从微生态学的发展再认识双歧杆菌属细菌

目的从微生态学的发展角度再认识双歧杆菌属细菌。方法采取文献回顾的方法对双歧杆菌属进行再认识与再评价。结果随着微生态学的不断发展,医学微生态学的研究越来越受到医学届的重视,人类疾病的发生、发展与机体内微生态失调息息相关,而双歧杆菌是人类肠道的正常菌群,是研制开发微生态制剂最主要的菌株之一。结论从双歧杆菌属研究状况、生物活性、临床应用及使用应注意的问题与展望进行了分析、论述,双歧杆菌属对预防菌群失调具有广阔的应用前景。

用乳酮糖奶粉喂养小鼠粪便中双歧杆菌属增殖的实验

双歧杆菌属(Bifidobacterium)是人体肠道正常菌丛之一。该菌对人体的健康有益,具有抑制肠道腐败菌、改善便秘与腹泻,促进蛋白质消化、产生多种维生素,控制内毒素血症,提高宿主对放射线的耐受性及抗癌能力。现已证明乳酮糖是促进双歧杆菌增殖的有利因子。为此加入乳酮糖的食品在国外相当盛行,种类也相当繁多,有饮料、糖果、婴儿食品。

实时荧光定量PCR法研究溃疡性结肠炎患者肠道双歧杆菌属、柔嫩梭菌属及拟杆菌属量的变化

目的应用荧光定量PCR技术对人粪便内双歧杆菌属、柔嫩梭菌属及拟杆菌属进行定量检测,揭示肠道相关菌群改变在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)发病中的作用及意义。方法分别设计双歧杆菌属、柔嫩梭菌属及拟杆菌属的特异性引物。收集溃UC患者粪便标本60份及正常对照标本60份,提取细菌基因组DNA,应用实时荧光定量PCR反应测定细菌的数量。结果 UC患者组双歧杆菌属及柔嫩梭菌属的数量较正常对照组明显减少(P<0.05),而拟杆菌属的数量较正常对照组明显增多(P<0.05),差异有统计学意义。结论 UC患者粪便中双歧杆菌属及柔嫩梭菌属的数量较正常对照明显减少,而拟杆菌属的数量较正常对照明显增多,提示肠道菌群与UC的发生、发展有一定的关系。

应用实时荧光定量PCR定量检测溃疡性结肠炎肠道大肠埃希菌、乳酸杆菌及双歧杆菌属的变化

目的应用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者粪便中大肠埃希菌、乳酸杆菌及双歧杆菌属的数量进行定量检测分析。方法根据细菌的16S rDNA基因序列设计大肠埃希菌、乳酸杆菌及双歧杆菌属的种属特异性引物。收集溃疡性结肠炎患者及正常对照者新鲜粪便标本各35例,从待测粪便标本中提取细菌基因组DNA,进行实时荧光定量PCR反应,定量分析不同细菌的数量。结果正常对照组与病例组粪便中细菌数量分别为大肠埃希菌(4.62±1.10;5.27±1.02)、乳酸杆菌属(4.99±0.75;4.65±0.95)、双歧杆菌属(5.07±0.95;4.93±0.99),病例组大肠埃希菌数量明显增多(t=2.540,P=0.013),而乳酸杆菌及双歧杆菌属数量与正常组比较差异无统计学意义(t1=0.488,P1=0.530;t2=-0.533,P2=0.596)。结论溃疡性结肠炎患者粪便中大肠埃希菌的数量较正常对照明显增多,而乳酸杆菌及双歧杆菌属的数量无明显变化,提示大肠埃希菌与溃疡性结肠炎的发病或复发有关系,而乳酸及双歧杆菌属与此病的关系有待进一步研究。

