CXC趋化因子受体4和叉头蛋白3基因蛋白及mRNA在儿童纵隔神经母细胞瘤SK-N-SH和LAN-5细胞中的表达及环磷酰胺对其的影响

目的观察环磷酰胺对儿童纵隔神经母细胞瘤LAN-5和SK-N-SH细胞CXC趋化因子受体4(CXCR4)和叉头蛋白3(Foxp3)表达的影响。方法采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测CXCR4和Foxp3基因mRNA的相对表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪分析CXCR4和Foxp3基因的表达。结果CXCR4和Foxp3在LAN-5和SK-N-SH细胞高表达;环磷酰胺对LAN-5和SK-N-SH细胞的IC50分别为6.5μmol/L和3.9μmol/L;环磷酰胺显著降低了LAN-5细胞表面CXCR4基因蛋白的表达(P<0.01),也显著降低了SK-N-SH细胞CXCR4 mRNA的表达(P<0.05),同时环磷酰胺显著下调Foxp3基因蛋白(P<0.05)和Foxp3 mRNA(P<0.01)在LAN-5细胞的表达。结论 CXCR4和Foxp3可能为神经母细胞瘤化疗的潜在靶点。

叉头蛋白3蛋白表达与胃癌腹膜转移的关系

目的探讨胃癌组织中叉头蛋白3(Foxp3)蛋白表达与胃癌腹膜转移的关系。方法应用鼠抗人Foxp3单克隆抗体和免疫组织化学SP染色法检测65例同期伴腹膜转移的胃癌患者的癌旁正常胃黏膜、胃癌原发灶、胃癌腹膜转移灶及淋巴结转移灶中Foxp3蛋白的表达水平。结果胃癌原发灶、胃癌腹膜转移灶及淋巴结转移灶组织中Foxp3蛋白呈强表达,阳性表达率分别为78.5%(51/65)、80.0%(52/65)和88.6%(39/44);胃癌旁正常胃黏膜组织中Foxp3蛋白表达很弱,阳性表达率为20.0%(13/65)。正常胃黏膜组织中Foxp3蛋白阳性表达率显著低于胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶组织(P值均<0.05),后3者间的差异无统计学意义(P值均>0.05)。Foxp3蛋白的阳性表达率与年龄、性别不相关(P值均>0.05),而与组织分化程度呈负相关(r=-0.301,P=0.023),与有无淋巴结转移呈正相关(r=0.358,P=0.004)。结论胃癌病灶中的Foxp3蛋白可能成为术前判断胃癌是否发生腹膜转移及判断预后的生物学指标。

叉头蛋白3对肺腺癌细胞增殖和化疗药物顺铂敏感性的影响

目的:观察叉头蛋白3(FOXP3)在人肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌细胞增殖和顺铂敏感性的影响,阐明肺腺癌细胞对顺铂耐药的相关机制。方法:收集肺腺癌患者术后石蜡标本50例和正常肺组织10例。免疫组织化学染色方法检测肺腺癌组织和正常肺组织中FOXP3和Ki-67的表达,分析肺腺癌组织和正常肺组织中FOXP3阳性表达率的差异,Pearson相关分析法分析FOXP3和Ki-67表达的相关性。选取对数生长期的人肺腺癌A549细胞进行siRNA转染,将A549细胞分为Mock组(转染脂质体)、Control-siRNA组(转染Control-siRNA)和FOXP3-siRNA组(转染FOXP3-siRNA)。RT-qPCR法检测各组A549细胞中FOXP3 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组A549细胞中FOXP3蛋白表达水平,CCK-8法检测各组A549细胞增殖活性及不同浓度(0、0.63、1.25、2.50和5.00 mg·L^-1)顺铂作用后各组A549细胞生长抑制率,RT-qPCR和Western blotting法检测顺铂作用后各组A549细胞中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平。结果:FOXP3在肺腺癌和正常肺组织的阳性表达率分别为62.0%和13.3%,组间比较差异有统计学意义(P<0.05);FOXP3和Ki-67在肺腺癌组织中表达呈正相关关系(r=0.370,P<0.01);FOXP3-siRNA组A549细胞中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平均明显低于Mock组和Control-siRNA组(P<0.01);顺铂作用48和72 h后,FOXP3-siRNA组A549细胞增殖活性明显低于Mock组和Control-siRNA组(P<0.05);1.25、2.50和5.00 mg·L^-1顺铂作用后,FOXP3-siRNA组A549细胞生长抑制率均高于Mock组和Control-siRNA组(P<0.05);1.25和2.50 mg·L^-1顺铂组A549细胞中FOXP3 mRNA和蛋白表达水平均明显高于0 mg·L^-1顺铂组(P<0.05)。结论:沉默FOXP3可抑制肺腺癌细胞的增殖,增加肺腺癌细胞对顺铂的敏感性。

