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双抗体夹心酶联免疫吸附法检测鱼糜制品中鸡蛋卵白蛋白 被引量:3
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作者 朱文嘉 陈江平 +3 位作者 秦智慧 朱文烨 王联珠 李振兴 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2023年第6期190-197,共8页
目的建立双抗体夹心酶联免疫吸附(sandwich enzyme linked immunosorbent assay,sELISA)法检测鸡蛋卵白蛋白(ovalbumin,OVA)的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和... 目的建立双抗体夹心酶联免疫吸附(sandwich enzyme linked immunosorbent assay,sELISA)法检测鸡蛋卵白蛋白(ovalbumin,OVA)的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和检测抗体的最佳工作浓度,建立检测方法并对其性能进行评价。结果反应最佳条件为:抗原孵育20 min,检测抗体孵育20min,酶促反应显色10 min。兔抗OVA抗体为捕获抗体,工作质量浓度为1μg/mL,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)标记兔抗OVA抗体为检测抗体,1:5000(V:V)稀释。采用四参数逻辑曲线拟合标准曲线,所建立sELISA方法的检测范围为8.5~200.0 ng/mL,检出限为3.5 ng/mL,定量限为8.5 ng/mL。批次内和批次间的变异系数分别为2.31%~4.58%和6.06%~12.23%;鱼糜基质中的回收率为80%~130%;测得28种常见食物样品中4种样品的交叉反应率小于0.002%;试剂盒在4℃保存6个月期间,标准品检测结果的变异系数为4.29%~18.91%。结论建立的方法快速、灵敏、准确、稳定性好,可用于鱼糜制品中鸡蛋OVA的定量检测。 展开更多
关键词 鸡蛋 卵白蛋白 双抗体夹心酶联免疫吸附法 鱼糜制品
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犬粪便棘球绦虫抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测法建立与应用 被引量:22
2
作者 黄燕 Heath D David +2 位作者 Antone J Christine 邱加闽 王谦 《预防医学情报杂志》 CAS 2008年第6期407-411,共5页
目的研究双抗体夹心酶联免疫吸附检测犬粪便棘球绦虫虫体抗原的方法并评价其在实际工作中的应用价值。方法实验犬12只,分实验组和对照组,实验组用活化绵羊源原头蚴(G1型)作人工感染;感染后0~8周内收集粪便,56d宰杀实验犬,收集... 目的研究双抗体夹心酶联免疫吸附检测犬粪便棘球绦虫虫体抗原的方法并评价其在实际工作中的应用价值。方法实验犬12只,分实验组和对照组,实验组用活化绵羊源原头蚴(G1型)作人工感染;感染后0~8周内收集粪便,56d宰杀实验犬,收集成虫;制备成虫抗原和虫体代谢/分泌抗原,蛋白酶K处理抗原并分别免疫成年绵羊和新西兰白兔;绵羊抗血清用80%饱和硫酸铵沉淀、透析,兔抗血清过IgG亲和层析柱,分别获得纯化抗体;观察犬粪便在PBS液中-80℃冷冻3d或在含1%Formalin的PBS液中70℃~80℃加热8h的处理方法对检出结果的影响。运用该方法对四川省甘孜县达通玛区4个乡的580只家犬吡喹酮每6月一次驱虫前后的粪抗原进行监测。结果试验系统的敏感性为92.3%,特异性为80%;粪抗原从感染后的第2~3周可检出;两种样品处理方法都可以灭活虫卵但不影响检出效果;检测方法可同时用于对细粒棘球绦虫和多房棘球绦虫感染的诊断;达通玛区家犬粪抗原阳性率从2000年的50%下降到2005年的17%。结论检测方法具有较高的特异性和敏感性;推荐粪便用加热的方法处理可以灭活虫卵以防止生物污染;该方法可以在基层推广应用。 展开更多
关键词 棘球属 粪抗原 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 诊断 控制
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双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测布氏菌抗原的实验研究 被引量:2
