双向电泳及免疫印记法对囊尾蚴囊液抗原的分析、纯化及鉴定

目的 通过分析、纯化囊液抗原 ,筛选高免疫反应性和高特异性抗原组分 ,用于囊虫病免疫诊断。 方法 用分辨率极高的双向电泳法对囊液抗原进行分离、纯化 ,并通过免疫印记 ,用囊虫病人血清、包虫病人血清和其它异源血清筛选特异性抗原组分 ,为建立新一代免疫学诊断方法奠定基础。 结果 得到了等电点为 9 4,分子量为14KD和 16 6KD两组抗原组分 ,特异性达 10 0 % ,并且仅被急性感染的囊虫病人血清识别 ,而不被囊虫完全钙化病人血清识别。 结论 得到了高免疫反应性和高特异性的蛋白纯品 。

热休克蛋白70双向免疫印记鉴定及抗体制备

目的验证肺癌组织中热休克蛋白70(HSP 70)表达量,从肺癌组织中获得HSP 70并初步制备其人源性抗体,为进一步研究其生物功能和临床应用奠定基础。方法收集肺癌组织和癌旁组织标本,应用双向电泳-免疫印记方法验证HSP 70的表达量,经过亲和层析和离子交换层析方法获得肺癌组织中HSP 70作为抗原,经过四轮亲和-吸附-洗脱,从人源性肺癌噬菌体单链抗体库中初步筛选其抗体。结果双向电泳-免疫印记结果表明,肺癌组织HSP 70表达量高于癌旁组织。凝胶电泳和免疫印记结果表明,从肺癌组织中获得了人源性HSP 70,以此HSP 70作为抗原,初步筛选出了其抗体。结论人源性HSP 70及其人源性特异结合抗体的获得,为进一步研究其抗肺癌的临床应用提供了基础依据。

三阴性乳腺癌中β-肾上腺素能受体的表达及与上皮间质化相关性研究

目的探究三阴性乳腺癌(TNBC)中β-肾上腺素能受体(β-ARs)的表达及与上皮间质化(EMT)的关系。方法72例TNBC患者组织标本选自河北工程大学附属医院。通过免疫组织化学法对肿瘤切片进行染色以评估β-ARs的表达。通过Western印迹检测EMT标记蛋白E-钙黏蛋白和波形蛋白的表达。分别通过χ2检验及Spearman秩相关分析确定β-ARs表达与TNBC临床病理特征的相关性以及β-ARs表达与EMT标志物的关系。结果与对照组织中的表达水平相比,TNBC组织中的β1-AR和β2-AR而非β3-AR的表达显著增加(P<0.05),且β1-AR和β2-AR的表达与TNM分期和LN转移显著相关(P<0.05)。在TNBC组织中,E-钙黏蛋白表达显著降低,而波形蛋白表达显著升高(P<0.05)。高β2-AR组织中E-钙黏蛋白的表达明显低于低β2-AR组织(P<0.05)。高表达β1-AR和β2-AR的组织中,波形蛋白的表达显著增加(P<0.05)。TNBC组织中β2-AR和E-钙黏蛋白之间呈显著负相关,而β1-AR和β2-AR表达与波形蛋白水平呈正相关。结论β1-AR和β2-AR在TNBC中过表达,可能通过调节EMT过程促进TNBC的发生和发展。

EGF/EGFR调控MMP-2在腺样囊性癌中的表达

目的通过研究表皮生长因子及其受体(EGF/EGFR)调控基质金属蛋白酶-2(MMP-2)在腺样囊性癌细胞中的表达,为进一步探讨MMP-2在腺样囊性癌发生、发展、转移过程的机制奠定基础。方法应用免疫组织化学SP法检测正常涎腺及腺样囊性癌组织中EGFR和MMP-2的表达分布情况;利用定时定量RT-PCR法检测不同剂量的EGF调控MMP-2mRNA在腺样囊性癌细胞中的表达水平,分析EGFR阻断剂作用下EGF调控MMP-2 mRNA的表达水平;最后利用免疫印迹Western blot法检测EGF调控下MMP-2在腺样囊性癌细胞中蛋白表达水平。结果免疫组化结果显示EGFR和MMP-2在腺样囊性癌组织中呈阳性表达,在正常腮腺组织中成阴性表达;定时定量RT-PCR法分析得出EGF上调MMP-2 mRNA在腺样囊性癌细胞中的表达,在20μg/L的剂量时上调作用最为显著,同时发现EGFR阻断剂可有效抑制EGF的上调作用;Western blot法验证了MMP-2蛋白在腺样囊性癌细胞的表达水平受到EGF的调节。结论表皮生长因子EGF可以促进MMP-2在腺样囊性癌细胞中的表达水平,可为临床治疗腺样囊性癌提供新的理论指导。