叉头蛋白3在鼻咽非角化性鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的观察叉头蛋白3(FoxP3)在鼻咽非角化性鳞状细胞癌中的表达情况,以探讨调节性T(Treg)细胞在鼻咽癌发生、发展中的意义。方法通过免疫组织化学(SP)法检测FoxP3在57例鼻咽非角化鳞状细胞癌和22例鼻咽部黏膜慢性炎症中的表达情况及CD8在鼻咽癌中的表达。结果在鼻咽癌组中FoxP3阳性Treg细胞数(105.05±52.22)显著高于鼻咽部黏膜慢性炎症(6.35±6.06),二者的差异有统计学意义(P<0.05)。FoxP3阳性Treg细胞的数量与患者性别及肿瘤分化程度有关(P<0.05)。结论在鼻咽非角化鳞状细胞癌中,FoxP3阳性Treg细胞的增殖可能抑制机体的抗肿瘤免疫功能,并为肿瘤细胞的免疫逃逸提供良好的环境。

程序性死亡受体-配体1、叉头蛋白3、趋化因子配体22和人乳头瘤病毒在宫颈病变免疫微环境调节中的表达特征

目的探讨程序性死亡受体-配体1(PD-L1)、叉头蛋白3(FoxP3)、趋化因子配体22(CCL22)和人乳头瘤病毒(HPV)在宫颈病变免疫微环境调节中的表达特征。方法选取2020年1月至2021年12月于上饶市人民医院手术切除的28份宫颈癌癌组织、17份宫颈上皮内瘤样变(CIN)的宫颈上皮内瘤样变组织、15份子宫肌瘤而无宫颈病变进行全子宫切除术的组织标本作为研究对象。分析组织标本中PD-L1、FoxP3、CCL22和HPV的阳性表达率。结果宫颈癌组织中PD-L1、FoxP3、CCL22表达量均高于宫颈上皮内瘤组织,宫颈上皮内瘤组织高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌组织HPV阳性率与宫颈上皮内瘤组织比较差异无统计学意义。宫颈癌组织、宫颈上皮内瘤组织HPV阳性率均高于正常组织,宫颈癌组织HPV阳性率高于宫颈上皮内瘤组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈癌组织高表达FOXP3蛋白、PD-L1、CCL22,检测上述指标能为判断HPV感染和宫颈病变及癌变预后提供新的参考依据。

YTH结构域家族蛋白2和叉头蛋白转录因子3在肺腺癌中的表达关系研究

目的 分析YTH结构域家族蛋白2(YTHDF2)及叉头蛋白转录因子3(FOXO3)在肺腺癌病人中的表达及与预后的关系。方法 收集2020年1月至2021年5月在郑州大学第一附属医院行手术治疗的肺腺癌病人癌组织及对应的癌旁组织(距离癌组织5 cm以上)80对,收集病人临床病理资料;利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库查询YTHDF2、FOXO3基因在肺腺癌中的表达水平;采用免疫组织化学法检测YTHDF2、FOXO3蛋白在肺腺癌组织中的表达情况;分析YTHDF2、FOXO3蛋白水平与肺腺癌病人临床病理资料的关系;分析肺腺癌中YTHDF2与FOXO3基因表达水平的相关性;对病人进行为期3年的随访,分析病人3年累积生存率。结果 YTHDF2、FOXO3蛋白在肺腺癌组织中的高表达率分别为34.00%、26.00%,明显低于癌旁正常组织中79.48%、61.54%(P<0.05)。YTHDF2蛋白表达情况与肺腺癌病人年龄、淋巴结转移和分化程度相关(P<0.05);与TNM分期、性别无关(P>0.05);FOXO3蛋白表达情况与肺腺癌病人性别和分化程度相关(P<0.05);肺腺癌组织中YTHDF2蛋白高表达组和低表达组病人3年累积生存率分别为53.30%、14.00%,经log-rank比较,差异有统计学意义(P<0.05);FOXO3蛋白高表达组和低表达组病人3年累积生存率分别为64.50%、12.20%,经Log-Rank比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 YTHDF2、FOXO3在肺腺癌组织中均低表达,与病人肿瘤分化程度及3年累积生存率有关,有望成为评估肺腺癌病人预后的生物标志物。