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作者 赵鸿雁 鲁齐发 《中国地方病防治》 2004年第3期151-153,共3页
目的 建立检测布氏菌抗原特异、敏感和快速的试验方法。方法 在制备高滴度布氏菌抗体辣根过氧化物酶结合物及其冻干制品基础上 ,建立检测布氏菌抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (DAbS -ELISA) ,包括常规DAbS -ELISA及快速DAbS -ELIS... 目的 建立检测布氏菌抗原特异、敏感和快速的试验方法。方法 在制备高滴度布氏菌抗体辣根过氧化物酶结合物及其冻干制品基础上 ,建立检测布氏菌抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (DAbS -ELISA) ,包括常规DAbS -ELISA及快速DAbS -ELISA。用建立的两种DAbS -ELISA法对布氏菌菌体抗原及可溶性抗原进行有关其特异性及敏感性对比观察 ;同时对模拟的这些抗原污染的饮用水标本进行对比观察。结果 常规DAbS -ELISA检测布氏菌 5 44A、16M、13 3OS及 10 4M的菌体抗原以及布氏菌 16M可溶性抗原的敏感性分别为 0 .2 2万菌 /ml、12 0万菌 /ml、190万菌 /ml、2万菌 /ml和 0 .0 12 μg/ml ;用快速DAbS -ELISA法的敏感性分别为 2 2万菌 /ml、12 0万菌 /ml、190 0万菌 /ml、2 0万菌 /ml和 1.2 μg/ml;同时用这两种DAbS -ELISA检测上述抗原污染的饮用水标本其敏感性分别为 0 .2 2万菌 /ml、190 0万菌 /ml、2 0万菌 /ml和 0 .0 12 μg/ml ;以及 2 2万菌 /ml、12 0万菌 /ml、190 0万菌 /ml、2 0 0万菌 /ml和 1.2 μg/ml。而且这两种DAbS -ELISA法检测不含布氏菌抗原的所有对照均为阴性反应。结论 双抗体夹心酶联免疫吸附试验是检测布氏菌抗原的特异、敏感、快速和适用的试验方法。 展开更多
关键词 布氏菌 可溶性抗原 DA 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 ELISA法 敏感性 对比观察 ELISA检测 菌体抗原 高滴度
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甜菜丛根病的双抗体夹心酶联免疫吸附测定 被引量:1
4
作者 王皙玮 吴玉梅 马龙彪 《中国糖料》 2009年第3期30-31,共2页
对甜菜丛根病毒采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(Double antibody sandwich assay,DAS-ELISA)法进行了检测,并对测定方法及检测结果进行了分析讨论。
关键词 甜菜丛根病 甜菜坏死黄脉病毒(BNYVV) 双抗体夹心酶联免疫吸附(DAS-ELISA)
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双抗体夹心酶联免疫吸附法检测杏仁过敏原苦杏仁球蛋白 被引量:8
5
作者 张洁琼 高淑霞 +2 位作者 生威 张燕 王硕 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第16期173-177,共5页
提取中国甜杏仁过敏原蛋白苦杏仁球蛋白,分别制备兔和鼠多克隆抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法。结果表明:对甜杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限为(6.36±1.02)μg/L;对中国苦杏仁及美国大杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限分别为(12... 提取中国甜杏仁过敏原蛋白苦杏仁球蛋白,分别制备兔和鼠多克隆抗体,建立双抗体夹心酶联免疫吸附(ELISA)法。结果表明:对甜杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限为(6.36±1.02)μg/L;对中国苦杏仁及美国大杏仁中苦杏仁球蛋白的检测限分别为(12.11±1.70)μg/L和(18.95±1.52)μg/L,且与常见的14种植物性蛋白没有交叉反应,表明该方法具有良好的特异性。将该方法用于法式小面包、饼干和脱脂牛乳中杏仁过敏原的检测,苦杏仁球蛋白的添加回收率为78.94%~125.15%,且相对标准偏差均低于5.81%。 展开更多
