双波长HPLC法同时测定丹皮药材中的3个指标成分

目的:同时测定不同产地丹皮药材中丹皮酚、芍药苷和没食子酸的含量。方法:采用双波长高效液相色谱法。Altima C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为0.4%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱:洗脱条件为0min→50min→60min,乙腈0%→40%→85%,流速1.0mL·min^(-1);检测波长为274nm和245nm;柱温为室温。结果:丹皮酚、芍药苷和没食子酸分别在1.3～255.0,0.4～75.0,0.9～175.0μg·mL^(-1)范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为(99.3±3.34)%,(102.2±1.55)%,(99.0±1.64)%;最低检测浓度分别为24.0,36.8,71.0ng·mL^(-1)。结论:该方法准确可靠、操作简便,为丹皮药材提供更合理、可靠的质量控制方法。

双波长HPLC法建立栀子药材的指纹图谱

目的采用双波长HPLC法建立栀子药材指纹图谱。方法采用Waters Symmetry C_(18)(250mm×4.6mm,5"m)色谱柱;乙腈-水梯度洗脱;流速:0.8mL·min^(-1);柱温:30℃。结果以栀子苷为参照物,用HPLC法测定不同产地10批栀子药材的指纹图谱,分离度达到1.5,用中药色谱指纹图谱相似度评价系统,计算出10批栀子指纹图谱的相似度,均在0.940~1.000。结论该方法具有良好的精密度、稳定性和重复性,可更好地控制栀子药材的内在质量。

双波长HPLC法同时测定穿心莲浸膏中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

目的建立双波长高效液相色谱法同时检测穿心莲浸膏中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量测定方法。方法采用Intersil C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇—水（60∶40）为流动相；检测波长穿心莲内酯为225 nm,脱水穿心莲内酯为254 nm；柱温为35℃；流速为1.0 mL·min-1。结果穿心莲内酯进样量在0.1043～1.0430μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=1.000 0,n=5）,脱水穿心莲内酯进样量在0.099 9～0.999 0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=1.000 0,n=5）；穿心莲内酯的平均加样回收率为98.53%（RSD=1.27%,n=6）,脱水穿心莲内酯的平均加样回收率为101.51%（RSD=1.10%,n=6）。结论该方法灵敏度高,重现性好,能准确测定穿心莲浸膏中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。

基于双波长HPLC指纹谱和其融合谱的系统指纹定量法鉴定甘草质量

目的建立甘草双波长HPLC指纹图谱及其融合谱,用系统指纹定量法鉴定其质量。方法采用RP-HPLC法,运用双波长融合谱技术分别对10批产地甘草提取具有代表性和互补性的203和254 nm的局部色谱图,融合生成对照指纹图谱(RFP)。用系统指纹定量法通过对双波长谱及其融合谱的评价,实现对10批不同产地甘草真实质量的鉴别。并对甘草化学指纹进行破坏性试验考察。结果基于203 nm HPLC指纹谱与融合谱的系统指纹定量法评价结果基本一致,用主成分分析和F值证明了融合谱优于此双波长HPLC指纹图谱可用于甘草药材质量控制。结论203和254 nm及融合谱的含量相似度Pm有一定波动是由于不同波长谱反映的化学成分的信号大小有一定的差异,导致评价的结果有出入。基于此双波长融合谱的系统指纹定量法的评价结果反映化学指纹信息全面、真实可靠,可清晰准确鉴别甘草真实质量。

双波长HPLC测定非发酵豆制品中人工合成色素

高效液相色谱法测定非发酵豆制品中人工合成色素的含量。样品用石油醚去脂,用硫酸和钨酸钠溶液除去蛋白质,聚酰胺粉吸附色素,洗涤后解吸,纯化后测定。采用Thermo ODS-2 HYPERSIL（150 mm×4.6 mm×5μm）色谱柱,流动相为0.02 mol/L乙酸铵-甲醇,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长427,485 nm,进样量20μL。结果表明,柠檬黄进样量在4～160 ng（Y=3 079.0X-1 980.4,r=0.999 8）、日落黄进样量在7～280 ng（Y=2 537.1X-1 507.1,r=1.000 0）范围内呈现良好的线性,柠檬黄、日落黄平均加样回收率为100.8%,100.4%。该方法能快速检测、操作简便且灵敏度高。

