肾综合征出血热双价地鼠肾细胞灭活疫苗的安全性及血清学效果评价

目的 :评价肾综合征出血热地鼠肾细胞双价灭活疫苗的安全性及血清学免疫效果。方法 :按统一方法观察接种后副反应发生情况 ,以蚀斑减少中和试验方法测定免疫前后血清中和抗体。结果 :对 10 0人进行系统观察 ,局部反应与全身反应发生率均为 2 .0 0 % ,总反应率为 4.0 0 % ,其中强反应发生率为 1.0 0 % ;无头疼、头晕、恶心、皮疹等全身症状及注射处硬结、痒、烧灼感、淋巴结肿痛等局部症状发生。免疫后Ⅰ型病毒中和抗体阳转率为 92 .5 0 % ,Ⅱ型病毒中和抗体阳转率为 95 .0 0 % ,90 .0 0 %受观察者对两型病毒均阳转。结论

流行性出血热(EHF)地鼠肾细胞(GHKC)灭活疫苗的初步人体观察

用流行性出血热(EHF)病毒L99株(家鼠型)感染金黄地鼠肾细胞(GHKC),经福尔马林(0.025％)灭活制备EHF灭活疫苗(88-17批),经检定批准,肌肉(1ml)接种志愿者12人(IO人于0、7、28天,2人分别于0、7天及0、28天各一针),进行了安全性及抗体反应的初步人体观察。结果显示,此种疫苗对人体接种无明显不良反应。接种后,12名接种者IFA、ELI-SA及中和抗体(EFRNT)全部阳转,180天和360天后仍分别有10人血清中和抗体阳性。初步表明,此疫苗是安全的,可以有效诱导抗体产生,其中和抗体多数可持续一年以上。

应用区带离心法纯化地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗

目的应用区带离心法纯化原代地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗。方法浓缩的原代地鼠肾细胞乙脑灭活疫苗,经36％和60％不连续蔗糖密度、23 000r/min离心4h后,收取纯化的乙脑抗原组分,制成纯化乙脑疫苗。结果浓缩疫苗经一步区带离心纯化后,抗原效价提高3倍以上,蛋白去除99.5%以上。经稀释制成的半成品疫苗与未经浓缩的原疫苗相比,抗原效价提高4倍以上,蛋白去除99％以上。结论区带离心法可用于纯化地鼠肾细胞乙脑疫苗。

肾综合征出血热地鼠肾细胞灭活疫苗(Ⅱ型)稳定性的研究

采用空斑减少中和试验（ＰＲＮＴ）检测疫苗效力的方法，对肾综合征出血热地鼠肾细胞灭活疫苗（Ⅱ型）进行了系统地稳定性试验研究。结果表明，疫苗置３７℃３ 天，室温３ 周，２～８℃保存一年、一年半、两年和两年半。效力试验检测结果均达到合格标准，证明疫苗稳定性良好。

双价肾综合征出血热沙鼠肾细胞灭活疫苗接种效果观察

现已知我国半数地区间时存在着姬鼠和家鼠二种型别的肾综合征出血热(HFRS)的混合流行,因此,有必要研制能同时预防这二种型别的疫苗。目前我国用于生产疫苗的三株HFRS病毒,对同型各毒株均表现较好的中和作用,但对异型病毒的交叉中和作用较差。经人体免疫三针后,对同型病毒的中和抗体阳转率可达90%,而对异型病毒的阳转率仅30%左右。因而,在我国,研制双价HFRS疫苗的工作早已被提出来了。本文报道我们研制的双价HFRS沙鼠肾灭活疫苗免疫人体的结果。材料与方法一、疫苗:由杭州天元生物药业公司生产的双价肾综合征出血热沙鼠肾细胞灭活疫苗(批号双-4),制造疫苗的毒种为Z10(Ⅰ型)和Z37(Ⅱ型),病毒在沙鼠肾原代细胞培养后,经β-丙内脂灭活,内含0.1%人血白蛋白和0.5mg/ml氢氧化铝佐剂,先分别制成Ⅰ型和Ⅱ型的单价疫苗,再按不同比例混合而成双价疫苗。

原代地鼠肾细胞乙脑灭活疫苗中残余细胞基质的检测

目的找出多批原代地鼠肾细胞乙型脑炎灭活疫苗高过敏反应发生率的原因，提出解决方案。方 法利用ＨＰＬＣ排阻层析结合ＥＬＩＳＡ方法相对定量地分析高反应性和无反应性疫苗的残余细胞基质成分，并利用 凝胶过滤柱层析去除疫苗中细胞源性杂质。结果高反应性疫苗中地鼠肾细胞基质成分的残留量偏高；利用常压 凝胶过滤柱层析法可将残留的细胞基质成分几乎完全去除。结论本次过敏反应事件是由部分疫苗中地鼠肾细 胞基质成分残留量偏高所致，用一步分子筛柱层析处理疫苗是一种简单有效的解决办法。