叉头框蛋白O3a在失神经肌萎缩中的研究进展

骨骼肌失神经后,肌纤维直径和横截面积减小,导致肌肉质量下降。实验证明,叉头框蛋白O3a(FoxO3a)作为叉头框转录因子亚家族O重要成员之一,对失神经肌萎缩有着重要的调节作用。本文从FoxO3a的结构和功能、上游翻译后修饰和下游靶基因的调控方面,阐述其作为重要的治疗靶点在失神经肌萎缩中的重要意义,旨在未来延缓失神经肌萎缩方面提供精准的理论依据并寻求新的靶点和治疗方法。

叉头框蛋白O3a在神经退行性疾病中靶向研究进展

神经退行性疾病是大脑或脊髓内特定神经元细胞群的丢失或进程性病变而导致的不可逆的神经功能障碍性疾病。神经炎症、氧化应激、线粒体功能障碍、兴奋性毒性和蛋白质聚集可促进神经退行性病变过程。叉头框蛋白O3a(FoxO3a)是Forkhead转录因子FoxO亚家族的一个重要成员,通过磷酸化、泛素化介导的降解、微信号转导以及相关蛋白通路,在细胞增殖、凋亡、自噬、活性氧(ROS)解毒方面发挥着重要作用,与神经退行性疾病的发生与发展息息相关。本文重点对近年来FoxO3a在神经退行性疾病中的作用机制及相关通路的靶向作用进行阐述,旨在为该病的防治提供新的研究思路。

miR-155-5p靶向调控叉头框蛋白3影响脐带间充质干细胞衰老

近期研究表明,miR-155-5p能通过影响线粒体裂变导致骨髓干细胞衰老,但其能否影响脐带间充质干细胞的衰老及作用机制尚不清楚。为研究其影响及机制,从脐带组织中获取P0代脐带间充质干细胞,逐代传至P10代,采用RT-qPCR检测发现,miR-155-5p的表达在P10代显著升高(P<0.001)。过表达miR-155-5p的P2代脐带间充质干细胞发现,叉头框蛋白3(forkhead box O3,FOXO3)及自噬相关基因LC 3和Beclin-1表达下降。通过TargetScan在线数据库预测,FOXO 3的3′UTR区域与miR-155-p存在特异结合位点,双荧光素酶报告基因结果证实,FOXO 3为miR-155-5p的靶基因之一。向P10代脐带间充质干细胞转染miR-155-5p inhibitor后,经Western免疫印迹检测发现,FOXO3、p-AMPK、LC3 II/I和Beclin-1蛋白质表达显著升高(P<0.01或0.001),衰老相关蛋白质p16、p21和p53显著下降(P<0.01或0.001)。经β-半乳糖苷酶活性染色后发现,转染miR-155-5p inhibitor的P10代脐带间充质干细胞显著降低β-半乳糖苷酶的表达(P<0.01)。RT-qPCR法和ELISA法分别检测转染miR-155-5p inhibitor的P10代脐带间充质干细胞和其培养的上清后发现,TGF-β、HGF和VEGF的基因表达及蛋白质分泌水平均显著升高(P<0.05或0.01)。经静脉注射脐带间充质干细胞治疗支气管肺发育不良的新生大鼠模型发现,转染miR-155-5p inhibitor的P10代脐带间充质干细胞显著提升新生大鼠生存率(P<0.05),并显著改善新生大鼠肺部病理损伤。综上所述,miR-155-5p通过负调控FOXO 3基因影响脐带间充质干细胞衰老,miR-155-5p inhibitor的应用是通过FOXO 3/AMPK信号通路增加细胞自噬而逆转脐带间充质干细胞衰老。

