18srDNA为内参照的Real-Time-PCR方法检测半夏病毒

利用实时荧光PCR方法,以18srRNA为内参照,对半夏植株及相应组培苗携带的黄瓜花叶病毒(Cu-cumber Mosaic Virus,CMV)含量进行了相对定量检测.并以DAS-ELISA和RT-PCR方法检测结果相比较.结果表明,相比原始植株,组培苗的病毒含量大大降低.以带病毒半夏母株为外植体培养的组培苗,其病毒含量以叶片中的相对较高,在块茎和愈伤组织中病毒相对较低.而ELISA方法在检测病毒含量低的样品时有假阴性结果;RT-PCR方法灵敏度可靠但不适宜精确量化.

保定地区一种新辣椒病毒病的鉴定

从保定东郊温室大棚中典型花叶症状的甜椒病株上得到1个病毒分离物（BD），经枯斑二三生烟分离纯化3次后，并保存在茄门甜椒上。通过酶联免疫方法、鉴别寄主反应、电镜观察测定等，确定保定分离物是辣椒轻斑驳病毒（Pepper mild mottle virus，PMMoV）。用Trizol提取病叶总RNA，反转录为cDNA，通过2对特异性引物，分别扩增出病毒外壳蛋白基因片段和与病毒复制相关蛋白基因片段。保定分离物的病毒外壳蛋白基因，与5个PMMoV分离物核甘酸同源性为94．5％～100％，而与3个TMV分离物核苷酸同源性为65．4％～67．7％，从而进一步验证了保定分离物为PMMOV。

北京地区辣椒病毒病发生情况调查

病毒病是辣椒的主要病害之一,严重影响辣椒果实产量和品质。通过对采自北京海淀、昌平和顺义3个地点的45份辣椒叶(果)样品进行双抗体夹心酶联免疫吸附反应(DAS-ELISA)分析,发现这3个地区病毒病的主要病原为BBWV-1,2和CMV,检出率分别为64.4%和60%。其中露地病毒病的主要病原为CMV和BBWV-1,2,检出率均为90.5%;保护地病毒病的主要病原为PMMoV、ToMV和TMV,检出率分别为62.5%、54.2%和54.2%。