代谢综合征患者白细胞介素6水平与HDL亚类分布的相关性分析

目的探究代谢综合征(MS)患者血浆白细胞介素6(IL-6)水平与高密度脂蛋白(HDL)亚类分布及其相关性。方法收集MS组患者135例和对照组健康体检人群77例的血样,酶联免疫吸附法(ELISA)测定IL-6含量,按IL-6浓度将MS患者分为低IL-6组(IL-6≤66.76 ng/L)、中IL-6组(66.76 ng/L<IL-6<113.84 ng/L)、高IL-6组(IL-6≥113.84 ng/L)。双向电泳-免疫印迹法测定血浆HDL亚类的相对含量,全自动生化分析仪测定血脂浓度及载脂蛋白含量。分析不同性别对IL-6、血脂、载脂蛋白及HDL亚类分布的影响,及IL-6水平与HDL亚类分布的相关性。结果与对照组比较,MS组IL-6、preβ1-HDL、HDL3b、HDL3c、TC、TG、LDLC含量以及LDLC/HDLC和Apo B100/Apo AI均显著增高(P<0.05或P<0.01),而HDL2a、HDL2b、preβ2-HDL、Apo AI和HDLC含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组同性别比较,MS组男性或女性HDL亚类的相对含量有差异(P<0.05或P<0.01);与同组男性比较,对照组和MS组女性血脂、血浆载脂蛋白水平差异均无统计学意义(P>0.05)。MS患者血浆IL-6含量的升高与HDL亚类分布异常存在相关性,即IL-6的含量与小颗粒的preβ1-HDL、HDL3b水平呈正相关,与大颗粒HDL2b水平呈负相关。结论 MS患者血浆IL-6水平升高,且HDL颗粒呈变小趋势,高水平的IL-6可能与HDL亚类分布异常和血脂紊乱有关。

血浆胆固醇含量对代谢综合征患者HDL亚类分布的影响

目的探讨代谢综合征(MS)患者血浆胆固醇水平对高密度脂蛋白(HDL)亚类分布的影响。方法采用全自动生化分析仪测定MS患者血浆血脂含量及载脂蛋白浓度,用双向电泳-免疫印记法测定血浆HDL亚类的含量。并根据中国成人血脂异常防治指南,将MS患者按血浆总胆固醇(TC)浓度分为3组,即TC正常范围组:TC<5.17 mmol/L、TC临界升高组:5.17 mmol/L≤TC<6.21 mmol/L、TC升高组:TC≥6.21 mmol/L。结果与对照组相比,MS患者血浆空腹血糖(FPG)、TC、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、载脂蛋白B100(apo B100)、preβ1-HDL、HDL3b含量及apo B100/AI和LDLC/HDLC比值均显著性增高(P<0.05或P<0.001),HDLC、apo AI、HDL2a、HDL2b显著降低(P<0.05或P<0.001);并且随着血浆TC水平的升高,小颗粒的preβ1-HDL和HDL3b含量升高,而大颗粒的HDL2a和HDL2b含量降低。MS患者HDLC的含量降低和(或)LDLC含量升高都存在不同程度的血浆HDL亚类分布异常,而且HDLC含量异常时存在HDL各亚类分布异常的程度较LDLC含量异常时更显著;当二者同时异常时,小颗粒的preβ1-HDL增加,大颗粒的HDL2b减少更加明显。直线相关和多元回归分析中发现,血浆TC、HDLC和LDLC含量紊乱与HDL亚类异常分布存在关联。结论 MS患者胆固醇含量与HDL亚类分布异常有关。