叉头框蛋白O3介导Th1/Th17/Treg失衡在白塞综合征发病机制中的潜在作用

白塞综合征(Behçet’s syndrome,BS)是一种慢性复发性、可累及多种重要脏器的变异性血管炎。免疫紊乱是BS发生发展的基石,其中辅助性T细胞(T helper cell,Th)1/Th17/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)失衡起重要作用。叉头框蛋白O3(forkhead box O3,FOXO3)可调节T细胞活化、分化和T细胞功能。FOXO3表达改变与Th1/Th17/Treg失衡相关,使FOXO3成为免疫疾病治疗的潜在靶点。目前尚缺乏FOXO3与BS相关的研究,故本文对FOXO3作为BS潜在治疗靶点的机制进行总结与展望。

叉头框蛋白P3在乳腺癌放疗患者中的表达及临床意义

目的 探讨叉头框蛋白P3(FOXP3)在乳腺癌放疗患者中的表达及临床意义。方法 选取90例乳腺癌放疗患者和30例乳腺纤维腺病患者,采用免疫组化染色法检测FOXP3表达情况,比较乳腺癌组织和乳腺纤维腺病组织中FOXP3表达情况,比较不同临床特征及分子分型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3表达情况,采用多因素Logistic回归模型分析乳腺癌患者中FOXP3阳性表达的影响因素。比较不同FOXP3表达情况乳腺癌患者的放疗疗效及无病生存期(DFS),采用Cox比例风险模型分析乳腺癌放疗患者DFS的影响因素。结果 乳腺癌组织中FOXP3阳性表达率为38.9%,明显低于乳腺纤维腺病组织的76.7%(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,临床分期、Ki-67表达情况、淋巴结转移情况均是乳腺癌患者中FOXP3阳性表达的独立影响因素(P﹤0.05)。Luminal A型乳腺癌患者乳腺癌组织中FOXP3阳性表达率高于Luminal B型、三阴性、人表皮生长因子受体2(HER2)过表达型乳腺癌患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。FOXP3阳性表达乳腺癌患者的局部失败率为2.9%,明显低于FOXP3阴性表达患者的25.5%(P﹤0.01)。FOXP3阳性表达乳腺癌患者的DFS明显优于FOXP3阴性表达患者(P﹤0.01)。Cox比例风险回归分析结果显示,FOXP3阳性表达、雌激素受体(ER)阳性表达均是乳腺癌放疗患者DFS的独立保护因素(P﹤0.05)。结论 乳腺癌组织中FOXP3阳性表达率较低,FOXP3阳性表达乳腺癌患者放疗局部失败率低于FOXP3阴性表达患者,且预后优于FOXP3阴性表达患者,FOXP3有望为乳腺癌的诊断、个体化治疗及预后评估提供新思路。

叉头框蛋白O3a在缺血性脑卒中的作用及靶向干预的研究进展

脑卒中(stroke)是危害人类健康的常见多发病,也是导致人类致死和致残的主要原因之一。全球疾病负担研究(GBD 2019)显示,仅2019年全球脑卒中发病率为150.8/10万,死亡率84.2/10万。脑卒中每年造成550万人死亡,4 400万人身体残疾[1-2]。《中国脑卒中防治报告2020》显示,我国脑卒中发病率高达201/10万,其中以缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)为主,约占69.6%~70.8%[3]。目前,临床上治疗脑卒中以溶栓、介入为主,因适应证和治疗时间窗选择要求较高,导致符合治疗标准的患者较为局限.

