免疫组化双酶双标记和组织化学复合染色方法的探讨

免疫组化双酶双标记和组织化学复合染色方法的探讨赵秀兰，孙保存，林建韶，王欣，李薇，谭郁彬随着免疫组化技术的发展，已有可能在同一张切片上标记出不同的细胞成分，若与组织化学染色相结合，则可显示更多的细胞成分，为同时观察几种细胞的分布特点、相互关系提供了新...

骨髓标本中免疫组织化学及DNA原位末端标记双重染色技术的应用

为扩展免疫酶标记分子病理学技术在血液病基础与临床研究中的应用 ,我们探索了碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化和 DNA原位末端标记 (ISEL)技术在骨髓涂片和切片 (乙二醇甲基丙烯酸酯 GMA冷包埋 )中联合应用 (双重染色 )的方法 ,结果令人满意。

大鼠颌下腺GnRH及其受体的免疫组织化学双标记和年龄变化

用免疫组织化学法，以邻片双标记技术研究了大鼠颌下腺内ＧｎＲＨ及ＧｎＲＨ受体的分布；并对不同发育阶段大鼠颌下腺内ＧｎＲＨ及其受体进行了原位定量分析。结果表明，雄性成年大鼠颌下腺浆液性腺泡的腺上皮细胞及各级导管上皮细胞既呈ＧｎＲＨ又呈ＧｎＲＨ受体免疫反应性。６０ｄ龄内，大鼠颌下腺的ＧｎＲＨ及其受体的含量随年龄的增长而增多，６０ｄ龄～９０ｄ龄，其含量相对恒定。以上结果提示，ＧｎＲＨ可能以自分泌的方式参与了颌下腺的发育成熟过程及分泌功能的调节。

免疫组织化学双标记结合激光显微切割技术在霍奇金淋巴瘤诊断中的应用

目的探讨IHC双标记技术结合LCM技术在研究HL肿瘤细胞与背景细胞中的应用。方法选取10例HL标本,10%中性福尔马林固定,石蜡包埋组织,采用不同的抗原修复方法,通过IHC双标记与LCM技术获得单一的肿瘤细胞和背景细胞。结果在10例HL标本中通过IHC双标记与LCM技术获得单一的肿瘤细胞和背景细胞,二者表现出不同的颜色以及表达不同的CD分子。结论通过IHC双标记与LCM技术获得单一的肿瘤细胞和背景细胞,IHC双标记在HL研究中起着区分不同细胞的作用。

CD34与D2-40双重免疫组织化学染色技术在鉴别血管与淋巴管中的应用

在恶性肿瘤中,血管和淋巴管转移是肿瘤转移的重要途径,并且肿瘤的转移与患者的预后密切相关。苏木素-伊红(HE)染色中,区别淋巴管和血管非常困难。

免疫组织化学与特殊染色双染方法介绍

免疫组织化学作为病理诊断的常规辅助手段,其操作愈来愈规范,技术日渐成熟.特殊染色技术是除了HE染色技术之外最基本的病理技术,为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病原体等,需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行染色.

EnVision与特异性抗体的一步法免疫组织化学标记

探讨 En Vision与特异性抗体复合一步法免疫组织化学标记的可行性及其应用效果 ,筛选适合用于该法的特异性抗体。利用辣根过氧化物酶标记的第二抗体 (En Vision)分别与 72种单克隆和多克隆特异性抗体混合配制成即用型试剂 ,将两步标记法变为快速微波一步法 ,并对 2 10 0余例各种良性和恶性肿瘤的免疫组化标记结果进行观察和分析。结果显示绝大部分特异性抗体的特异性和敏感性与标准 En Vision法相似 ,其中 46种特异性抗体结果稳定 ,重复性佳 ;14种特异性抗体稳定性欠佳 ,但临用前新配制效果仍较理想 ;12种不理想 ,不主张用于此法。结果表明 En Vision与特异性抗体复合免疫组化一步法是一种有效、快速、简便的免疫组化染色技术 ,适用于临床病理快速免疫组化诊断 ,但对所用的特异性抗体应注意选择。