代谢综合征患者血浆甘油三酯水平对HDL亚类分布的影响

目的探讨代谢综合征(MS)患者血浆甘油三酯(TG)水平对高密度脂蛋白(HDL)亚类分布的影响。方法选取在南华大学附属第一医院就诊的MS患者血样,全自动生化分析仪测定血脂含量及载脂蛋白浓度,根据美国国家胆固醇教育计划NCEP ATP-Ⅲ文件,将MS患者按TG浓度分4组,即TG<1.69 mmol/L、1.69mmol/L≤TG<2.25 mmol/L、2.25 mmol/L≤TG<5.64 mmol/L、TG≥5.64 mmol/L,采用双向电泳-免疫印迹检测法测定MS患者和99例正常人血浆HDL亚类的相对含量。结果与对照组相比,MS患者血浆总胆固醇(TC)、TG、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、载脂蛋白B100(Apo B100)、preβ1-HDL、HDL3b含量及Apo B100/AⅠ和LDLC/HDLC比值均显著性增高(P<0.05或P<0.001),HDLC、Apo AⅠ、HDL2b、HDL2a显著降低(P<0.05或P<0.001)。并且随着血浆TG水平的升高,小颗粒的preβ1-HDL、HDL3a和HDL3b含量升高,而大颗粒的HDL2b和HDL2a含量降低。结论MS患者HDL亚类分布异常,小颗粒的preβ1-HDL和HDL3b含量升高,而大颗粒的HDL2b和HDL2a含量降低,血浆TG含量变化可能是影响MS患者HDL亚类异常的因素之一。

血清胸苷激酶1在宫颈癌患者新辅助化疗前后检测的意义

目的探讨宫颈癌患者新辅助化疗前后血清胸苷激酶1(S-TK1)水平的变化在预测新辅助化疗疗效中的意义。方法选择69例经宫颈活检证实为宫颈癌患者,行新辅助化疗2个疗程,用免疫增强化学发光点印记法(ECL dot-blot)检测化疗前后的S-TK1含量,同时检测42例体检健康者S-TK1水平。结果宫颈癌患者S-TK1水平为(8.63±2.36)pmol/L,显著高于健康对照组的(0.52±0.42)pmol/L(P<0.05);宫颈癌患者新辅助化疗后的S-TK1水平为(3.63±2.76)pmol/L,明显低于化疗前的(8.63±2.36)pmol/L,差异有统计学意义(P<0.05);临床缓解组的S-TK1含量降低的百分比显著高于临床无效组(P<0.05)。结论 S-TK1检测可以作为评估宫颈癌新辅助化疗疗效的指标之一。

代谢综合征患者FGF21水平与HDL亚类分布的关系

目的 探讨代谢综合征(MS)患者成纤维细胞生长因子21(FGF21)水平与高密度脂蛋白(HDL)亚类分布的关系。方法 选择2017年10月—2018年12月本院收治的40例代谢综合征患者作为研究对象(MS组),选择同期正常体检者37名作为对照组,采用全自动生化分析仪检测血脂水平,ELISA法检测FGF21水平,双向电泳-免疫印迹检测法检测HDL亚类分布情况。依据MS组FGF21均值±标准差将其分成三组,即低FGF21组(≤170.54 pg/ml)、中FGF21组(170.54 pg/ml<FGF21<346.34 pg/ml),高FGF21组(≥346.34 pg/ml)。结果 MS组与正常对照组相比,FGF21水平明显升高(P<0.01),空腹血糖(FPG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白B100(apo B100)及apo B_(100)/载脂蛋白A-I(apo A-I)比值明显升高,而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、apo A-I含量明显降低(P<0.01)。与正常对照组相比,MS患者血清preβ_1-HDL、HDL_(3b)含量明显升高(P<0.01),HDL_(2b)、HDL2a含量明显降低(P<0.01)。与低FGF21组相比,中FGF21组preβ_1-HDL、HDL_(3b)增多,HDL_(2b)减少;与低FGF21组相比,高FGF21组preβ_1-HDL、HDL_(3b)增多,HDL_(2b)、HDL2a减少。MS患者FGF21水平与FPG、TG正相关(P<0.05),与HDL-C负相关(P<0.05)。结论 MS患者FGF21水平升高,小颗粒的preβ_1-HDL、HDL_(3b)含量升高,而大颗粒的HDL_(2b)、HDL2a含量降低。随着FGF21水平的升高HDL亚类有变小的趋势,提示HDL亚类的成熟过程受到阻碍。

