流式细胞双标记技术定量检测淋巴细胞亚群凋亡

目的 建立定量检测淋巴细胞亚群凋亡的方法。方法 设立经甲基泼尼松龙 (MP)处理人外周血淋巴细胞的MP处理组和未经MP处理的对照组。以电镜、DNA电泳对人外周血淋巴细胞行凋亡定性检测 ,以流式细胞TUNEL技术 (TUNEL法 )定量检测淋巴细胞凋亡发生率 ,采用PE -CD3联合FITC -TUNEL双标记法定量检测淋巴细胞亚群发生率。结果 TUNEL法MP处理组淋巴细胞凋亡检出率 (6 8.2± 6 .4) % ,显著高于对照组 (10 .2±2 .2 ) % (P <0 .0 1)。双标记法凋亡检出率 (70 .2± 3.6 ) % ,与TUNEL法无显著差异。双标记法检测MP处理组CD3+ 细胞凋亡率 (87.6± 4.7) % ,CD3-细胞凋亡率 (2 3.0± 3.2 ) % ,CD3+ 细胞凋亡率显著高于CD3-细胞凋亡率(P <0 .0 1)。结论 流式细胞双标记凋亡定量检测技术可同时检测凋亡细胞及其表面标志 ,适用于淋巴细胞各亚群凋亡的定量检测。

HRP和单胺氧化酶双标记技术的研究

ＨＲＰ和单胺氧化酶双标记技术的研究首都医科大学北京神经科学研究所赵春礼，王珂，鲁强，张国风儿茶酚胺和５－ＨＴ同属单胺类，它们共同的降解途径之一是经单胺氧化酶（ＭＡＯ）脱氨基而失活。ＭＡＯ在中枢内的分布基本上与单胺类递质的分布一致。因此，利用ＭＡＯ组织...

免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌的效果观察

目的探讨免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌的效果。方法 47例鼻咽癌患者作为研究对象,进行免疫组化和原位杂交双标记技术检测鼻咽癌细胞中EB病毒的表达情况,观察检测效果。结果免疫组化检测结果显示,广谱细胞角蛋白(CK)定位于细胞浆内。原位杂交双标记技术检测结果显示, EB病毒编码的小RNA(EBER)阳性反应定位于鼻咽癌细胞的细胞核上。免疫组化检测后的阳性细胞的胞膜表现为红色,原位杂交双标记技术检测后的阳性细胞核表现为蓝黑色,而双阳性细胞的核与膜呈现蓝红色,不仅对比鲜明同时背景十分清楚,双染成功后细胞及组织结构表现完整。结论免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌均有一定作用,但原位杂交双标记技术检测比免疫组化方法更灵敏,值得临床推广应用。

免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌的临床探讨

研究分析免疫组化与原位杂交双标记技术检测EB病毒用于诊断鼻咽癌的临床应用效果。方法 选取100例于2019年1月至2019年12月入院疑似鼻咽癌并实施EB病毒检测患者开展本次研究,通过平均分组,将患者分配进实验组与参照组两个组别当中,每组患者50例,参照组适用核酸杂交的方式检测,实验组实施免疫组化与原位杂交双标记技术检测,以此将组别间EB病毒检测结果及对鼻咽癌诊断效率等方面实施数据整理、对比。结果 实验组患者实施免疫组化与原位杂交双标记技术检测后,临床检测数据结果及鼻咽癌诊断效率得以显著提升,相比于参照组患者,诊断准确率更高,组间数据对比存在明显统计差异性(P<0.05)。结论 对鼻咽癌患者实施免疫组化与原位杂交双标记技术对疾病进行检测,数据检测准确性更高,能够为鼻咽癌诊断提供有利科学依据,临床检测应用价值较高。

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用

微波抗原修复法在免疫组织化学双标记技术中的应用孙保存赵秀兰章明放林建韶随着免疫组织化学方法的普及，双标记技术的应用日益增多。但该技术操作复杂，影响因素多，不易获得满意结果。利用微波辐射对组织抗原进行修复可明显提高免疫组化染色效果。我们在对克隆病组织中...

肾脏标本的原位杂交与免疫组织化学双标记技术

我们利用小鼠单侧输尿管梗阻(UU0)模型,采用地高辛标记的细胞黏附分子-1(ICAM-1)cDNA探计与单核巨噬细胞(ED-1)抗体在同一切片上观察了肾间质中ICAM-1 mRNA及ED-1抗原的表达,取得了满意的效果.