双歧杆菌属特异性定量引物的设计及验证

【目的】旨在设计一对双歧杆菌属特异性引物以检测不同样品中低丰度双歧杆菌的含量。【方法】在NCBI中下载57株双歧杆菌全基因组序列,以其共有单拷贝核心基因为目的片段设计双歧杆菌属特异性引物;并对引物进行PCR初筛和特异性复筛;之后借助ddPCR(Droplet Digital PCR,微滴式数字PCR)依次对筛选出的引物进行特异性、灵敏度和实用性验证。【结果】引物Bif-D-9特异性最好,可扩增出4株双歧杆菌而不能扩增20株非双歧杆菌中的任何一株菌;同时通过ddPCR仪定量稀释后的DNA,其扩增结果呈线性下降趋势,证明其灵敏度较好;另外,Bif-D-9结合ddPCR定量出婴儿粪便中双歧杆菌的拷贝数为71 copies/μL,母亲粪便中双歧杆菌的拷贝数为2.7 copies/μL,证明了该方法的实用性。【结论】引物Bif-D-9具有双歧杆菌属特异性,且灵敏度较高、实用性较好,适用于复杂样品中双歧杆菌属定量。

不同体型学龄儿童肠道内多形拟杆菌与双歧杆菌属定量分析

目的比较不同体型学龄儿童肠道内多形拟杆菌与双歧杆菌属的数量分布差异,探索学龄儿童肠道菌属与体重的关联,为采取适当干预措施调节学龄儿童肠道菌群平衡、促进健康提供依据。方法于2017年11-12月,以南京市某小学166例学生为调查对象,通过实时荧光定量PCR法分析不同体型学龄儿童粪便样品中多形拟杆菌与双歧杆菌属的分布差异。结果多形拟杆菌属在肥胖、超重、正常体重组的中位数(四分位数间距)分别为4.79(4.69~5.36)、4.77(4.69~5.44)、5.00(4.93~5.74)copies/μL;双歧杆菌属在肥胖、超重和正常体重组的中位数(四分位数间距)分别为7.33(7.16~7.57)、8.31(8.11~8.47)、8.31(8.18~8.54)copies/μL。多形拟杆菌与双歧杆菌属在不同体型学龄儿童中的分布差异均有统计学意义(均P <0.01),而在年龄与性别分层中差异无统计学意义(均P> 0.05)。结论学龄儿童肠道内多形拟杆菌与双歧杆菌属的数量与体型相关,但受年龄及性别影响较小。

双歧杆菌属天然质粒系统分类

【背景】以往双歧杆菌质粒分类学研究较少,双歧杆菌属质粒系统分类方法缺失。【目的】建立双歧杆菌属天然质粒系统分类和鉴定方法,促进质粒在双歧杆菌生物学研究中的理解和应用。【方法】利用质粒复制起始蛋白进化树和基因组共线性分析方法,对目前所有已测序的双歧杆菌属天然质粒进行系统分类研究。【结果】双歧杆菌所有已知天然质粒可以划分为6个不同类型的质粒家族和3个独特的复合质粒,家族Ⅲ和家族Ⅵ质粒可进一步划分为不同的亚型类群。家族Ⅲ质粒是双歧杆菌属天然质粒的主要类型和优势家族。家族Ⅵ质粒成员亚型分类最丰富。在质粒家族水平,2种方法的分类结果完全一致。【结论】本文揭示了所有分析质粒之间的系统分类关系,建立了双歧杆菌属天然质粒系统的分类标准、方法和体系,可为今后双歧杆菌天然质粒分类和鉴定提供重要的理论参考和分类依据。