双价肾综合征出血热灭活疫苗(地鼠肾细胞)细菌内毒素检查法

目的建立双价肾综合征出血热灭活疫苗(地鼠肾细胞)细菌内毒素检查法。方法细菌内毒素检查的定量测定法与凝胶限量法两种方法进行干扰实验。结果通过样品进行适当的稀释,凝胶法:样品浓度为1.2×10-3mg/mL,使用灵敏度为0,06EU/mL的鲎试剂进行细菌内毒素检查无干扰作用;定量测定:与凝胶法相同的样品浓度回收率好,无干扰作用。结论双价肾综合征出血热灭活疫苗(地鼠肾细胞)可以建立细菌内毒素检查法。

甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)和灭活疫苗(L8株)诱导小鼠体液及细胞免疫应答

目的评估甲型肝炎减毒活疫苗和灭活疫苗的免疫学效果。方法用甲型肝炎减毒活疫苗(H2株)和灭活疫苗(L8株)分别经腹腔免疫BALBc小鼠后,用ELISA法检测血清中抗HAVIgG、TNFα、IFNγ和IL2;用流式细胞仪对全血中T细胞亚群分类;3HTdR掺入法检测T淋巴细胞增殖。结果减毒活疫苗组在初免后诱导的体液和细胞免疫水平均低于灭活疫苗组,加强免疫后,与灭活疫苗相当。灭活疫苗组IFNγ的峰值出现时间较减毒活疫苗组晚,但水平较高。结论两种疫苗均可诱导体液和细胞免疫应答,减毒活疫苗进行加强免疫后可诱导更好的系统免疫应答。

肾综合征出血热灭活疫苗免疫大鼠的抗体应答

本文对实验大鼠进行单价肾综合征出血热灭活疫苗免疫，结果表明免疫大鼠能产生较高的同型和异型中和抗体及IFA抗体应答，因而，大鼠可以作为疫苗效力评价的实验动物。

安徽省肾综合征出血热沙鼠肾细胞Ⅰ型灭活疫苗现场实施及防病效果观察

安徽省肾综合征出血热沙鼠肾细胞Ⅰ型灭活疫苗现场实施及防病效果观察宋明宇，魏强，陈家新，陈孝英，丁广修，孙仁品，许中安，花昌华，李含，周本良肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）沙鼠肾细胞灭活Ⅰ型疫苗是新近研制的生物制品，经小范围人群接种试验证明是安全的。根据中国...

大鼠效力试验模型对肾综合征出血热灭活疫苗的敏感性

目的 研究实验大鼠效力试验模型对肾综合征出血热灭活疫苗的敏感性。方法 用不同剂量、不同浓度肾综合征出血热灭活疫苗免疫大鼠 ,然后采用直接免疫酶斑减少中和试验检测血清汉坦病毒中和抗体 (NA)。结果与讨论 采用每剂 0 12 5ml的疫苗免疫大鼠可产生有效的免疫应答 ;疫苗应采用原液免疫 ,不宜做稀释 ;大鼠可作为疫苗效力评价的实验动物。

乙型脑炎减毒活疫苗工艺中金黄地鼠肾细胞培养液里谷氨酰胺添加的研究

目的比较谷氨酰胺在不同浓度和不同添加阶段的条件下,作为细胞生长液的成分,对乙型脑炎减毒活疫苗生产中金黄地鼠肾细胞的培养效果以及后续生产工艺的影响。方法 (1)以两种添加阶段:将谷氨酰胺作为细胞生长液体培养基的成分加入细胞培养和培养细胞时临时配制后加入细胞培养;(2)以不同的浓度:按0.05、0.1、0.2 g/L的浓度加入细胞培养。结合两种条件后,每种组合条件生产3批地鼠肾细胞,对所有批次细胞的生长情况及后续接种病毒后,对应的病毒生长情况进行比较研究。结果谷氨酰胺在培养细胞时临时配制后加入细胞培养所生产的地鼠肾细胞质量优于其作为细胞生长液体培养基的成分加入细胞培养,采用秩和检验,差异有统计学意义(P=0.002<0.05);谷氨酰胺按0.1 g/L和0.2 g/L的浓度加入细胞培养所生产的地鼠肾细胞质量优于按0.05g/L浓度,在2种添加阶段其,差异有统计学意义(P=0.02<0.05),但0.1g/L和0.2 g/L的浓度之间,无论谷氨酰胺的添加阶段在培养基中添加P=0.513,在培养时临时添加P=0.827),两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论在乙型脑炎减毒活疫苗生产所需的地鼠肾细胞培养中,谷氨酰胺适合在培养细胞时临时配制后加入细胞培养容器,浓度不宜低于0.1g/L。

地鼠肾细胞灭活乙型脑炎疫苗的儿童免疫效果调查

地鼠肾细胞灭活乙型脑炎疫苗的儿童免疫效果调查江苏省卫生防疫站（南京２１０００９）戴红张银凤刁连东江苏省金坛市卫生防疫站冯八小徐爱玲郭剑涛地鼠肾细胞灭活乙脑疫苗（简称乙脑疫苗）应用于乙脑预防２０余年，近年来临床病例经人工免疫的婴幼儿占有一定比例，提示乙...

