双价肾综合征出血热灭活疫苗加强免疫后中和抗体反应

目的 :双价肾综合征出血热 (HFRS)灭活疫苗基础全程 3针免后 1年半加强 1针免疫 ,观察两型的中和抗体反应水平。方法 :对免疫志愿者加强免疫前和免疫后 2 0d采血 ,以空斑减少中和试验 (PRNT)检测血清中HFRSⅠ型 ( 76 - 118)和Ⅱ型 (SEOV)中和抗体。结果 :血清学检测加强免疫后Ⅰ型中和抗体滴度GMT 1∶2 8.2 9,Ⅱ型中和抗体滴度为 1∶32 .49,比加强免疫前两型中和抗体滴度高 3～ 10倍。结论

接种双价肾综合征出血热灭活疫苗致血管神经性水肿1例报告

7月2413，接种双价肾综合征出血热灭活疫苗1剂致血管性水肿1例的报告，市、县疾控中心积极采取措施，区疾控中心向区卫生局、市疾控中心汇报并组织疑似预防接种异常反应调查诊断专家组进行了调查，调查情况报告如下：1病例摘要某女，40岁，7月23日在村卫生室接种1剂1ml双价肾综合征出血热灭活疫苗，

用双价肾综合征出血热灭活疫苗加强接种HNT型单价疫苗免疫者的效果观察

对１９８８年经过ＨＮＴ型疫苗初免３针，并于１９８９年加强１针的７名志愿者，于１９９７年加强１针双价疫苗后１４天采血，测定对ＨＮＴ型和ＳＥＯ型ＨＦＲＳ病毒的中和抗体。结果经加强双价疫苗的７名志愿者血清中，均检出ＨＮＴ型和ＳＥＯ型病毒的中和抗体，其中对ＨＮＴ病毒的中和抗体较高，对ＳＥＯ型病毒的中和抗体也能达到规定的要求，表明双价ＨＦＲＳ灭活疫苗可用于过去接种ＨＮＴ型疫苗人群的加强。

双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫原性检测

目的检测生产的双价肾综合征出血热灭活疫苗的免疫原性。方法将生产的各批次双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫家兔,并在初次免疫后1wk加免一次,每次免疫接种1ml/只。免疫前和免疫后第28d分别于家兔心脏采血,分离血清运用空斑减少中和实验测定血清的中和抗体滴度。结果所检测的5批双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫家兔后其血清的中和抗体滴度均≥1:10,部分批次/家兔的免疫血清其中和抗体滴度≥1:20。结论所检测的5批双价肾综合征出血热灭活疫苗其免疫原性检测结果均达到中国国家药典要求。

双价肾综合征出血热灭活疫苗(地鼠肾细胞)细菌内毒素检查法

目的建立双价肾综合征出血热灭活疫苗(地鼠肾细胞)细菌内毒素检查法。方法细菌内毒素检查的定量测定法与凝胶限量法两种方法进行干扰实验。结果通过样品进行适当的稀释,凝胶法:样品浓度为1.2×10-3mg/mL,使用灵敏度为0,06EU/mL的鲎试剂进行细菌内毒素检查无干扰作用;定量测定:与凝胶法相同的样品浓度回收率好,无干扰作用。结论双价肾综合征出血热灭活疫苗(地鼠肾细胞)可以建立细菌内毒素检查法。

生产场地变更后双价肾综合征出血热灭活疫苗的动物安全性

目的观察生产场地变更前、后双价肾综合征出血热灭活疫苗(简称出血热疫苗)的肌肉刺激性,评价该疫苗的动物安全性。方法采用同体左、右侧自身对比法,经新西兰白兔左、右侧大腿股四头肌肌内分别注射氢氧化铝佐剂和出血热疫苗(生产场地变更前、后各3批),均1.0 ml/只,给药1次。于注射后第3天进行大体剖检及病理组织学检查。结果新西兰白兔的出血热疫苗与氢氧化铝佐剂注射侧肌肉刺激性损伤相似,生产场地变更前、后的局部肌肉组织的病理变化无明显差异。结论生产场地变更后的出血热疫苗具有可靠的动物安全性。