代谢综合征患者血浆HDL亚类组成及与甘油三酯的相关性

目的探讨代谢综合征（metabolicsyndrome，MS）患者血浆高密度脂蛋白（highdensitylipoprotein，HDL）亚类含量变化及与甘油三酯水平的关系。方法采用双向电泳一免疫印迹检测法测定352例MS患者和187例正常人血浆HDL亚类的相对含量，全自动生化分析仪测定血脂含量，ELISA法检测载脂蛋白浓度。结果与对照组相比，MS患者血浆甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDLC）、栽脂蛋白B100（ApoBl00）、pre^l—HDL、HDL，。含量及ApoBl00／A1和LDLC／HDLC比值均显著性增高，HDLC、ApoAl、HDL2h、HDL，。显著降低（P〈0．001）。根据ATP11I文件，将MS患者按TG浓度分4组，即正常组（〈1．7mmo^L）、临界高组（1．7～2．3mmol／L）、高组（2．3～5．69mm01／L）、极高组（≥5．7mmol／L），随血浆TG水平的升高，小颗粒的pre[31．HDL、HDL。和HDL。含量逐渐升高，而大颗粒的HDL2。和HDL：。含量逐渐降低。结论代谢综合征患者血浆HDL亚类颗粒有变小的趋势，并且随着TG水平的升高，HDL颗粒减小更显著。

血浆晚期氧化蛋白产物与HDL亚类组成的关系

目的探讨血浆晚期氧化蛋白产物(AOPPs)对血浆高密度脂蛋白(HDL)亚类组成及含量的影响。方法采用氯胺-T法和双向电泳免疫印迹检测法对346例受试者分别测定血浆AOPPs的相对含量和血浆HDL亚类的组成及含量。按AOPPs浓度均值加或减去一个标准差作为分割点,将受试者分为3组,即低AOPPs(AOPPs≤60μmol/L)组、中AOPPs(60μmol/L<AOPPs<90μmol/L)组、高AOPPs(AOPPs≥90μmol/L)组。结果与低AOPPs组相比,高AOPPs组中preβ1-HDL及HDL3a显著增多(P<0.001),而HDL2a、卵磷脂胆固醇酰基转移酶及HDL2b显著降低(P<0.001),各组胆固醇酯转运蛋白无变化。相关性分析表明AOPPs与血浆HDL亚类分布存在显著相关。结论随着血浆AOPPs水平的升高HDL颗粒有变小的趋势,AOPPs可能阻碍了HDL的成熟代谢。

代谢综合征患者血浆网膜素1水平与HDL亚类分布的相关性分析

目的探讨代谢综合征(MS)患者血浆网膜素1(Omentin-1)水平对高密度脂蛋白(HDL)亚类分布的影响。方法收集在南华大学附属医院就诊的MS患者102例和对照组81例的血样,采用全自动生化分析仪测定血脂浓度及载脂蛋白含量,酶联免疫吸附法测定Omentin-1的含量,双向电泳-免疫印迹法测定人血浆HDL亚类的相对含量。按Omentin-1浓度均值加减去一个标准差作为分割点,将MS患者分为3组:低Omentin-1组(Omentin-1≤9.10μg/L)、中Omentin-1组(9.10μg/L<Omentin-1<26.68μg/L)、高Omentin-1组(Omentin-1≥26.68μg/L)。结果随着Omentin-1浓度的降低,MS患者血浆甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及ApoB100/AⅠ和LDLC/HDLC比值均显著性增高(P<0.05或P<0.01),高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、ApoAⅠ含量显著降低(P<0.05或P<0.01)。与低Omentin-1组相比,高Omentin-1组中小颗粒的preβ1-HDL和HDL3b含量显著下降(P<0.05或P<0.01),而大颗粒的HDL2a含量显著上升(P<0.05)。结论 MS患者血浆Omentin-1水平降低,且HDL颗粒呈变小趋势,低水平的Omentin-1可能与HDL亚类分布异常和血脂紊乱有关。

脑梗死患者血浆HDL亚类组成及含量研究

目的:分析脑梗死患者血浆高密度脂蛋白(HDL)亚类组成及含量。方法:采用双向电泳-免疫印迹检测法分析50例脑梗死患者和50例正常者HDL亚类的组成及含量。结果:与对照组比较,脑梗死患者血浆中preβ2-HDL和HDL2b含量显著降低(均P<0.01),小颗粒preβ1-HDL含量显著增加(P<0.01);患者血浆三酰甘油(TG)水平与preβ1-HDL、HDL3b、HDL2a和HDL2b含量呈显著负相关(均P<0.05),HDL-C、载脂蛋白AⅠ含量与preβ1-HDL、preβ2-HDL、HDL3c、HDL3b、HDL3a、HDL2a和HDL2b含量呈显著正相关(均P<0.05)。结论:脑梗死患者血浆大颗粒HDL含量明显降低,小颗粒HDL含量明显增加,提示脑梗死患者HDL代谢过程异常。