双歧杆菌对严重烧伤患者美罗培南应用后肠菌群的调节

目的 探讨双歧杆菌对烧伤患者大剂量应用美罗培南后 ,紊乱肠菌群调整作用。方法 严重烧伤患者 2 3例应用美罗培南 (6 g/d) 7d后 ,随机分为治疗组 (n=11)和对照组 (n=12 ) ;双盲法给予双歧杆菌悬液和生理盐水 (10 0 ml/d) ,疗程 5 d;分别于美罗培南应用前及用后 0、1、3、5 d,常规方法检测粪便中双歧杆菌、真菌、大肠埃希菌量。结果 美罗培南应用 7d,肠道菌群中双歧杆菌量骤减近 10 0倍 ,真菌数激增 10 0倍 ;双歧杆菌治疗 1d,肠道双歧杆菌数增加 10 0倍 ,3d后真菌量减少约 2 5倍 ;对照组在停用美罗培南后 5 d肠道菌群始基本恢复 ;腹泻患者口服双歧杆菌后 3d肠道菌群恢复 ,对照组 5 d恢复。结论 长期大剂量应用美罗培南可导致肠道菌群紊乱 ,停药后外源性补充双歧杆菌能较快恢复肠道生态 ,治愈抗菌药物相关性腹泻。

基于FemAB基因特异引物的动物双歧杆菌PCR检测方法的建立

分离和鉴定了两株双歧杆菌,通过16SrDNA通用引物扩增条带测序和非特异引物随机扩增法扩增条带测序推测其为动物双歧杆菌。随后使用以编码肽聚糖肽桥形成蛋白(Peptidoglycan bridge formation protein)FemAB基因为目的扩增片段设计的特异引物进行了扩增鉴定。结果表明,此特异引物对这两株动物双歧杆菌菌株扩增结果为阳性,其他对照菌株扩增结果为阴性,且扩增条带测序结果与预计一致。FemAB基因在PCR特异扩增法鉴定细菌种属中具有较好的分辨能力,并使用其建立了动物双歧杆菌PCR检测方法。本研究旨为应用FamAB基因鉴定细菌种属以及双歧杆菌属微生物的鉴定提供了数据参考。

亲和人体与非亲和人体双歧杆菌之间的生理特征差异

叙述了不同寄宿起源的双歧杆菌之间的基因型及生理特征的差异,以及有关双歧杆菌的保健功能的最新研究结果,旨在探讨如何选择最佳的益生菌。一般来说,双歧杆菌可根据不同寄宿环境分为两大类:寄宿于人类的菌种为亲和人体双歧杆菌(HumanResidential Bifidobacteria,HRB),而寄宿于动物或其他环境的为非亲和人体双歧杆菌(Non-Human-Residential Bifidobacteria,非HRB)。众多的研究表明HRB菌株将会是更理想的人类益生菌,特别是用于婴幼儿,且对宿主会有更多的功效和更高的安全性。

灭活的双歧杆菌等细菌的免疫调节效应

近年俄学者马尔采夫等研究查明,不仅仅是用活着的大肠杆菌M-17和双歧杆菌属对肠道的局部免疫系统功能有激活效应,而且用某些灭活的细菌亦会对肠道的局部免疫显示激活效应。比如,他们将青春双歧杆菌-UM-J(bIFIDOBACTERIUM ADOLESCENTS um-J)、嗜酸乳杆菌A4(L.acidophilus A4)和粪链球菌H-22(Streptococcus faecalis H-22)

肝硬化患者TIPS术后肠道菌群特征性改变及其与临床指标的相关性研究

目的比较既往行颈静脉肝内门体分流术(transjugular intrahepat portosystemic stent-shunt,TIPS)手术的肝硬化患者与未经TIPS手术的肝硬化患者的肠道菌群,探索在肝硬化患者中,TIPS手术与肠道菌群的关系,为基于肠道菌群干预改善肝硬化TIPS手术预后提供新思路。方法行TIPS手术的肝硬化患者为手术组,未经TIPS手术的肝硬化患者为对照组,收集患者大便标本行16S rRNA测序分析,并分析肠道菌群与临床指标相关性。结果两组患者在性别、年龄、体重指数(BMI)、病因等基线资料上均无显著差异(P>0.05),但临床血清学指标(如HGB,RBC,ALP,ALB,TBIL,PT,INR,APTT,UREA等)有显著差异(P<0.05)。手术组与对照组相比,α多样性无统计学差异(P>0.05),β多样性差异明显(P<0.01),手术组Bacteroides(拟杆菌属)明显增多(P<0.01),而对照组Bifidobacterium(双歧杆菌属)明显增多(P<0.05)。肠道菌群功能预测分析显示,手术组较对照组D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢显著上升(P<0.05),次级胆汁酸生物合成(P<0.05)也显著上升。临床指标与菌群相关性分析中发现,总胆红素(TBIL)及直接胆红素(DBIL)与Bacteroides(拟杆菌属)、次级胆汁酸代谢通路显著相关。结论肝硬化TIPS术后患者肝硬化对照者相比,肠道菌群存在特征性改变,Bacteroides(拟杆菌属)可能参与胆汁酸代谢调控进而影响TIPS术后血胆红素水平升高。

