双底物酶促反应的热动力学研究

利用微量热方法研究了辣根过氧化物酶(HRP)催化H_2O_2氧化邻苯二胺(OPD)的反应。在298.15K,50mM,pH=7.4的磷酸盐缓冲体系中反应消耗1mol H_2O_2的焓变为227.99kJmol^(-1),而消耗1mol OPD的焓变为439.21kJmol^(-1),HRP对底物H_2O_2的米氏常数K_m(H_2O_2)=2.92mM,对底物OPD的米氏常数K_m(OPD)=0.51mM。

双底物酶促反应动力学机制判别的优化方法

研究双底物酶促反应动力学机制的常用方法是二次作图法.本文针对二次作图法存在的问题提出了一种基于最小二乘拟合的优化算法.该算法利用最小二乘原理对顺序机制和乒乓机制下的双倒数速度方程的常系数进行拟合求解,通过比较两种拟合方程下得到的残差平方和判别酶促反应的动力学机制.通过实例计算证明该优化算法具有可靠性强、计算过程简单的特点,在双底物酶促反应动力学机制判别的准确性方面更具优势.