.14±1.12)%比(43.69±2.78)%,P<0.05〕,病例组以上两种细胞在术后2周〔(27.15±1.71)%,(40.30±2.00)%〕较术前均明显升高(P<0.05)。对Treg与AFP进行相关性分析发现二者具有低度相关关系(r=0.48,P<0.05)。结论肝癌切除术能够在一定程度上改善肝癌患者的免疫功能,且Treg在肝癌的诊治及预后的判断中,可能具有一定辅助意义。

调节性T细胞与自身免疫性疾病

自身免疫性疾病是由于机体正常免疫耐受功能受损导致免疫系统对自身组织结构和功能的破坏,并出现一定临床表现的一类疾病.调节性T细胞作为一类具有负向免疫调节功能的淋巴细胞亚群在免疫自稳和免疫耐受中起关键作用,既能抑制不恰当的免疫反应,又能限制免疫应答的范围、程度及作用时间,对效应性T细胞的增殖及免疫活性的发挥产生抑制,因此在许多自身免疫性疾病的发病中扮演重要角色.近年来的研究表明调节性T细胞可以通过细胞接触、分泌细胞因子、基因调控等多种途径发挥作用,在不同的疾病,不同的内环境因素作用下可以表现出不同的特点,转录因子Foxp3作为调节性T细胞的特异性标志是其分化成熟及功能维持的根本.