流行性出血热灭活疫苗人体试验的效果观察

我们研制的流行性出血热(EHF)灭活疫苗,于1988年3月参加全国EHF灭活疫苗的统一考核。经中国药品生物制品检定所检定合格后,获得卫生部批准,进行了小批量的人体试验,现报告10例正常人接种后的反应和抗体产生情况如下。 1.疫苗:以EHF病毒Z10P10为毒种,感染沙鼠肾原代细胞,按流行性乙型脑炎的生物制品规程要求研制成的EHF灭活疫苗,并用β—丙内脂(含量为0.05%)代替甲醛溶液灭活病毒,于1988年1月24日制成。

HFRSV在Vero细胞上的传代适应及疫苗的初步研制

作者观察了肾综合症出血热病毒(HFRSV)Z_(10)株、HB_(55)株和L_(99)株在Vero细胞上的传代适应情况,并制备了3批灭活疫苗。试验结果表明,3批疫苗对家兔均有较好的免疫效果,动物经两次免疫后4周,血清中和抗体阳转率为100％。这一结果为应用Vero细胞制备HFRS灭活疫苗提供了有意义的科学数据。

国内外3种乙脑疫苗在小鼠体内的保护力试验比较

比较乙型脑炎（ＪＥ）ＳＡ１４１４２减毒活疫苗、地鼠肾细胞灭活疫苗（ＨＫＶ）和鼠脑纯化疫苗（ＭＢＶ）在小鼠体内的免疫保护效果。采用免疫后以Ｐ３株和中山株（Ｎａｋ）腹腔或脑内攻击的方法。结果表明乙脑ＳＡ１４１４２减毒活疫苗免疫１次对２株乙脑病毒的腹腔攻击均有１００％保护，对脑内攻击亦有较好的保护（４０％～８０％），而２种灭活疫苗仅对腹腔有一定的保护（４０％～８０％），对脑内几乎无保护。３种疫苗均可诱生中和抗体（ＮＡ），活疫苗与ＭＢＶ的抗体水平无明显差异，但保护力活疫苗明显高于ＭＢＶ。ＭＢＶ虽较ＨＫＶ诱生的中和抗体高，但保护力却不比ＨＫＶ高。因此结果表明中和抗体与保护力并无绝对的相关关系，活疫苗具有诱生体液和细胞免疫的全面免疫。

纯化地鼠肾细胞流行性乙型脑炎灭活疫苗人体接种反应及免疫效果观察

对内蒙古自治区流行性乙型脑炎（乙脑）非流行区鄂尔多斯市东胜区进行疫苗接种人体反应及免疫效果观察。

流行性乙型脑炎纯化灭活疫苗(地鼠肾细胞)安全性及血清学效果研究

目的评价流行性乙型脑炎(乙脑)纯化灭活疫苗(地鼠肾细胞)[Purified Inactivited Japanese Encephalitis Vaccine(Primary Hamster Kidney Cell),JEV-I(PHK)]接种安全性及血清学效果。方法共选择943名6月龄～10岁儿童进行Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期临床研究,临床研究用疫苗为兰州生物制品研究所研制,批号20010401,剂量为0.5ml/剂,每剂蛋白含量11.5μg。上臂三角肌肌内注射,0、7d各接种1剂。结果接种人体后副反应轻微,无严重全身及局部反应。共接种1848剂次,101剂次出现发热反应,其中98剂次≤37.5℃,24～72h自行恢复。Ⅰ期接种40人,总反应率2.5%;Ⅱ、Ⅲ期接种903人。另设对照疫苗组JEV-I(Vero细胞)接种101人,总反应率分别为6.2%和14.2%。血清学效果测定表明,在试验组与对照组,免疫前抗体阴性组的抗体阳转率分别为96.9%和84.0%,抗体几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)分别为1∶32.8和1∶43.9;免疫前抗体阳性组的抗体≥4倍增长率分别为93.1%和100.0%,抗体GMT分别为1∶167.2和1∶181.0。结论JEV-I(PHK)安全性和血清学效果良好。临床试验注册国家食品药品监督管理局《新药临床研究批件》(批件号2003L00429)。