脯氨酰羟化酶在糖尿病大鼠视网膜的表达及其意义

目的观察探讨糖尿病（DM）大鼠视网膜组织中脯氨酰羟化酶（PHI）12）的表达及意义。方法雄性Wistar大鼠108只，随机分为DM模型组和正常对照组，分别为60、48只。对DM模型组大鼠进行一次性腹腔注射1％链脲霉素枸橼酸（STZ）溶液建模，正常对照组腹腔注射等量的枸橼酸缓冲液。造模后1、3、6个月，荧光显微镜下观察大鼠视网膜血管分布形态。造模后1～6个月，采用伊凡思蓝（EB）灌注视网膜铺片检测视网膜组织内EB浓度；免疫组织化学染色法观察大鼠视网膜PHD-2阳性染色的分布特点；蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测大鼠视网膜中PHD-2、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果荧光显微镜观察结果显示，正常对照组大鼠视网膜血管走行规则，浅深层血管形态清晰；DM模型组大鼠视网膜血管渗漏持续存在。造模后1～6个月，DM模型组大鼠视网膜血管外组织内EB含量较正常对照组明显增加，差异有统计学意义（t=3．810，2．722，2．845，2．342，2．456，3．823；P〈0．05）。免疫组织化学染色结果显示，DM模型组及正常对照组大鼠视网膜中均可见PHD-2阳性染色，主要分布于视网膜内核层、神经节细胞层及血管壁。Westernblot检测结果显示，DM模型组大鼠视网膜中PHD-2表达在造模后1、2个月时较正常对照组下降（t=16．230，16．390；P〈0．05）；HIF-1α表达在造模后1、2、3个月时较正常对照组明显升高（t=27．073，36．709，10．176；P〈0．05）；VEGF表达在造模后1～6个月均较正常对照组升高（t=13．547，31．984，21．897，8．912，9．019，14．046；P〈0．05）。结论PHD-2在DM大鼠视网膜组织中有丰富表达。PHD-2可能在糖尿病视网膜病变发生发展中有一定的调控作用，其作用途径及机制与VEGF作用通路有关。