关键词 杏仁 苦杏仁球蛋白 双抗体夹心酶联免疫吸附分析法
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单克隆抗体JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验用于血吸虫病疗效考核的探讨 被引量:2
6
作者 尹东 陈红根 +4 位作者 许雪萍 衣方誉 姜唯声 曾小军 王腊梅 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第8期726-726,678,共2页
关键词 单克隆抗体 JPG3双抗体夹心酶联免疫吸附试验 血吸虫病 疗效观察
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改良双抗体夹心酶联免疫法测定重组人活性蛋白C含量的研究 被引量:3
7
作者 李征 毕跃东 《微生物学免疫学进展》 2006年第4期48-51,共4页
研究用ELISA法直接定量检测细胞培养液中的重组人活性蛋白C(rhAPC)。用改良双抗体夹心酶联免疫检测法进行定量分析。用棋盘滴定法对包被抗体、反应一抗和辣根过氧化物酶(HRP)标记二抗的适宜工作浓度进行了选择,并对实验条件进行优化,参... 研究用ELISA法直接定量检测细胞培养液中的重组人活性蛋白C(rhAPC)。用改良双抗体夹心酶联免疫检测法进行定量分析。用棋盘滴定法对包被抗体、反应一抗和辣根过氧化物酶(HRP)标记二抗的适宜工作浓度进行了选择,并对实验条件进行优化,参考品标准曲线线性相关性较好。改良双抗体夹心酶联免疫检测法可用于直接定量分析细胞培养液中的rhAPC水平。 展开更多
关键词 改良双抗体夹心酶联免疫 重组人活性蛋白C 定量分析
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双抗体夹心酶联免疫吸附法检测IgG_0的研究及应用 被引量:9
8
作者 张彦 范成明 +3 位作者 张晓萍 张文利 燕秋 朱正美 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期363-364,共2页
关键词 双抗体夹心酶联免疫吸附法 检测 IgG0 研究 应用
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双抗体夹心酶联免疫吸附实验检测诺如病毒 被引量:3
9
作者 郭丽 周红莉 +5 位作者 田蓉 江涛 屈建国 计融 王健伟 洪涛 《中华预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期361-363,共3页
诺如病毒属于杯状病毒科,是引起急性非细菌性胃肠炎的主要病原,广泛分布于世界各地。虽然诺如病毒胃肠炎是温和的、自限性的疾病,但是它发病率高,感染广泛,导致住院和死亡人数的增加。危害人类的诺如病毒可分为GGI和GGII两个遗传组... 诺如病毒属于杯状病毒科,是引起急性非细菌性胃肠炎的主要病原,广泛分布于世界各地。虽然诺如病毒胃肠炎是温和的、自限性的疾病,但是它发病率高,感染广泛,导致住院和死亡人数的增加。危害人类的诺如病毒可分为GGI和GGII两个遗传组(genogroup),近来的研究表明,GGI和GGII至少分别由14和17个遗传型(genotype)组成。目前全世界范围内流行的诺如病毒毒株绝大部分是GGII组,GGI在我国很少见,因此,GGII组应为诺如病毒的主要防控对象。 展开更多
关键词 双抗体夹心酶联免疫吸附 诺如病毒 实验检测 急性非细菌性胃肠炎 世界范围 杯状病毒科 死亡人数 自限性
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双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测粉尘螨2组变应原方法的建立 被引量:1
10
作者 练玉银 刘志刚 +2 位作者 吉坤美 王广伟 刘晓宇 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期702-703,共2页
尘螨是最常见、最主要的过敏性疾病变应原。螨体中最主要的致敏成分是1组和2组变应原(Der1、Der2)。酶联免疫吸附测定(ELISA)是检测尘螨变应原含量应用最广泛的方法.但国内定量检测尘螨变应原的方法学研究鲜见报道。本研究用重组... 尘螨是最常见、最主要的过敏性疾病变应原。螨体中最主要的致敏成分是1组和2组变应原(Der1、Der2)。酶联免疫吸附测定(ELISA)是检测尘螨变应原含量应用最广泛的方法.但国内定量检测尘螨变应原的方法学研究鲜见报道。本研究用重组粉尘螨2组Der f 2(rDer f 2).制备免疫血清,建立一种以辣根过氧化物酶系统为基础的双抗体夹心ELISA,以快速检测Der f2.现报告如下。 展开更多