双波长HPLC同时测定八角莲中4'-去甲基鬼臼毒素鬼臼毒素槲皮素山柰素的含量

目的:建立同时测定八角莲中木脂素类成分4'-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素和黄酮类成分槲皮素、山柰素含量的方法。方法:采用Dikma C18plus(250 mm×4. 6 mm,5μm)色谱柱;流动相为甲醇-0. 1%磷酸水溶液(50∶50);流速为1 m L·min-1;检测波长分别为290、360 nm。结果:4'-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素、槲皮素、山柰素分别在进样量0. 294 4～3. 680、0. 961 6～12. 020、0. 086 3～1. 079 3、0. 102 3～1. 279μg与峰面积呈现良好的线性关系; 4个成分各个水平的方法回收率(n=9)均在97. 1～102. 1%。结论:该方法简便、准确,重复性良好,适用于八角莲中4'-去甲基鬼臼毒素、鬼臼毒素、槲皮素、山柰素4种成分的同时测定,能为八角莲药材和饮片的质量控制和临床应用提供依据。

双波长HPLC法同时测定感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏、咖啡因3种化学药物和野菊花指标性成分蒙花苷的含量

目的建立双波长HPLC法同时测定感冒灵胶囊中对乙酰氨基酚、马来酸氯苯那敏、咖啡因3种化学药物和野菊花指标性成分蒙花苷含量的方法。方法采用岛津Inertsil ODS-SP柱(5μm,250mm×4.6mm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(26∶23∶1),流速1.0m L·min^(-1),检测波长260nm(对乙酰氨基酚、咖啡因和马来酸氯苯那敏)和334nm(蒙花苷),柱温35℃,进样量20μL。结果对乙酰氨基酚在109.22μg·m L^(-1)~1092.20μg·m L^(-1)范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.09%,RSD为0.95%;咖啡因在2.05μg·m L^(-1)~20.50μg·m L^(-1)范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为100.17%,RSD为0.85%;马来酸氯苯那敏在2.06μg·m L^(-1)~20.59μg·m L^(-1)范围内呈良好的线性关系(r=1.0000),平均回收率为99.74%,RSD为1.05%;蒙花苷在9.77μg·m L^(-1)~97.69μg·m L^(-1)范围内呈良好的线性关系(r=0.9998),平均回收率为98.22%,RSD为1.48%。结论该方法精密度、准确度、重复性和耐用性均较好,可作为感冒灵胶囊中4种成分的含量测定方法。

HPLC双波长法测定四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

建立HPLC双波长法同时测定四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量。采用XBridge C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇-水(52∶48)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1);柱温25℃;进样量10μL,检测波长分别为225 nm(穿心莲内酯)和254 nm(脱水穿心莲内酯)。穿心莲内酯浓度在12.7375μg·mL^(-1)~509.5μg·mL^(-1)范围内,线性良好(r^(2)=0.9996);脱水穿心莲内酯浓度在3.4μg·mL^(-1)~136μg·mL^(-1)范围内,线性关系良好(r^(2)=0.9997)。穿心莲内酯加样回收率平均为98.8%,RSD为1.0%;脱水穿心莲内酯回收率平均为99.9%,RSD为08%。该方法快捷、灵敏、准确、可靠,可用于四味穿心莲散中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯2个有效成分的同步测定,为四味穿心莲散的质量控制和评价提供科学依据。

HPLC双波长切换法同时测定仙桃草中木犀草素、芹菜素、金圣草素的含量

目的:测定仙桃草中木犀草素、芹菜素、金圣草素等3种黄酮类成分的含量。方法:以甲醇提取制备分析样品,采用纳谱ChromeCore C 18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(23:77)为流动相,流速1 mL/min,检测波长为350 nm(木犀草素、金圣草素)和337 nm(芹菜素),柱温35℃。结果:木犀草素、芹菜素、金圣草素在各自范围内线性关系良好(r≥0.9996),平均加样回收率分别为97.79%、98.77%、97.28%,RSD分别为0.94%、0.91%、0.77%。13批样品的木犀草素含量在0.0391~0.7979 mg/g之间,平均值为0.5503 mg/g;芹菜素含量在0.0556~0.2655 mg/g,平均值为0.1938 mg/g;金圣草素含量在0.0575~0.2484 mg/g,平均值为0.1711 mg/g。结论:该方法准确、可靠、重现性好,可用于仙桃草质量控制。

基于双波长HPLC指纹谱的一级系统指纹定量法鉴定木香顺气丸质量

建立木香顺气丸(Muxiangshunqi pills,MXSQP)双波长HPLC指纹图谱,用一级系统指纹定量法鉴定其质量.采用RP-HPLC法,以橙皮苷(HI)为参照物峰,在265和326nm下分别检测获得60和56个共有指纹峰.以Sm和Pm为指标用系统聚类分析分别确定其中11批和12批样品指纹图谱生成265和326nm对照指纹图谱(RFP),并以此二个RFP为标准用一级系统指纹定量法分别评价16批样品.分别用权重法、均值法和投影参数法整合双波长指纹谱的宏定性和宏定量信息,用一级系统指纹定量法鉴定MXSQPs质量.上述五种方法鉴别出12批质量基本合格,4批含量明显不合格.基于不同波长及双波长整合谱的一级系统指纹定量法能够对中药系统的化学指纹进行整体定性分析和整体定量分析,是评价中药质量的便捷有效方法.

