用于单切片双模态光学关联成像的肾脏组织样本处理方法

明场成像能够提供细胞或组织的形态学信息,荧光成像可以获取关键蛋白的表达信息,基于二者的双模态关联成像是目前医学和科研中常用的组织样本检查方式。然而,在临床检查时通常利用基于邻近切片之间的关联成像进行观察。此时,组织结构和细胞层次均会有或多或少的改变,这在样本量不足、切片上的细胞有限或需要获得点对点精准形态学信息的情景下显得十分不利。本研究提出了一种在单张组织切片中实现苏木素-伊红染色和免疫荧光染色的样本处理方法,用于双模态成像技术。重点优化了褪色处理和免疫荧光复染方案,比较了三种褪色方案(盐酸乙醇、冰醋酸-草酸和高锰酸钾-草酸)以及三种抗原修复方案(EDTA、Tris-EDTA和柠檬酸)。通过对不同条件下获取的图像信噪比进行对比分析,发现经冰醋酸-草酸褪色结合EDTA抗原修复的免疫荧光图像质量最佳。此外,还实现了明场与荧光图像的融合,从而在单张切片上展示更完整的组织形态和免疫信息。