PowerVision法与SABC法在免疫组织化学染色中的比较

目的 探讨免疫组织化学染色中常用的PowerVision二步法与SABC三步法各自的适用性。方法 取大鼠的胃体组织 ,分别应用PowerVision二步法与SABC三步法进行 12种抗体免疫组化染色。结果 PowerVision二步法对其中 6种抗体的显示优于SABC法 ,对 3种抗体的显示不及SABC法 ;而 2种方法对其中 3种抗体的显示无差别。结论 2种方法对不同抗体的显示有差别。

光波-微波-硝酸快速脱钙技术对骨组织免疫组织化学染色的影响

目的:探讨光波微波硝酸快速脱钙技术对骨及软组织抗原活性的影响。方法:用8%硝酸分别在单纯微波、单纯光波、光波微波组合Ⅰ和光波微波组合Ⅱ条件下脱钙,同时以室温脱钙作为对照;应用标记的链霉菌素卵白素生物素(LSAB)免疫组织化学(免疫组化)染色技术检测不同脱钙条件下心钠素(ANP)、5羟色胺(5HT)、S100、神经微丝蛋白(NF)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)和波形蛋白(Vimentin)的表达,并对其染色结果进行图像分析和统计学处理。结果:8%硝酸室温脱钙时间最长,光波微波组合脱钙时间最短;微波组、光波组、光波微波组合Ⅰ组、Ⅱ组的免疫组化染色均明显比对照组好(P<0.01);光波微波组合Ⅰ组、Ⅱ组均明显好于单纯微波组(P<0.01)或单纯光波组(P<0.01);光波微波组合Ⅰ组与Ⅱ组,单纯光波组与单纯微波组之间的免疫组化染色无显著差异(P>0.05)。结论:光波微波硝酸脱钙所用时间比室温常规脱钙、单纯光波、微波脱钙时间明显缩短,免疫组化染色效果最好。

陈旧石蜡组织块的免疫组织化学染色及防脱片体会

目的总结陈旧石蜡组织块的免疫组织化学染色及防脱片经验。方法选取包埋时间为4年的金黄地鼠胰腺和肝脏石蜡组织块各150个,按照本课题组改进的实验方法进行切片及免疫组织化学染色。结果镜下观察显示,切片染色阳性结构清晰,无非特异性背景着色,脱片率约为10%。结论陈旧石蜡组织块在自来水里浸泡3-4d后再切能够提高切片质量;在免疫组织化学中烤片、抗原修复、一抗均是影响脱片的关键环节。

一种简便、可靠的免疫组织化学双重标记新方法

免疫组织化学双重或多重标记染色能同时在一张组织切片或一个细胞内证实多种抗原存在，是医学基础研究和临床病理形态学研究常用的方法。目前免疫双重标记（双标）实验多采用碱性磷酸酶和辣根过氧化物酶双酶显色系统，

免疫组织化学染色中的常见人为现象及消除方法

良好的免疫组织化学染色切片是正确判断染色结果的基础和前提，由于免疫组织化学染色过程要经过很多步骤和环节，而每一步骤和环节都可能影响到染色的最终结果。我们就免疫组织化学染色中常见的问题与解决的办法进行分析与讨论，旨在与技术人员进行交流与学习，以提高染色质量，为病理诊断提供可靠的依据。

免疫组织化学染色检测对非壶腹部十二指肠上皮肿瘤恶化潜能的诊断价值研究分析

目的分析免疫组织化学染色检测对非壶腹部十二指肠上皮肿瘤恶化潜能的诊断价值。方法回顾性选择北京顺义区医院2008年12月至2018年7月早期散发的非壶腹部十二指肠上皮肿瘤患者80例为研究对象,所有患者均接受内镜下切除手术,标本进行免疫组织化学染色分析,将其与临床病理学特征进行关联比较。结果80例患者中包括腺瘤48例(60.0%),早期腺癌32例(40.0%)。十二指肠腺癌的体积明显大于腺瘤,且具有乳头状结构,差异具有统计学意义(P<0.05)。十二指肠腺癌中胃标记物(MUC5AC和MUC6)及MIB-1指数显著较高,而腺瘤中则更高表达肠标记物(MUC2、CDX1和CDX2)。3例p53染色阳性,均为腺癌;MUC5AC的表达以及MUC5AC和MUC6的双阳性易增加黏膜下浸润的发生率。结论免疫组织化学染色可有效预测早期散发的非壶腹部十二指肠上皮肿瘤的恶性潜能,尤其需要关注胃肠道标记物的表达。

