双参芎连颗粒对动脉粥样硬化大鼠细胞凋亡的影响

目的观察双参芎连颗粒对动脉粥样硬化大鼠细胞凋亡的影响,探讨其改善动脉粥样硬化的作用机制。方法采用高脂饲料喂养及腹主动脉拉伤法造模,将大鼠分为空白组、模型组、丹蒌片组、舒降之组及双参芎连颗粒低、中、高剂量组,分别进行相应干预,连续8周。检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、氧化型低密度脂蛋白胆固醇(ox-LDL-C)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)水平;HE染色观察腹主动脉组织病理变化;免疫组化染色腹主动脉组织检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果与空白组比较,模型组大鼠血清TC、LDL-C、ox-LDL-C、hs-CRP水平升高(P<0.01),腹主动脉组织可见较多炎性细胞浸润及大小不等的脂质空泡,斑块面积增加,腹主动脉组织Bcl-2、Bax蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠血清TC、LDL-C、ox-LDL-C、hs-CRP水平均不同程度降低,腹主动脉斑块内炎性细胞浸润减少,斑块面积缩小,腹主动脉组织Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.01),Bax蛋白表达显著降低,Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.01)。结论双参芎连颗粒能调节动脉粥样硬化大鼠脂质代谢,减轻炎症反应,抑制细胞凋亡,其作用机制与降低血清TC、LDL-C、ox-LDL-C、hs-CRP水平,上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达有关。

双参芎连颗粒对动脉粥样硬化大鼠腹主动脉斑块的影响

目的 观察双参芎连颗粒对动脉粥样硬化大鼠腹主动脉斑块的影响,探讨其作用机制。方法 采用高脂饲料喂养+腹主动脉拉伤法建立动脉粥样硬化大鼠模型。将大鼠随机分为空白组、模型组、丹蒌片组、舒降之组和双参芎连颗粒低、中、高剂量组,每组26只,分别予相应药物灌胃8周。HE染色测定腹主动脉斑块面积和管腔狭窄率,高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸(Hcy)含量,免疫组化检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达,Western blot检测核因子(NF)-κB p65和p-NF-κB p65表达。结果 与空白组比较,模型组大鼠腹主动脉组织校正斑块面积和管腔狭窄率显著增加(P<0.01),血浆Hcy含量显著增加(P<0.05,P<0.01),腹主动脉组织MMP-2表达和p-NF-κB p65/NF-κB p65比值显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组第6、8周腹主动脉组织校正斑块面积减少、管腔狭窄率降低(P<0.05,P<0.01),血浆Hcy含量显著减少(P<0.05,P<0.01),腹主动脉组织MMP-2表达和p-NF-κB p65/NF-κB p65比值显著降低(P<0.01)。结论 双参芎连颗粒可降低动脉粥样硬化大鼠斑块面积和管腔狭窄率,减少斑块形成,提高易损斑块稳定性,其机制可能与减少血浆Hcy含量、降低MMP-2表达和NF-κB p65磷酸化有关。

双参芎连颗粒对高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠血管舒张及PI3K/Akt/eNOS通路的影响

目的:研究双参芎连颗粒对高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠血管病变及磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路影响。方法:大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、双参芎连颗粒高、中、低剂量(8,4,2 g·kg^(-1))组。采用高蛋氨酸饲料喂养结合5/6肾摘除法建立大鼠高同型半胱氨酸血症慢性肾病模型,5/6肾摘除术后4周后开始连续灌胃给药4周。术后4,8周测定大鼠动脉血压;术后8周实验结束,取血测定血清肌酐、尿素氮、同型半胱氨酸、蛋氨酸及血脂水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测胸主动脉磷酸化(p-)p85,p-Akt和p-Ser177等PI3K/Akt/eNOS信号通路相关蛋白表达,测定血清一氧化氮(NO),eNOS;采用离体血管环灌流方法,测定内皮依赖性舒张和非内皮依赖性舒张变化;苏木素-伊红(HE)染色观察肾脏组织及胸主动脉血管改变。结果:实验8周时,与假手术组比较,模型组动脉收缩压、血清尿素氮、肌酐、高同型半胱氨酸、蛋氨酸、总胆固醇及低密度脂蛋白明显增高;给予双参芎连颗粒4周后,各剂量组动脉收缩压、血清尿素氮、高同型半胱氨酸、蛋氨酸、血清总胆固醇及血清低密度脂蛋白均明显降低(P<0.05,P<0.01),双参芎连颗粒8,4 g·kg^(-1)组肌酐明显降低(P<0.05)。双参芎连颗粒各剂量组NO含量较模型组明细升高(P<0.05,P<0.01),双参芎连颗粒8 g·kg^(-1)组血清eNOS活性较模型组明显升高(P<0.05)。模型组动物离体胸主动脉环的内皮依赖性及非内皮依赖性血管舒张均受到明显损伤,双参芎连颗粒8 g·kg^(-1)组在乙酰胆碱累积浓度1×10^(-5).5~1×10^(-4)mmo1·L^(-1)舒张程度较模型组明显改善(P<0.05,P<0.01);双参芎连颗粒8 g·kg^(-1)组血管环在硝普钠积浓度1×10-10~1×10^(-7)mmo1·L^(-1)舒张程度较模型组明显,差异具有明显统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,与假手术组比较,模型组血管p-85,p-Akt及p-Ser177的表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,双参芎连颗粒各剂量组该通路磷酸化水平较模型组呈升高趋势,其中双参芎连颗粒8 g·kg^(-1)组p-Akt及p-Ser177的表达升高更明显,差异具有明显统计学意义(P<0.05)。双参芎连颗粒各剂量组的胸主动脉和肾脏组织病理变化与模型组比较有不同程度的减轻。结论:双参芎连颗粒可以改善高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠高同型半胱氨酸及血脂代谢异常,降低血清肌酐及尿素氮水平,降低动脉收缩压,改善血管形态及舒张功能,其作用可能与调控PI3K/Akt/eNOS信号通路有关。

双参芎连颗粒对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化炎症反应的干预作用

目的:研究双参芎连颗粒对高脂饲料喂养的Apo E基因敲除小鼠动脉粥样硬化炎症反应的干预作用。方法:采用C57BL/6小鼠做为正常组(BLA),ApoE^(-/-)小鼠随机分为4组:动脉粥样硬化模型组(MOD),普罗布考治疗组(PRO,216 mg·kg^(-1)),双参芎连颗粒高剂量治疗组(SSXL-H,1.6 g·kg^(-1))以及双参芎连颗粒低剂量治疗组(SSXL-L,0.8 g·kg^(-1))。各组ApoE^(-/-)小鼠均给予高脂饲料喂养2周后采用生化法进行血脂测定,并灌胃相应的药物。给药8周后再次进行血脂检测。同时采用超声法检测主动脉弓内膜厚度;采用油红O染色的方法分析主动脉斑块面积进行计算斑块面积/血管内表面积;采用流式高通量多因子检测技术检测血清中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α,白细胞介素(interleukin,IL)-1α,IL^(-1)0,以及单核细胞趋化蛋白(monocyte chemoattractant protein,MCP)-1等炎症细胞因子的表达。结果:双参芎连颗粒能够减少ApoE^(-/-)小鼠主动脉中-内膜厚度,降低主动脉斑块面积/血管内表面积,抑制TNF-α和MCP-1炎症因子表达,但是对血脂水平无明显的影响。结论:双参芎连颗粒可以通过对炎症反应的抑制作用而防治动脉粥样硬化,且不依赖与血脂水平的变化。