双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫反应的动态观察

为动态观察沙鼠肾原代细胞双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫动物后的免疫反应 ,采用人用剂量的 1/ 2 0肌内注射免疫小鼠 ,局部麻醉下采集尾血 ,分离血清 ,用间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定血清抗体水平 ;处死动物时分离腹股沟淋巴结和脾脏淋巴细胞进行分类计数。结果显示 :双价肾综合征出血热疫苗在初次免疫后第 2针血清抗体有较大提高 ,并维持在高水平。流式细胞分类计数 ,疫苗注射组腹股沟淋巴结CD+ 4 细胞的免疫荧光强度显著高于对照组 (P<0 0 5 ) ,但脾脏的B细胞荧光强度却显著低于对照组 (P<0 0 5 ) ,提示接种该疫苗后细胞免疫亢进。表明沙鼠肾原代细胞双价肾综合征出血热灭活疫苗随接种时间的推移 ,产生良好的免疫反应。这种反应在免疫 2针后能够维持较高水平。该疫苗的免疫机理可能是通过局部淋巴结对抗原呈递来实现的。同时提示 。

两种工艺制备双价肾综合征出血热灭活疫苗的安全性及免疫原性评价

目的对两种不同工艺制备的双价肾综合征出血热灭活疫苗的安全性及免疫原性进行评价。方法分别采用细胞工厂、原10 L转瓶工艺培养肾综合征病毒(hemorrhagic fever with renal syndrome virus,HFRSV)Ⅰ型和Ⅱ型,经病毒收获、灭活、超滤浓缩、纯化及除菌过滤后制备单价疫苗原液,将Ⅰ型、Ⅱ型单价疫苗原液按1∶1等体积混合,采用透射电子显微镜观察病毒形态,12%SDS-PAGE分析蛋白相对分子质量。采用家兔刺激试验和豚鼠主动过敏性试验对两种工艺制备的各3批疫苗进行安全性评价,并对疫苗进行小鼠免疫保护性试验。结果两种工艺分别制备了3批疫苗原液,经透射电镜观察可见100 nm左右的粗糙圆形病毒颗粒,12%SDS-PAGE分析可见相对分子质量分别为70000~73000和约50000的蛋白条带,病毒形态及蛋白条带大小均与HFRSV一致。两种工艺制备的疫苗家兔注射部位经肉眼观察未见刺激性,豚鼠主动过敏试验中也未出现过敏性反应;疫苗免疫保护指数均大于1∶10。结论细胞工厂工艺和原有10 L转瓶工艺制备的双价肾综合征出血热灭活疫苗均具有良好的安全性及免疫原性。

不同用量卵磷脂中和剂和PB缓冲液在双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)无菌检查中的应用

目的研究不同用量卵磷脂中和剂和PB缓冲液,在双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)无菌检查中的应用。方法取双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)转移至卵磷脂中和剂中(摇匀后放置5 min),按薄膜过滤法过滤后,用0.15 mol/L PB缓冲液(30~35℃保温)冲洗滤膜,加入液体培养基培养,进行不同用量卵磷脂中和剂和PB缓冲液适用性试验。用选定的试验条件进行无菌检查方法的适用性试验(薄膜过滤法)及阳性对照验证试验。结果采用10 ml卵磷脂中和剂中和10瓶供试品(摇匀后放置5 min),用0.15 mol/L PB缓冲液(30~35℃保温)冲洗滤膜,每张滤膜每次冲洗量为100 ml,共冲洗2次(末次冲洗液中含小于100 cfu的菌液),该方法过滤速度快,卵磷脂冲洗完全,无残留、不影响结果判定,确定适用。无菌检查方法的适用性试验中,供试品各滤筒中的试验菌与阳性对照比较均生长良好,达到《中国药典》三部(2015版)要求,应用于双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)的无菌检查中无抑菌作用或其抑菌作用可忽略不计。以金黄葡萄球菌和黑曲霉作为阳性对照菌,0和17 d培养到期后加入阳性菌,对比试验显示试验菌均生长良好。结论该方法适用于双价肾综合征出血热灭活疫苗(Vero细胞)无菌检查。