免疫组织化学染色法中的常见问题及对策

免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质,利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应,检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在.此方式不只可以用来测知抗原的表现量,也可观察抗原所表现的位置[1].因此其应用越来越广泛,为了提高其检验效果,本文就免疫组织化学染色法中的常见问题进行总结,并提出相应对策.

受体megalin和cubilin介导白蛋白吸收的免疫组织化学研究

目的及方法 采用免疫荧光双标记技术对培养的opossum肾 (OK)细胞膜受体megalin和cubilin的表达及其与荧光标记的白蛋白摄取的关系进行研究。结果 不同荧光标记的受体megalin及cubilin同时表达在相同的OK细胞上 ,分布主要局限在细胞膜 ,而且形式相似。被摄取的荧光标记的白蛋白点状分布在OK细胞内。此外 ,有受体megalin和cubilin表达的细胞就有白蛋白的摄取 ;反之 ,既不表达受体megalin和cubilin的细胞 ,也没有白蛋白的摄取。结论 这种白蛋白的摄取与受体megalin和cubilin表达的特征提示 ,两种大分子糖蛋白受体megalin和cubilin与白蛋白的摄取有密切相关性 ,很可能在肾小管重吸收白蛋白中起到相互作用。

免疫组织化学的作用原理及其在肿瘤诊断中的应用

随着免疫学的发展,近年来免疫组化的进展也日新月异.免疫组化含免疫细胞化学,工作过程在组织切片或细胞印片、涂片上进行;免疫反应是制备特定的抗体去与组织或细胞中相应的抗原相结合,显示抗原定位和分布.为使抗原抗体反应物成为可见物,人为地将荧光素或酶标记于抗体上.反应物于前者在荧光镜下呈鲜艳的彩色荧光,后者经显色底物处理后光镜下显示出醒目的阳性彩色颗粒.

免疫组织化学技术的某些进展

随着免疫组织化学技术的广泛应用,最近几年来又出现了一些新的制剂,标记技术及染色方法,进一步提高了该技术的特异性,灵敏性及定位精确性。本文仅就其中一些主要者作一简介。一、有关制剂(一)单克隆抗体单克隆抗体是指每个B细胞纯系产生的抗体。每个B细胞表面的抗原受体只特异地识别一种抗原决定簇,因此产生的抗体非常纯。这些以一株单细胞系产生的抗体称为单克隆抗体,简称McAb。

应用酶组织化学等方法对微血管形态学研究及其评价

应用酶组织化学等方法对微血管形态学研究及其评价熊正文，潘书文（中国人民解放军第２５１医院病理科，张家口市０７５０００）微血管直径和密度是微循环研究的两个重要参数，它们在不同程度上反映了循环液同组织、细胞间的交换面积，进而反映出循环物质交换的功能状态。...

同种属来源一抗在免疫荧光双标记染色中的可行性

目的探讨同种属来源一抗在免疫荧光双标记染色中的可行性。方法本研究采用顺序法对小鼠结肠组织IL-17和肠神经胶质细胞源性神经营养因子GDNF的特异性受体亚基GFR-α1进行同种属来源一抗的免疫荧光双标记染色。结果炎症状态下小鼠结肠组织黏膜及黏膜下层可见被绿色荧光和红色荧光双重标记的阳性细胞,提示IL-17+的Th17细胞表面有GDNF特异性受体亚基GFR-α1表达。结论采用顺序法进行免疫荧光双标记染色,尤其是当已知两种目标抗原表达位置不同时,同一种属来源的一抗仍可得出可信的实验结果。