关键词 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 螨变应原 定量检测 粉尘螨 抗体夹心ELISA 免疫吸附测定 过氧化物系统 原方
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精浆内前列腺素D合成酶双抗体夹心酶联免疫吸附法的建立及其应用 被引量:1
11
作者 陈德宇 朱国华 黄宇烽 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期295-296,共2页
关键词 精浆 双抗体夹心酶联免疫吸附法 前列腺素D合成 男性不育 患者 小鼠 ELISA 表达差异 真核表达 转运
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双抗体夹心酶联免疫吸附法测定人干扰素α-2b在豚鼠体液中的含量 被引量:1
12
作者 丁静 陆春燕 +3 位作者 陈钢 牧磊 臧林泉 王来友 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期1455-1458,共4页
目的:建立双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)快速测定豚鼠体液中人干扰素α-2b的浓度,为其新制剂的体内研究奠定基础。方法:对双抗体夹心ELISA法用于豚鼠内耳外淋巴液、脑脊液和血清中人干扰素α-2b浓度的测定进行了方法学考察;豚鼠... 目的:建立双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)快速测定豚鼠体液中人干扰素α-2b的浓度,为其新制剂的体内研究奠定基础。方法:对双抗体夹心ELISA法用于豚鼠内耳外淋巴液、脑脊液和血清中人干扰素α-2b浓度的测定进行了方法学考察;豚鼠静脉注射人干扰素α-2b后采集各体液,采用该法测定其中药物浓度。结果:该法在31.25-1 000 pg.mL-1内线性关系良好,板内精密度小于7.8%,板间精密度小于11.9%,各体液中的药物回收率为91%-111%。静脉给药后,药物在内耳外淋巴液和脑脊液中的浓度远远低于血清。结论:该法简单、快捷、灵敏,适用于人干扰素α-2b在豚鼠体内的含量测定及药动学研究。 展开更多
关键词 人干扰素Α-2B 双抗体夹心酶联免疫吸附法 外淋巴液 脑脊液 血清
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酶联免疫双抗体夹心法检测牛初乳素中免疫球蛋白IgG 被引量:14
13
作者 项新华 尹香君 +1 位作者 赵丹慧 李成文 《中国卫生检验杂志》 CAS 2002年第2期137-138,共2页
〔目的〕建立检测牛初乳素为原料的保健食品中免疫球蛋白IgG的常用酶联免疫双抗体夹心法。〔方法〕分离纯化小牛血清中IgG,以牛IgG免疫新西兰兔,获得抗牛IgG的血清,分离纯化,制备兔抗牛IgG。〔结果〕1000ng/孔兔抗牛IgG饮被酶联板,3倍... 〔目的〕建立检测牛初乳素为原料的保健食品中免疫球蛋白IgG的常用酶联免疫双抗体夹心法。〔方法〕分离纯化小牛血清中IgG,以牛IgG免疫新西兰兔,获得抗牛IgG的血清,分离纯化,制备兔抗牛IgG。〔结果〕1000ng/孔兔抗牛IgG饮被酶联板,3倍比稀释牛IgG,夹心法检测。〔结果〕在牛IgG0.031mg/ml-2.50mg/ml范围,浓度与吸光度值线性相关,方程为:y=0.358+0.767x,相关系数为r=0.995,当添加50mmIgG时,回收率为88.4%,变异系数为6.1%。〔结论〕该方法具有特异性强、快速、灵敏和分析成本低等特点。 展开更多
关键词 牛初乳素 IGG 免疫抗体夹心 兔抗牛IgG
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双抗体夹心酶联免疫吸附试验法在肺结核患者血清HMGB1水平检测中的应用 被引量:5
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作者 谭斌 肖红云 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第15期2223-2224,2231,共3页