结缔组织生长因子在增生性玻璃体视网膜病变增生膜中的表达

目的观察结缔组织生长因子(CTGF)在增生性玻璃体视网膜病变(PVR)增生膜中的表达,并鉴别增生膜中阳性细胞来源。方法采用SABC免疫组织化学方法对玻璃体切割手术获得的43例PVR增生膜进行CTGF蛋白的检测,并采用免疫荧光双标记技术在阳性表达的增生膜和正常人眼球标本中判定CTGF阳性细胞来源。结果免疫组织化学显示PVR增生膜中阳性细胞形态多是一类胞体为长圆形或多角形,胞浆丰富的上皮样细胞。17例C2-C3级膜中12例阳性,26例D1-D3级膜中19例阳性,其染色反应为阴性"-"、弱阳性"+"、阳性"2+"和强阳性"3+"的分别有5、3、6、3例和7、5、8、6例,总阳性率分别为70.6%和73.1%。统计学分析CTGF阳性表达与膜分级问无相关性(P>0.1)。免疫荧光双标记法显示PVR增生膜中有RPE、巨噬细胞、神经胶质细胞,CTGF阳性细胞来源于RPE细胞;正常眼球RPE层不表达CTGF。结论正常眼球RPE层不表达CTGF,PVR形成过程中RPE细胞在TGF-β1等生长因子的刺激下,CTGF表达上调,表明CTGF参与了PVR增生膜的形成和发展。

不同剂量甘露醇对脑出血患者血小板CD62p和CD42b表达的影响

目前临床上大多将甘露醇作为治疗脑出血后脑水肿的主要脱水药物,对于甘露醇的脱水作用虽已得到充分肯定,但很多学者都注意到其脱水效果并非与其使用剂量和次数呈正相关,而是随着甘露醇的使用次数的增加,脱水效果反而减弱,甚至可加重脑水肿,其具体机制尚未完全清楚[1].CD62p和CD42b两者都是体内血小板活化的敏感指标[2,3].我们应用流式细胞双标记技术观察不同剂量甘露醇对血小板CD62p和CD42b表达的变化,旨在比较不同剂量甘露醇对血小板活化的影响.

蛋白酶的相对分子质量对其在制革过程传质的影响

用荧光双标记技术研究了浸水、酶法脱毛、软化和鞣后酸性软化过程中蛋白酶的相对分子质量对其在皮/革内传质的影响。结果表明,浸水和脱毛过程中,由于牛皮厚度大、粒面附有表皮和毛、皮胶原纤维未分散,蛋白酶不能渗透整层牛皮,并且酶的相对分子质量对其在皮内的传质影响很小。软化过程中,由于表皮和毛去除彻底、胶原纤维分散良好,蛋白酶较易渗入裸皮,且相对分子质量较小的蛋白酶的渗透速率明显更快,故选用相对分子质量较小的蛋白酶对均匀软化具有重要意义。鞣后酸性软化过程中,尽管削匀蓝湿革薄且胶原纤维分散好,蛋白酶却不能完全渗透蓝湿革,酶的相对分子质量也基本不会影响蛋白酶在革内的传质。这可能是因为酸性蛋白酶的用量少、在浴液(pH 3.5,铬含量27 mg/L)中溶解不完全,且易与蓝湿革表层的铬结合。

原位杂交与免疫组化双标记在PTLD诊断中的应用

目的探讨原位杂交与免疫组化双标记技术在移植后淋巴组织增生性疾病(PTLD)诊断中的可行性与最优实验操作方案。方法选择天津市第一中心医院病理科2018年1月-2019年4月诊断为PTLD患者10例作为研究对象,采用四种实验顺序先后进行原位杂交与免疫组化双标记技术染色,观察染色效果。结果在四个实验组中,先行免疫组化,后行原位杂交并且采用微波修复的实验组双染色成功:组织结构完整,胞核染色为紫黑色,胞膜染色为红色,两种显色对比差异明显,背景干净。结论原位杂交与免疫组化双标记技术,可在一张切片上直接地判断是否有EB病毒感染,以及阳性细胞是T细胞还是B细胞,对PTLD组织学诊断有一定的帮助。