太极拳练习对肥胖女大学生身体形态和肠道益生菌的影响

目的:探讨太极拳练习对肥胖女大学生身体形态和肠道益生菌的影响。方法:选取 40 名肥胖女大学生随机分为试验组和对照组,试验组进行 12 周太极拳练习,对照组保持日常生活习惯。分别在开始练习前和练习 12 周后,测量受试者的身体形态和粪便中肠道乳酸杆菌和双歧杆菌属的数量。结果:经过 12 周的太极拳练习,试验组身高指标干预前、后无差异,体重、BMI、腰围、臀围、腰臀比指标以及乳酸杆菌和双歧杆菌属的数量差异均具有统计学意义;对照组各身体形态指标及乳酸杆菌和双歧杆菌属的数量差异均无统计学意义。结论:太极拳练习可以降低肥胖女大学生的体重和 BMI,减小腰围和臀围,改善身体形态;同时可以增加肠道中乳酸杆菌和双歧杆菌属的数量,具有潜在防治肥胖的作用。

调节小鼠肠道菌群和预防肠道菌群失调探讨

目的建立调节小鼠肠道菌群动物模型和预防肠道菌群失调的模型,探讨微生态调节剂不同的使用方法对肠道菌群失调的作用。方法①预防菌群失调:建立小鼠肠道菌群失调预防组和对照组模型;②调节菌群失调:建立小鼠肠道菌群失调模型后,再分为自然恢复组和调节组。以上各组分别在给受试物后无菌采取粪便,观察各组双歧杆菌,乳酸杆菌,肠杆菌及肠球菌数量。结果①预防菌群失调:在菌群失调下同时给予微生态调节剂,与正常对照组相比较小鼠肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌的数量明显增加;②调节菌群失调:菌群失调后,给予微生态调节剂,乳酸杆菌及双歧杆菌在小鼠肠道内的数量与自然恢复组相比较明显增加。结论微生态调节剂产生调节小鼠肠道菌群,增殖双歧杆菌和乳酸杆菌的作用。停用抗生素后肠道菌群恢复较快。

四株双歧杆菌对高脂饮食大鼠肥胖形成的影响

本研究选用正常人体肠道筛选出的不同双歧杆菌株干预高脂饮食肥胖大鼠模型，为筛选双歧杆菌属中具有较好降脂、减肥效果的菌株提供理论和实验依据。

32例消化道癌症患者的粪便菌群检查

本文报告10例食管癌、12例胃癌贲门癌、10例大肠癌患者和12例正常人的粪菌群检查结果。这些粪菌群包括厌氧菌中的双歧杆菌属、拟杆菌属和梭菌属、兼性厌氧菌中的乳酸杆菌属,需氧菌中的大肠杆菌属和肠球菌。用每克粪便中菌落形成单位(CFU/克粪)的对数值来表示细菌的数量。结果发现:癌症患者粪便菌群中。

乳酸菌的生理功能及在食品中的应用

食品级乳酸菌的广泛应用也逐渐使人们了解到了乳酸菌的益处,因此乳酸菌逐渐应用到肉制品、乳制品、蔬菜、软饮料等食品中,乳酸菌的生理功能也被挖掘的淋漓尽致。本文将对乳酸菌的生理工功能进行论述分析,并探讨其在食品中的有效应用。