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抗心磷脂抗体IgG和IgM双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立和应用
1
作者
盛慧明
曹雅楠
+2 位作者
孙兵
薛一峰
胡志刚
《上海医学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期970-974,共5页
目的 评价新建立的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA法)检测抗心磷脂抗体(ACA)IgG和IgM的临床应用价值。方法 以心磷脂抗原(含β2糖蛋白Ⅰ段)包板,以稀土元素铕离子(Eu3+)和钐离子(Sm3+)分别标记抗人IgG抗体和抗人IgM抗...
目的 评价新建立的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA法)检测抗心磷脂抗体(ACA)IgG和IgM的临床应用价值。方法 以心磷脂抗原(含β2糖蛋白Ⅰ段)包板,以稀土元素铕离子(Eu3+)和钐离子(Sm3+)分别标记抗人IgG抗体和抗人IgM抗体建立双标记TRFIA法。收集510例自身免疫性疾病患者(硬皮病24例、肾病综合征36例、强直性脊柱炎16例、脑梗死117例、狼疮性肾炎33例、干燥综合征63例、系统性红斑狼疮153例、类风湿关节炎70例)和50名健康献血者的血清标本,采用双标记TRFIA法测定ACA-IgG型抗体和ACA-IgM型抗体的临床阳性率和特异度。评估双标记TRFIA法检测高、中、低值样本的精密度。将3份已知浓度血清标本作倍比稀释,计算ACA-IgM型抗体和ACA-IgM型抗体的回收率。与酶联免疫吸附试验(ELISA法)的结果进行比对,分析双标记TRFIA法与ELISA法检测结果的一致性和稳定性等。结果 双标记TRFIA法检测ACA-IgG型抗体和ACA-IgM型抗体标准曲线的R2值分别为0.999、0.993,荧光强度值与样本浓度呈线性相关。ACA-IgM型抗体高、中、低3个浓度的批内变异系数(CV)分别为1.31%、2.82%、4.14%,批间CV分别为2.29%、4.08%、6.97%;ACA-IgG型抗体高、中、低3个浓度的批内CV分别为1.21%、3.18%、4.61%,批间CV分别为2.26%、3.93%、7.34%。双标记TRFIA法检测ACA-IgM型抗体和ACA-IgG型抗体的灵敏度均为0.1U/mL,特异度均为98.00%(49/50)。ACA-IgG型抗体回收率为95.11%~106.14%,ACA-IgM型抗体回收率为96.04%~106.54%。硬皮病、肾病综合征、强直性脊柱炎、脑梗死、狼疮性肾炎、干燥综合征、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎患者ACA-IgG型抗体阳性率依次为16.67%、2.78%、7.14%、3.42%、15.15%、4.76%、7.84%、8.57%,ACA-IgM型抗体阳性率依次为4.17%、11.11%、14.29%、3.42%、27.27%、3.17%、8.50%、10.00%。双标记TRFIA法检测ACA-IgM型抗体和ACA-IgG型抗体的结果与ELISA法均呈正相关(R2值分别为0.928、0.924,P值均〈0.05)。双标记TRFIA法检测ACA-IgM型抗体和ACA-IgG型抗体的荧光强度值分别下降14.7%和15.8%,ELISA法检测ACA-IgM型抗体和ACA-IgG型抗体的光密度值分别下降37.6%和33.9%。结论 双标记TRFIA法同时检测ACA-IgG型抗体和ACAIgM型抗体具有效率高、灵敏度高、特异性强、检测范围宽和稳定的优点,其临床应用价值高,应用前景广阔。
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关键词
抗心磷脂抗体
双标记免疫检测
时间分辨荧光
免疫
分析法
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职称材料
题名
抗心磷脂抗体IgG和IgM双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立和应用
1
作者
盛慧明
曹雅楠
孙兵
薛一峰
胡志刚
机构
上海交通大学附属同仁医院检验科
中国人民解放军第
南京医科大学附属无锡市人民医院检验科
出处
《上海医学》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期970-974,共5页
基金
国家十一五科技支撑计划子课题(2008BAI59B02)
无锡市科技局指令性科研项目(CSE01010)资助
文摘
目的 评价新建立的双标记时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA法)检测抗心磷脂抗体(ACA)IgG和IgM的临床应用价值。方法 以心磷脂抗原(含β2糖蛋白Ⅰ段)包板,以稀土元素铕离子(Eu3+)和钐离子(Sm3+)分别标记抗人IgG抗体和抗人IgM抗体建立双标记TRFIA法。收集510例自身免疫性疾病患者(硬皮病24例、肾病综合征36例、强直性脊柱炎16例、脑梗死117例、狼疮性肾炎33例、干燥综合征63例、系统性红斑狼疮153例、类风湿关节炎70例)和50名健康献血者的血清标本,采用双标记TRFIA法测定ACA-IgG型抗体和ACA-IgM型抗体的临床阳性率和特异度。评估双标记TRFIA法检测高、中、低值样本的精密度。将3份已知浓度血清标本作倍比稀释,计算ACA-IgM型抗体和ACA-IgM型抗体的回收率。与酶联免疫吸附试验(ELISA法)的结果进行比对,分析双标记TRFIA法与ELISA法检测结果的一致性和稳定性等。结果 双标记TRFIA法检测ACA-IgG型抗体和ACA-IgM型抗体标准曲线的R2值分别为0.999、0.993,荧光强度值与样本浓度呈线性相关。ACA-IgM型抗体高、中、低3个浓度的批内变异系数(CV)分别为1.31%、2.82%、4.14%,批间CV分别为2.29%、4.08%、6.97%;ACA-IgG型抗体高、中、低3个浓度的批内CV分别为1.21%、3.18%、4.61%,批间CV分别为2.26%、3.93%、7.34%。双标记TRFIA法检测ACA-IgM型抗体和ACA-IgG型抗体的灵敏度均为0.1U/mL,特异度均为98.00%(49/50)。ACA-IgG型抗体回收率为95.11%~106.14%,ACA-IgM型抗体回收率为96.04%~106.54%。硬皮病、肾病综合征、强直性脊柱炎、脑梗死、狼疮性肾炎、干燥综合征、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎患者ACA-IgG型抗体阳性率依次为16.67%、2.78%、7.14%、3.42%、15.15%、4.76%、7.84%、8.57%,ACA-IgM型抗体阳性率依次为4.17%、11.11%、14.29%、3.42%、27.27%、3.17%、8.50%、10.00%。双标记TRFIA法检测ACA-IgM型抗体和ACA-IgG型抗体的结果与ELISA法均呈正相关(R2值分别为0.928、0.924,P值均〈0.05)。双标记TRFIA法检测ACA-IgM型抗体和ACA-IgG型抗体的荧光强度值分别下降14.7%和15.8%,ELISA法检测ACA-IgM型抗体和ACA-IgG型抗体的光密度值分别下降37.6%和33.9%。结论 双标记TRFIA法同时检测ACA-IgG型抗体和ACAIgM型抗体具有效率高、灵敏度高、特异性强、检测范围宽和稳定的优点,其临床应用价值高,应用前景广阔。
关键词
抗心磷脂抗体
双标记免疫检测
时间分辨荧光
免疫
分析法
Keywords
Anticardiolipid antibody
Dual-labeled immunoassay
Time-resolved fluorescenceimmunoassay
分类号
R446.6 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗心磷脂抗体IgG和IgM双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立和应用
盛慧明
曹雅楠
孙兵
薛一峰
胡志刚
《上海医学》
CAS
CSCD
北大核心
2014
0
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