目的应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺结核患者抗结核治疗前后血高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平变化研究,以探讨其临床诊断意义。方法采用ELISA法检测患者血清HMGB1的水平,同时测定活动组患者在抗结核治疗前、治疗后1个月、治疗... 目的应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺结核患者抗结核治疗前后血高迁移率族蛋白1(HMGB1)水平变化研究,以探讨其临床诊断意义。方法采用ELISA法检测患者血清HMGB1的水平,同时测定活动组患者在抗结核治疗前、治疗后1个月、治疗后3个月及30例好转组的血清HMGB1水平。结果活动组患者比对照组、稳定组的血清HMGB1浓度水平升高,差异具有统计学意义(P<0.05),稳定组患者比对照组的血清HMGB1浓度水平升高,但差异无统计学意义(P>0.05);治疗后1个月、治疗后3个月的血清HMGB1浓度水平比治疗前均有所降低,差异无统计学意义(P>0.05),但其中治疗3个月后有30例活动性肺结核患者病情好转(好转组)比治疗前显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论动态监测肺结核患者血清HMGB1水平,对活动性肺结核的辅助诊断及疗效观察有重要意义。 展开更多
关键词 双抗体夹心酶联免疫吸附试验法 肺结核 活动性 高迁移率族蛋白1
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鸭血管紧张素转换酶2(ACE2)双抗体夹心ELISA检测方法的建立与应用
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作者 陈雨涛 纪晓霞 +2 位作者 李帅 伍钢 张源淑 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2023年第1期75-85,共11页
为建立鸭血管紧张素转换酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2)双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)定量检测方法,首先利用纯化的鸭ACE2重组蛋白,成功制备了兔抗鸭ACE2多克隆抗体,间接ELISA... 为建立鸭血管紧张素转换酶2 (angiotensin converting enzyme 2, ACE2)双抗体夹心酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)定量检测方法,首先利用纯化的鸭ACE2重组蛋白,成功制备了兔抗鸭ACE2多克隆抗体,间接ELISA法确定抗体效价为1∶800;然后利用制备的鼠抗鸭ACE2多克隆抗体作为捕获抗体,通过戊二醛二步法对兔抗鸭ACE2多克隆抗体进行HRP标记,并将HRP标记的兔抗鸭ACE2多克隆抗体作为检测抗体,纯化获得的鸭ACE2重组蛋白作为标准品,建立鸭ACE2双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对抗体浓度、捕获抗体最适包被条件、孵育条件、封闭条件及显色条件等进行优化;通过Western blot法检测正常白鸭与患传染性浆膜炎的病鸭不同组织间ACE2表达的变化;利用RT-qPCR方法检测正常鸭与患传染性浆膜炎的病鸭不同组织中ACE2基因的相对表达量。结果表明:所建立的双抗体夹心ELISA方法最低检测浓度为5 ng·mL^(-1),最佳线性范围为25~1 600 ng·mL^(-1),批内变异系数为1.65%~5.62%,批间变异系数为3.66%~6.81%,可检测出麻鸭各组织中ACE2含量。传染性浆膜炎组白鸭以及健康鸭心脏、肝脏等组织样品ACE2含量或表达存在差异,心脏组织中显著升高或上调;鸭传染性浆膜炎组心脏中ACE2 mRNA水平显著上调,肝脏组织中ACE2 mRNA水平升高不明显。采用该ELISA方法对不同畜(大鼠、猪、羊)、禽(鸭、鸡、鹅)的不同组织中ACE2进行了定量测定,证实该方法在不同畜禽上存在较大种属差异,仅适用于家禽ACE2的定量检测。综上,该研究成功建立了鸭ACE2检测的双抗体夹心ELISA方法,可用于禽类样品中ACE2的快速定量检测。 展开更多
关键词 血管紧张素转换2(ACE2) 抗体制备 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 定量检测
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白色念珠菌烯醇化酶抗原双抗体夹心法的建立及应用
