基于响应面法的双向伯克霍尔德氏菌BK发酵培养基优化

为探究马尾松Pinus massoniana的伴生细菌双向伯克霍尔德氏菌BK菌株的生防潜力,优化其发酵培养基。通过单因素试验筛选得到的最佳碳源为蔗糖和麦芽糖,最佳氮源为酵母粉和胰蛋白胨,最佳无机盐为硫酸镁和柠檬酸三钠;利用Plackett-Burman试验确定3个主要影响因素分别为蔗糖、麦芽糖和装液量;通过最陡爬坡试验结合Box-Behnken设计试验及响应面分析法,以发酵液OD_(600)为响应值,优化培养基配比,获得培养基最佳配方为蔗糖8.0 g/L,麦芽糖12.5 g/L,酵母粉11.3 g/L,硫酸镁0.6 g/L,氯化钠7 g/L;最佳发酵条件为在30℃、150 r/min条件下发酵、装液量25 mL/250 mL、接菌量1%,pH7.0~7.2;根据最佳配比验证,优化后培养基的OD_(600)为1.25,较初始培养基(OD_(600)=0.62)提高1.02倍,与模型预测值相符。研究结果优化了双向伯克霍尔德氏菌BK菌株生产发酵条件,可为后续该菌的实践应用提供理论基础。

温度和pH值对生防双向伯克霍尔德氏菌XNNH08发酵特性的影响

为了提高5 L发酵罐上生防双向伯克霍尔德氏菌XNNH08发酵过程中的活菌数量,本研究在细菌基础培养基及培养条件下,开展了培养温度和初始pH值对该菌发酵特性的影响。结果表明:在基础培养基条件下,双向伯克霍尔德氏菌XNNH08的最适生长温度为32℃,最适初始pH值为6.0;通过2个关键发酵条件的优化,发酵活菌数由原来的1.6×109 CFU/mL提高到1.7×1010 CFU/mL,活菌数显著提高。本研究可为该生防菌后续培养基的优化提供参考。

绿木霉与双向伯克霍尔德氏菌离体互作机制

木霉与根际促生细菌在土传病害生物防治上具有巨大潜力。该试验在兼容性筛选基础上,研究了绿木霉(Trichoderma virens)ZT05与双向伯克霍尔德氏菌(Burkholderia ambifaria)ZB155在离体条件下,发酵液代谢产物对互相的生长、孢子萌发、生物膜形成及拮抗活性方面的影响,并进行了离体共培养体系构建的初步研究。结果表明:菌株ZT05与ZB155离体条件下具有良好的兼容性。在离体互作研究中,两个菌株在对互相的生长、孢子萌发、生物膜形成及对立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)的拮抗作用中表现出良好的兼容性。在活体共培养中,对病原菌的抑制作用同单接种处理差异显著,其中对峙培养抑制率为38.10%,发酵液抑制率为76.67%,优势明显。因此,菌株ZT05与菌株ZB155互作在生防作用上具有巨大潜力。

猕猴桃黑头病生防菌的筛选、鉴定及防效评价

研究旨在筛选对猕猴桃黑头病病原真菌(Diaporthe eres)有拮抗作用的菌株。通过平板对峙法从陕西周至县猕猴桃根际土壤中分离筛选到1株具有明显拮抗作用的菌株BKH。显微及菌落形态观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析结果表明,该菌株为双向伯克霍尔德氏菌(Burkholderia ambifaria)。菌株BKH在平板上能显著抑制Diaporthe eres生长,抑菌率为72.5%,且对猕猴桃黑头病田间防效可达91.7%,在猕猴桃黑头病生物防治方面具有应用潜力。