双波长HPLC法测定穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量

目的建立测定穿心莲片中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量的方法。方法采用双波长高效液相色谱法同时检测穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18(4.6mm×150mm,5μm),甲醇-水(63:37)为流动相,流速1.0ml.min-1,测定波长为225nm、254nm。柱温为室温。结果穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的平均加样回收率分别为98.8%和99.5%,RSD分别为1.3%和1.2%(n=6)。结论该方法操作简便、准确可靠,可用于穿心莲片的质量控制。

HPLC双波长法测定小柄马勃子实体、液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮含量

建立HPLC双波长法同时测定小柄马勃(Lycoperdon pedicellatus)子实体与液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的含量,并比较2种不同药用部位中麦角甾醇和麦角甾酮的含量差异。采用岛津InertsilODS-SP C18柱(4.6 mm×250 mm, 5μm)色谱柱,流动相为甲醇,流速为0.8 mL·min^(-1),检测波长分别为282 nm、 349 nm,柱温为30℃。结果表明,子实体中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.02μg^0.20μg (r=1)、 6.54 ng^65.40 ng(r=1)范围内线性关系良好。液体发酵菌丝中麦角甾醇和麦角甾酮的进样量分别在0.305μg^3.05μg (r=1)、6.54 ng^65.40 ng (r=1)范围内线性关系良好。因此所建立的双波长测定法准确可靠、重复性良好,可用于小柄马勃及其液体发酵菌丝中麦角甾醇、麦角甾酮化学成分的含量测定,为控制其质量提供参考依据。

HPLC双波长切换同时测定玄参药材中哈巴苷和哈巴俄苷的含量

目的:建立以双波长切换方式同时测定玄参药材中哈巴苷和哈巴俄苷的含量的方法。方法:采用Shimpack VP-ODS C_(18)柱(250 mm×4.6,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-磷酸(0.03%)(B)为流动相进行梯度洗脱:0-10 min,3%-10%(A);10-20 min,10%-33%(A);20-25 min,33%-50%(A);25-30 min,50%-80%(A);30-35 min,80%(A);35-37min,80%-3%(A);检测波长:前10 min为278 nm,10-15 min为210 nm,15 min后为278 nm,柱温为30℃,进样量为10μL,流速为1 mL·min^(-1)。结果:哈巴苷在0.011824-0.11824 mg·mL^(-1)范围内与哈巴俄苷在0.00416-0.0416 mg﹒mL^(-1)范围内线性关系良好。结论:该检测方法稳定可行,可用于同时测定玄参药材中哈巴苷和哈巴俄苷的含量。

HPLC双波长法同时测定白鲜皮中5种成分的含量

目的:采用HPLC双波长法同时测定白鲜皮中γ-崖椒碱、柠檬苦素、白鲜碱、黄柏酮和梣酮的含量。方法:采用Waters Symmetry~? C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;分别于210和236 nm测定5种成分的含量。结果:γ-崖椒碱、柠檬苦素、白鲜碱、黄柏酮和梣酮分别在2.5～200μg/mL(r=0.9999)、40～200μg/mL(r=0.9998)、40～200μg/mL(r=0.9990)、110～550μg/mL(r=0.9997)和100～500μg/mL(r=0.9998)范围内线性关系良好;平均加样回收率分别为94.98%、96.88%、96.71%、96.12%和95.79%,RSD分别为3.43%、2.99%、2.71%、2.79%和3.09%。结论:所建立的HPLC双波长法操作简便,结果准确,重复性好,适用于白鲜皮中γ-崖椒碱、柠檬苦素、白鲜碱、黄柏酮和梣酮5种成分的含量测定。

双波长高效液相法同时测定双香排石颗粒中的马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B

目的建立高效液相双波长切换法同时测定双香排石颗粒中马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B的含量。方法采用Alltima C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）;以乙腈-甲醇（1∶3）（A）-0.1%磷酸溶液（B）为流动相进行梯度洗脱;柱温为35℃;流速为1.0 ml/min;进样量为20μl;马钱子苷、断氧化马钱子苷和当药苷检测波长为240 nm,迷迭香酸和木通苯乙醇苷B检测波长为330 nm。结果马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B在给定浓度范围内线性范围分别为5.91~118.20μg/ml（r=0.9995）、4.10~82.00μg/ml（r=0.9991）、8.13~162.60μg/ml（r=0.9993）、12.57~251.40μg/ml（r=0.9998）和4.95~99.00μg/ml（r=0.9997）,线性关系良好;平均加样回收率（n=6）和RSD值分别为96.88%（1.31%）、99.09%（1.47%）、98.29%（1.59%）、98.82%（1.42%）和97.51%（0.86%）。结论本文建立的双波长HPLC方法同时测定双香排石颗粒中马钱子苷、当药苷、断氧化马钱子苷、迷迭香酸和木通苯乙醇苷B含量。方法灵敏度高、简便、准确、重现性好,为评价双香排石颗粒质量控制提供可靠方法。