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作者 赵会海 贺政新 +4 位作者 李芳 高鹏 王佳钰 王芳芳 秦立霞 《海南医学》 CAS 2023年第24期3600-3603,共4页
目的建立定量检测白色念珠菌烯醇化酶抗原的双抗体夹心法,为后续定量检测念珠菌性阴道炎患者阴道分泌物中的烯醇化酶抗原提供方法学基础。方法用方阵滴定法确定最佳包被抗体浓度和最佳酶标二抗浓度,建立检测白色念珠菌烯醇化酶抗原的EL... 目的建立定量检测白色念珠菌烯醇化酶抗原的双抗体夹心法,为后续定量检测念珠菌性阴道炎患者阴道分泌物中的烯醇化酶抗原提供方法学基础。方法用方阵滴定法确定最佳包被抗体浓度和最佳酶标二抗浓度,建立检测白色念珠菌烯醇化酶抗原的ELISA法,用该法检测白色念珠菌标准菌株SC5314培养上清中烯醇化酶抗原的浓度,初步探索应用于诊断外阴阴道念珠菌病。结果最佳包被抗Eno单抗浓度为4.15μg/mL;酶标二抗HRP标记的抗烯醇化酶多抗最佳稀释倍数为1∶1000。在第12小时时白色念珠菌培养上清中的烯醇化酶抗原开始检出,随着培养时间的延长,其上清中Eno抗原的浓度也随着逐渐增高,第48小时时达到峰值后趋于稳定。阴道分泌物上清中烯醇化酶抗原浓度随着真菌培养菌落计数的增加其浓度也在增加,有很好的相关性。结论成功建立了定量检测白色念珠菌烯醇化酶抗原的双抗体夹心ELISA方法,可应用于评价念珠菌性阴道炎患者阴道分泌物中的烯醇化酶抗原的水平。 展开更多
关键词 念珠菌性阴道炎 白色念珠菌 烯醇化 双抗体夹心酶联免疫吸附试验
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人C-反应蛋白磁微粒化学发光酶免疫测定法的建立
17
作者 罗梦洁 肖铎 +5 位作者 曾璇 谭楚帆 徐叶 钟志宏 刘如石 郑姣 《生命科学研究》 CAS 2024年第2期135-142,151,共9页
人C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标。为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法,将表达纯化的重组CRP作为抗原免疫小鼠,获得了5株稳定分泌抗体... 人C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)是炎症以及各种相关疾病如病毒感染、心血管疾病等诊断、治疗和预后的临床检测指标。为了建立一种快速、准确的CRP定量免疫测定方法,将表达纯化的重组CRP作为抗原免疫小鼠,获得了5株稳定分泌抗体的单克隆抗体细胞株,采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA)初步鉴定筛选的抗人CRP单克隆抗体,并分别选择mAb 9D6和mAb 9G4作为捕获抗体与检测抗体,建立用于人CRP检测的化学发光酶免疫测定法(chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA),最后通过测定分析临床血清CRP样本,评价CLEIA的性能。结果显示,基于9D6/9G4-AP单克隆抗体对的CLEIA测定范围为0.1767~500μg/L(可扩展至100 mg/L);所建立的CLEIA与医院采用的免疫散射比浊法(R^(2):0.9496,P<0.0001)表现出良好的相关性,且Bland-Altman分析中96.36%(106/110)的点在95%一致性界限范围内显示两种检测方法具有较好的一致性。结果初步表明,建立的分析方法在临床诊断中具有较好的应用前景。 展开更多
关键词 C-反应蛋白(CRP) 单克隆抗体(mAb) 双抗体夹心酶联免疫吸附测定法(DAS-ELISA) 化学发光免疫测定法(CLEIA)
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黄瓜绿斑驳花叶病毒病快速检测法与酶联免疫双抗体夹心检测法的比较及其在生产上的应用
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作者 蔡美艳 叶建人 李程巧 《农业科技通讯》 2017年第10期144-147,共4页
