叉头盒蛋白D1激活细胞外信号调节激酶通路促进胰腺癌侵袭转移

目的:研究叉头盒蛋白D1(forkhead box D1,FOXD1)在胰腺癌的表达及其通过细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)介导胰腺癌侵袭转移的机制。方法:the Cancer Genome Atlas数据库内检索FOXD1在胰腺癌和正常胰腺组织内的表达并分析差异。采用聚合酶链反应检测15例胰腺癌病人癌组织FOXD1的mRNA表达。蛋白质印迹试验检测FOXD1在胰腺细胞株的表达和FOXD1敲低对上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白质表达的影响。细胞计数盒8(CCK8)实验及Transwell细胞迁移实验检测FOXD1敲低对胰腺癌细胞增殖、迁移侵袭能力的影响。结果:FOXD1在胰腺癌组织及细胞株中呈高表达状态。敲低胰腺癌细胞株FOXD1表达后,胰腺癌细胞的增殖及迁移侵袭能力均减弱。降低FOXD1表达后EMT相关的上皮钙黏着蛋白、ERK表达升高,神经钙黏着蛋白、磷酸化ERK表达减弱。结论 :FOXD1是胰腺癌的致癌基因,其通过激活ERK通路促进胰腺癌侵袭转移。

miR-138及FOXD1在口腔鳞状细胞癌中的表达和意义

目的:探究miR-138及叉头盒蛋白D1(FOXD1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)组织中的表达及其临床意义。方法:选取44例行原发性OSCC根治术的患者,采用实时荧光定量PCR检测OSCC组织和配对癌旁组织中的miR-138及FOXD1的表达水平,通过卡方检验与生存分析探究miR-138与患者临床病理学特征及预后的关系;选取OSCC细胞系Cal27,对其转染并分为阴性转染(miR-NC)组、过表达miR-138(miR-138 mimics)组。采用CCK-8法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞侵袭,观察miR-138对OSCC细胞生物学行为的影响;通过生物信息学预测miR-138的潜在靶基因;采用Western blot检测miR-138对FOXD1表达的影响。共转染miR-138 mimics和过表达FOXD1(sh-FOXD1)后,检测sh-FOXD1对OSCC生物学行为的影响,并通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-138对FOXD1的靶向作用。结果:miR-138在OSCC组织和细胞系中显著低表达(P<0.05),且与肿瘤患者原发肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期及远期生存率密切相关(P<0.05)。上调miR-138表达可显著抑制Cal27细胞的增殖和侵袭,并能降低Cal27细胞中FOXD1的表达(P<0.01)。FOXD1过表达能部分逆转miR-138 mimics对OSCC细胞增殖和侵袭的抑制作用。双荧光素酶报告基因显示,过表达miR-138显著抑制野生型FOXD1组的荧光表达(P<0.05),而对FOXD1突变组的荧光表达没有抑制作用。结论:miR-138可能通过调控FOXD1表达抑制OSCC的发生、发展,miR-138和FOXD1可能是OSCC潜在的治疗靶点。