肾综合征出血热双价灭活疫苗的研究

为研制包含Ⅰ型和Ⅱ型病毒抗原的肾综合征出血热双价灭活疫苗 ,以适合全国各出血热疫区使用。通过空斑克隆和终末稀释传代的方法选育了 2株出血热I型病毒PS 6和JR C 1。用金黄地鼠肾细胞培养的L99株(Ⅱ型 )病毒疫苗 ,PS 6株病毒疫苗和JR C 1株病毒疫苗以 2∶1∶1的配伍方式试制三批双价疫苗。结果试制的三批双价疫苗自检和中国药品生物制品检定所复检 ,各项指标全部合格。疫苗于室温放置 3周 ,3 7℃放置 2周和 4℃放置 1年、1 5年和 2年 ,效力试验均合格。研制的三批出血热双价疫苗 ,符合《肾综合症出血热灭活疫苗 (双价 )试行规程》的要求 。

双价肾综合征出血热沙鼠肾细胞灭活疫苗接种效果观察

现已知我国半数地区间时存在着姬鼠和家鼠二种型别的肾综合征出血热(HFRS)的混合流行,因此,有必要研制能同时预防这二种型别的疫苗。目前我国用于生产疫苗的三株HFRS病毒,对同型各毒株均表现较好的中和作用,但对异型病毒的交叉中和作用较差。经人体免疫三针后,对同型病毒的中和抗体阳转率可达90%,而对异型病毒的阳转率仅30%左右。因而,在我国,研制双价HFRS疫苗的工作早已被提出来了。本文报道我们研制的双价HFRS沙鼠肾灭活疫苗免疫人体的结果。材料与方法一、疫苗:由杭州天元生物药业公司生产的双价肾综合征出血热沙鼠肾细胞灭活疫苗(批号双-4),制造疫苗的毒种为Z10(Ⅰ型)和Z37(Ⅱ型),病毒在沙鼠肾原代细胞培养后,经β-丙内脂灭活,内含0.1%人血白蛋白和0.5mg/ml氢氧化铝佐剂,先分别制成Ⅰ型和Ⅱ型的单价疫苗,再按不同比例混合而成双价疫苗。

肾综合征出血热双价灭活疫苗随机对照试验现场情况报告

我国在１９９４年开展了肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）Ⅰ型和Ⅱ型单价灭活疫苗现场效果评价研究，疫区现场人群接种后的血清学和流行病学效果考核均取得较好结果〔１，２〕。鉴于我国主要是ＨＦＲＳ混合型疫区，虽然现场效果显示单价疫苗对异型（Ⅰ或Ⅱ型）有一定的保护能力...

双价肾综合征出血热灭活疫苗免疫效果观察

现已知我国半数地区存在着姬鼠和家鼠二种型别的肾综合征出血热(HFRS)的混合流行,因此,有必要研制能同时预防这二种型别的疫苗。目前我国用于生产的三株HFRS病毒,对同型各毒株均表现较好的中和作用,但对异型病毒的交叉中和作用较差。经人体免疫三针后,对同型病毒的中和抗体阳转率可达90%,而对异型病毒的阳转率仅30%。因而,在我国,研制双价HFRS灭活疫苗免疫的工作早已被提出来了。

肾综合征出血热双价地鼠肾细胞灭活疫苗的安全性及血清学效果评价

目的 :评价肾综合征出血热地鼠肾细胞双价灭活疫苗的安全性及血清学免疫效果。方法 :按统一方法观察接种后副反应发生情况 ,以蚀斑减少中和试验方法测定免疫前后血清中和抗体。结果 :对 10 0人进行系统观察 ,局部反应与全身反应发生率均为 2 .0 0 % ,总反应率为 4.0 0 % ,其中强反应发生率为 1.0 0 % ;无头疼、头晕、恶心、皮疹等全身症状及注射处硬结、痒、烧灼感、淋巴结肿痛等局部症状发生。免疫后Ⅰ型病毒中和抗体阳转率为 92 .5 0 % ,Ⅱ型病毒中和抗体阳转率为 95 .0 0 % ,90 .0 0 %受观察者对两型病毒均阳转。结论

肾综合征出血热灭活疫苗毒种的选育及其生物学特性的研究

肾综合征出血热（HFRS）家鼠型病毒株237，经过酶斑选育后，获得的237七毒株，与原来的毒株相比，其生物学特性发生较大的变化，表现在沙鼠肾细胞上增殖的病毒滴度由原来的106.0TCID50／ml增至107.5TCID50／ml；培养液中的抗原量由原来的RPHA1：16增至1：04，由它制成的疫苗免疫家兔的血清，对UR病毒的中和抗体滴度，由原来的≤1:10，增至1：10～≥1:40。表明Z37－5毒株适用于制造灭活疫苗。