叉头框蛋白P3阳性调节性T细胞和程序性死亡受体1/程序性死亡受体配体1通路在早期胃癌中的表达及相关性分析

目的探讨叉头框蛋白P3阳性调节性T细胞(FOXP3+Tregs)与程序性死亡受体1(PD-1)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)通路在早期胃癌患者中的表达及相关性。方法收集2020年10月至2022年6月南京市浦口区中医院收治的早期胃癌患者(早期胃癌组)和慢性胃炎患者的胃黏膜组织(对照组)各10例,采用组织免疫荧光法分别检测早期胃癌组和对照组的胃黏膜组织中FOXP3+Tregs及PD-1/PD-L1通路的表达情况,分析早期胃癌组织中两者表达的相关性。结果早期胃癌组FOXP3+Tregs、PD-1、PD-L1表达水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。早期胃癌组胃黏膜组织中FOXP3+Tregs分别与PD-1、PD-L1表达水平呈正相关(r>0,P<0.01)。结论早期胃癌组织中存在FOXP3+Tregs和PD-1/PD-L1通路的共同表达,提示联合二者可为临床早期胃癌的判定提供重要参考。

雌激素对卵巢颗粒细胞雌激素受体-β和转录因子叉头蛋白3表达的影响

目的探讨雌激素(E2)对雌激素受体-β(ER-β)与转录因子叉头蛋白3(FoxO3)的表达及其对卵巢颗粒细胞增殖与凋亡的影响。方法利用添加1μmol/L的E2或100 nmol/L ICI182.780的TCM199培养基体外培养卵巢颗粒细胞;采用WST比色法检测不同培养条件下卵巢颗粒细胞的增殖;RT-PCR和Real-time PCR检测ER-β与FoxO3 mRNA的表达,采用细胞免疫荧光和Western blotting检测ER-β与FoxO3的表达。结果 E2能促进卵巢颗粒细胞增殖,而ICI182.780抑制卵巢颗粒细胞增殖;RT-PCR扩增结果与理论值符合,Real-time PCR结果显示,ICI182.780与E2比较,ER-βmRNA表达下调,FoxO3 mRNA表达上调(P<0.05);Western blotting法结果显示,ER-β和FoxO3蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05),灰度值分析显示添加E2中ER-β蛋白表达升高,FoxO3蛋白下降(P<0.05),添加ICI182.780中的ER-β表达下调,FoxO3表达上调,与E2比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 E2可提高ER-β的表达,降低FoxO3的表达,影响卵巢颗粒细胞的增殖与凋亡。

叉头蛋白3在不同分期胃癌组织中的表达

目的:探讨叉头蛋白3(FoxP3)在胃癌患者病理组织切片中的表达模式。方法:用免疫组化方法对56例不同TNM分期的胃癌患者病理组织进行染色,同时取其中30例患者的正常胃组织作阴性对照,观察FoxP3在胃癌组织中的表达情况,并探讨其表达与患者的性别、年龄、肿瘤TNM分期和转移的关系。结果:胃癌细胞表达FoxP3蛋白,并且主要分布于胃癌细胞的细胞核,少数分布于胞浆区;FoxP3蛋白在胃癌患者中的阳性表达率为68%(38/56),明显高于正常胃组织的23%(7/30),差异具有统计学意义(P<0.05);在有淋巴结转移和无淋巴结转移患者的阳性表达率分别是90%(28/31)和40%(10/25),两者的差异具有统计学意义(P<0.05);FoxP3蛋白表达的阳性率与年龄、性别无关,差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ期、Ⅳ期患者FoxP3表达阳性率明显高于Ⅰ期、Ⅱ期,同时表达量随着TNM分期增高表达逐渐增多,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:高表达的FoxP3可能导致胃癌细胞免疫逃逸参与胃癌的发生、发展过程。

瘦素和叉头蛋白3在自身免疫性糖尿病发病中的作用

自身免疫性糖尿病(AID)是一种病因和发病机制尚未完全阐明的,由T细胞介导的胰岛β细胞选择性破坏的自身免疫性疾病。最近研究发现瘦素可与胰岛β细胞、免疫细胞及细胞因子相互作用、相互影响,可能在AID自身免疫损伤中的多个环节上发挥重要作用,因其具体机制非常复杂,并存在不少不明之处。叉头蛋白是FOX蛋白家族成员之一,主要表于CD+CD25+T细胞,参与体内免疫系统的调节,尤其可影响CD+CD25+调节性T细胞的发育和功能。AID患者体内CD+CD25+T细胞减少,诱导叉头蛋白3的表达或过度转CD+CD25+T细胞,有可能预防AID。