HPLC双波长法同时测定甘草提取物中甘草苷、异甘草苷及甘草酸的含量

评价HPLC双波长法同时测定甘草提取物中甘草苷、异甘草苷、甘草酸含量效果。方法:通过HPLC双波长法,对甘草提取物中的草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸进行同时测定。结果:精密度吸取混合对照品溶液为10uL,草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸的相对标准偏差RSD分别为:1.35%、1.06%、1.91%、1.63%、1.82%。标定色谱峰相对保留的时间,应确保RSD在0.3%以下,草苷、异甘草苷、甘草素和异甘草素、甘草酸的RSD分别为:1.35%、2.14%、2.13%、1.25%、1.22%。色谱条件下,草苷、异甘草苷、甘草素,以及异甘草素、甘草酸各为:1.86%、1.61%、1.92%、1.31%、1.07%。批号:20161102、20161104、20161106、20161108、20161110、20161112、20161114,草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素及甘草酸的含量分别为:29.32mg/g、36.32mg/g、36.34mg/g、36.96mg/g、36.92mg/g、37.36mg/g、27.45mg/g。草苷、异甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草酸的Y值、X值、r值显性关系良好。结论:甘草提取物含量的测定中,采用HPLC双波长同时测定方法,能确保检测结果的准确性,能反复测定,临床效果较好。

HPLC双波长切换法同时测定加味益母草膏中5个成分的含量

目的:建立HPLC双波长切换法同时测定加味益母草膏中益母草碱、芍药苷、芦丁、阿魏酸和毛蕊花糖苷5个成分含量。方法:采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱(0~8 min,12%A→23%A;8~25 min,23%A→38%A;25~50 min,38%A→50%A),流速为1.0 mL·min^(-1);检测波长为230 nm(益母草碱、芍药苷、芦丁)和322 nm(阿魏酸、毛蕊花糖苷),进样量为20μL,柱温为30℃。结果:益母草碱、芍药苷、芦丁、阿魏酸和毛蕊花糖苷的平均含量分别为1.586、0.348、0.186、0.036、0.034 mg·g^(-1),5个成分线性关系良好(r>0.9995),平均加样回收率为98.8%~101.3%,RSD为1.1%~2.0%。结论:此方法高效、简便,易操作,可同时测定加味益母草膏中5个成分的含量,检测结果准确度高,精密度好,可用于加味益母草膏的质量控制,也可为加味益母草膏的进一步研究及临床应用提供科学依据。

HPLC双波长法同时测定19种药用腹菌麦角甾酮和麦角甾醇的含量

目的建立HPLC双波长法同时测定不同腹菌中麦角甾酮和麦角甾醇含量的方法。方法采用的色谱柱为岛津Inertsil ODS-SP C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-水(96:4)梯度洗脱;流速为1ml·min^(-1);检测波长为349nm、282nm;柱温25℃;进样量为10μl。结果麦角甾酮和麦角甾醇分别在0.0200～0.2000μg(r=1)、0.1020～1.0240μg(r=1)范围内呈线性良好关系,平均回收率分别为99.94%、100.19%,RSD分别为0.64%、0.19%。结论该方法操作简便、重现性好、灵敏度高、结果准确,为同时检测腹菌中麦角甾酮和麦角甾醇的含量提供了可靠的方法。

叶生小皮伞不同发酵产物中麦角甾醇和麦角甾酮的含量分析

为了分析叶生小皮伞菌株ME-1通过不同发酵方式得到的发酵产物中麦角甾醇和麦角甾酮2种活性成分的含量,采用HPLC双波长法测定液体发酵菌丝体和固体发酵产物中的麦角甾醇和麦角甾酮含量。结果表明:麦角甾醇、麦角甾酮分别在0.1~10.0和0.0123~0.1230 g,线性良好(R^2=0.9998、R^2=0.9996),精密度、稳定性、重复性的RSD均小于2.0%,加样回收率在99.30%~103.93%范围内;含量分析表明,液体发酵菌丝体中麦角甾醇含量为125.0μg/g,麦角甾酮含量为1.2μg/g;固体发酵物中麦角甾醇的含量为37.7μg/g,麦角甾酮的含量为4.8μg/g。由此看出,利用液体发酵方式可在其菌丝体中获得更多的麦角甾醇,而固体发酵产物中的麦角甾铜含量较高。本研究建立了稳定、高效、重现性好的叶生小皮伞活性成分的HPLC双波长分析法,明确了不同发酵方式下不同发酵产物中麦角甾醇和麦角甾酮的差异,为叶生小皮伞的综合评价和质量控制提供了理论依据。