采用快速检测法(浙江大学和安德珍各自生产的试剂盒)和酶联免疫双抗体夹心法对棚栽嫁接西瓜疑似感病植株叶片和显症植株叶片进行黄瓜绿斑驳花叶病毒检测,结果发现,疑似感病叶片中,阳性率:DAS-ELISA法86.36%>浙大快速检测法59.09%>... 采用快速检测法(浙江大学和安德珍各自生产的试剂盒)和酶联免疫双抗体夹心法对棚栽嫁接西瓜疑似感病植株叶片和显症植株叶片进行黄瓜绿斑驳花叶病毒检测,结果发现,疑似感病叶片中,阳性率:DAS-ELISA法86.36%>浙大快速检测法59.09%>安德珍快速检测法34.09%,DASELISA法与快速检测法之间的阳性率差异极显著(χ~2=25.03,P<0.01),与浙大快速检测法符合率72.72%,与安德珍快速检测法符合率为47.72%,2家快速检测法之间的阳性率有显著性差异(χ~2=4.57,P<0.05);显症病叶中,阳性检出率浙大快速检测法高于安德珍快速检测法,当样品在冰箱中保存后,快速检测法的阳性检出率会下降,影响检测结果。 展开更多
关键词 黄瓜绿斑驳花叶病毒 快速检测法 免疫抗体夹心 比较 应用
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白念珠菌烯醇化酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立 被引量:4
19
作者 胡毓安 李芳秋 +1 位作者 马春芳 年娜 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期565-567,574,共4页
目的建立检测白念珠菌烯醇化酶(enolase,Eno)的双抗体夹心ELISA法,并试用于几种真菌培养上清液的检测。方法将抗白念珠菌Eno单抗作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗Eno抗体作为检测抗体,用方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体浓度,建... 目的建立检测白念珠菌烯醇化酶(enolase,Eno)的双抗体夹心ELISA法,并试用于几种真菌培养上清液的检测。方法将抗白念珠菌Eno单抗作为包被抗体,辣根过氧化物酶标记的羊抗Eno抗体作为检测抗体,用方阵滴定法确定包被抗体和酶标抗体浓度,建立检测Eno的ELISA法,对方法的精密度、特异性、最低检测限等指标进行评价。用该法检测白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、新生隐球菌和酿酒酵母等不同真菌培养上清中Eno水平。结果 Eno浓度为20 ng/mL和5 ng/mL时,批内和批间变异系数(CV)分别为6.61%、9.19%和6.98%、13.81%;最低检测限为1.25ng/mL。本法可从白念珠菌37℃培养24 h后的上清中检出Eno,Eno含量与白念珠菌菌丝含量呈正相关。本法对近平滑念珠菌有微弱交叉反应,与热带念珠菌、光滑念珠菌、季也蒙念珠菌、新生隐球菌和酿酒酵母均无交叉反应。结论建立的检测白念珠菌Eno的双抗体夹心ELISA方法有较好的特异性,可用于评价Eno检测在侵袭性白念珠菌感染中的诊断价值。 展开更多
关键词 侵袭性念珠菌病 白念珠菌 烯醇化 双抗体夹心酶联免疫吸附试验
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双抗体夹心斑点金免疫渗滤法检测血吸虫循环抗原的现场应用 被引量:2
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作者 张素娥 汤益 +1 位作者 施晓华 蒋健敏 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2002年第1期44-45,共2页
目的 探讨双抗体夹心斑点金免疫渗滤法 (S- DIGFA)在现场的应用价值。方法 在原已建立的以抗 2 6 k Da GST基因重组蛋白多克隆抗体为捕获抗体兼测示抗体的 S- DIGFA的基础上 ,应用该法检测血吸虫病中度流行区和传播阻断地区人群的血清... 目的 探讨双抗体夹心斑点金免疫渗滤法 (S- DIGFA)在现场的应用价值。方法 在原已建立的以抗 2 6 k Da GST基因重组蛋白多克隆抗体为捕获抗体兼测示抗体的 S- DIGFA的基础上 ,应用该法检测血吸虫病中度流行区和传播阻断地区人群的血清共 1388份 ,并以双抗体夹心EL ISA(S- EL ISA)作对照。结果 用 S- DIGFA和 S- EL ISA平行检测血吸虫病中度流行区人群血清30 0份 ,阳性检出率分别为 15 .7%和 17.3% ;两法检测血吸虫病传播阻断地区人群血清 10 88份 ,阳性检出率分别为 3.9%和 3.7%。结论  S- DIGFA检测循环抗原可在现场扩大应用和作血清流行病学调查。 展开更多
关键词 26kDaGST 抗体夹心斑点金免疫渗滤法 双抗体夹心酶联免疫吸附试验 日本血吸虫 循环抗原
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