丹皮酚对去卵巢骨质疏松大鼠叉头框蛋白O3a/Wnt信号通路及椎骨密度的影响

背景:丹皮酚可抑制炎症,减轻慢性骨关节炎临床症状,作为一种不良反应小、更为安全的天然药物成分,探讨其对骨质疏松症的治疗作用具有重要的临床意义。目的:探究丹皮酚对去卵巢骨质疏松大鼠叉头框蛋白O3a(forkhead box O3a,FoxO3a)/Wnt信号通路及椎骨密度的影响。方法:雌性SD大鼠随机分为6组,每组10只。假手术组仅切除卵巢旁部分脂肪组织;其余50只大鼠均采用双侧卵巢摘除法制备去卵巢骨质疏松大鼠模型,模型制备成功后分为模型组、雌激素组[炔雌醇10μg/(kg·d)]、丹皮酚低、中、高剂量组[丹皮酚125,250,500 mg/(kg·d)],每组10只,灌胃给药;假手术组、模型组灌胃等量生理盐水,持续干预12周。ELISA法测定血清雌激素、骨保护素、骨钙素水平;采用双能X射线动物骨密度测定仪检测大鼠股骨及椎骨骨密度;采用骨科生物力学测试仪检测大鼠股骨及椎骨生物力学指标:弹性模量、最大载荷、屈服载荷;实时荧光定量PCR检测椎骨组织FoxO3a、Wnt2 mRNA表达水平;免疫印迹法检测椎骨组织FoxO3a、Wnt2及核内β-catenin蛋白表达。结果与结论:①治疗后,与假手术组比较,模型组L4,5骨密度、弹性模量、最大载荷、屈服载荷、血清雌二醇、骨保护素水平、椎骨组织Wnt2 mRNA及蛋白水平、核内β-catenin蛋白水平均显著降低(P<0.05),骨钙素水平、椎骨组织FoxO3a mRNA及蛋白水平显著增加(P<0.05);②与模型组比较,丹皮酚低、中、高剂量组大鼠L4,5骨密度、弹性模量、最大载荷、屈服载荷、血清雌二醇、骨保护素水平、椎骨组织Wnt2 mRNA及蛋白水平、核内β-catenin蛋白水平依次增加(P<0.05),血清骨钙素水平、椎骨组织FoxO3a mRNA及蛋白水平依次降低(P<0.05),且丹皮酚高剂量组均优于雌激素组(P<0.05);③提示丹皮酚可增加去卵巢骨质疏松大鼠椎骨骨密度,改善其骨生物力学状况,减轻骨质疏松,该作用可能与抑制FoxO3a、促进Wnt2/β-catenin通路激活有关。

乏氧对人口腔鳞状细胞癌细胞中叉头蛋白P3表达的影响及其机制

目的:观察乏氧对人口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中叉头蛋白P3(FOXP3)表达的影响,阐明乏氧调控FOXP3表达的表观遗传学机制。方法:选取人OSCC细胞株FaDu和OECM-1细胞,常氧和乏氧条件下培养18h。采用实时定量PCR方法检测细胞中FOXP3mRNA的相对表达水平,Western blotting法检测FaDu和OECM-1细胞中FoxP3蛋白表达水平,染色质免疫沉淀-定量PCR(ChIP-qPCR)法检测FOXP3基因启动子上组蛋白修饰H3K4乙酰化(H3K4ac)、H3K4三甲基化(H3K4me3)和H3K27三甲基化(H3K27me3)水平。采用组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)基因沉默的FaDu细胞,以实时定量PCR和ChIP-qPCR法检测FaDu细胞中HDA3mRNA相对表达水平和FOXP3mTNA表达抑制率。结果:与常氧条件比较,乏氧条件下FaDu和OECM-1细胞中FOXP3 mRNA相对表达水平均明显降低,分别下降65.6%(P<0.01)和75.7%(P<0.01);Western blotting检测,乏氧条件下FaDu和OECM-1细胞中FOXP3蛋白表达水平明显低于常氧条件下;染色质免疫沉淀实验,与常氧条件比较,乏氧条件下FaDu细胞中FOXP3基因启动子上的H3K4ac和H3K4me3水平明显降低(P<0.01),而H3K27me3水平无明显差异。与无HDAC3基因沉默的FaDu细胞比较,HDAC3基因沉默的FaDu细胞中缺氧诱导的FOXP3启动子上H3K4ac和H3K4me3表达抑制率明显降低(P<0.05),缺氧诱导的FOXP3mRNA相对表达抑制率降低(P<0.05)。结论:乏氧可通过HDAC3介导的FOXP3基因启动子上H3K4ac水平下调而抑制OSCC细胞中FOXP3的表达。

滋养干细胞转录因子叉头蛋白D3过表达在人绒癌细胞株JAR的恶性生物学特性中的作用研究（英文）

背景:绒毛膜细胞癌是一种具有高度侵袭能力的滋养细胞肿瘤。叉头蛋白D3作为胚胎干细胞和滋养干细胞的转录因子,在胚胎发生、肿瘤发生和进展等很多生理、病理状态下发挥着重要作用。目的:研究叉头蛋白D3在绒毛膜细胞癌恶性生物学特性中的作用及可能作用机制。方法:利用短发夹RNA干扰叉头蛋白D3在人绒毛膜细胞癌细胞株JAR中的表达,体外细胞增殖、迁移/侵袭实验检测JAR的细胞功能学改变,体内动物成瘤实验检测肿瘤生长情况。Agilent转录表达芯片初筛叉头蛋白D3调控下游基因并通过定量实时PCR验证。结果与结论:与原代培养的正常妊娠滋养细胞相比,绒癌细胞株JAR中叉头蛋白D3的转录和蛋白水平表达均显著增高。短发夹RNA干扰叉头蛋白D3表达抑制了体外JAR的细胞增殖、迁移和侵袭功能,同时抑制了裸鼠体内肿瘤的生长,降低了肿瘤细胞β-人绒毛膜促性腺激素分泌。通过初筛和后期验证,发现7个受叉头蛋白D3调控的局部黏附分子(ITGA5,ITGB6,THBS4,COL6A3,VTN,NRXN3和NLGN1),同时短发夹RNA干扰叉头蛋白D3表达后,JAR细胞内局部黏附激酶活性降低。提示过表达的叉头蛋白D3通过调控局部黏附分子表达和局部黏附激酶活性进而增强JAR的恶性生物学特性。

血浆微小RNA-223及叉头框蛋白3a水平与冠心病患者心脏结构及功能的相关性研究

目的探讨血浆微小RNA-223(miR-223)及叉头框蛋白3a(FoxO3a)水平与冠心病患者心脏结构变化的相关性。方法纳入2019年1月至2020年12月在新疆医科大学第一附属医院住院的126例冠心病患者为研究组和111例非冠心病患者为对照组,平均年龄(66.38±12.12)岁比(49.35±9.60)岁。通过酶联免疫分析法,检测所有研究对象血浆miR-223及FoxO3a水平,分析其与超声心动图中左心房(LA)、右心房(RA)、左心室舒张末期容积(EDV)、左心室收缩末期容积(ESV)、室间隔、右心室流出道、右心室(RV)、肺动脉、室壁运动评分、MV-E、MV-A、MV-E/A和射血分数(EF)等指标的关系。结果两组在年龄、合并高血压方面差异具有统计学意义(t=6.954、χ^(2)=12.014,P=0.000、0.001)。研究组miR-223[(0.415±0.065)ng/L比(0.309±0.057)ng/L]、FoxO3a[(0.402±0.058)ng/L比(0.306±0.059)ng/L]水平明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05)。相关分析中,miR-223和FoxO3a水平间呈正相关(r=0.485,P=0.000)。miR-223和FoxO3a水平与冠心病之间,年龄成为控制变量后仍呈相关性(r=0.388,P=0.000;r=0.506,P=0.000)。miR-223水平与心脏超声各指标中与LA、EDV、ESV、RA、室壁运动评分呈正相关(r=0.358、0.338、0.339、0.282、0.274,P=0.001、0.002、0.002、0.012、0.015)。FoxO3a水平与超声心动图各指标中与LA、EDV、ESV、室壁运动评分呈正相关(r=0.302、0.312、0.380、0.373,P=0.007、0.005、0.001、0.001),与FE呈负相关(r=-0.278,P=0.013)。结论血浆miR-223、FoxO3a水平在冠心病患者中明显升高,呈高表达状态,并与冠心病患者发生心脏结构的变化有一定的相关性。