双液相系统中疏水化合物的微生物降解

双液相系统是由水相与不互溶非水相组成的多相系统,在微生物降解疏水化合物时,双液 相系统有助于克服污染物可生物利用性障碍,提高污染物的生物降解速率。文中介绍了双液相 系统促进微生物降解的机制,微生物吸收底物的方式,以及底物与有机溶剂双重抑制作用存在时 微生物的生长模型等方面的研究进展。

双液相系统酶化学技术制取茶色素

应用双液相酶化学技术研究茶色素的形成与制取 ,并以单液 (水 )相系统进行茶多酚酶促氧化制取茶色素为对照。引入氧载体后 ,构成了双液相酶化学氧化系统 ,对其中溶解氧浓度、PPO活性、TFs、TRs含量的变化和HPLC图谱等分析研究。制品中TFs的HPLC图谱可知 :TOP 1中TFs的峰高和峰面积均高于TOP 2制品中TFs ,尤以TFG与TFDG较高。TOP 1制品中儿茶素类残留量较对照少 ,尤其是简单儿茶素的残留量 (如DL C ,(— ) EC)

双液相系统提高青霉素发酵中氧传递的研究

以液态烷烃为油相，引入青霉素发酵体系中以促进其氧的传递。通过摇瓶对不同油相分数添加的发酵情况进行了研究，油相分数为２％时，菌体的生长和葡萄糖的消耗速度都达到了最大值，这表明此时青霉素发酵体系的传氧能力得到了最大程度的提高。实验室规模罐发酵结果表明２％油相的引入最终使得青霉素发酵能力从约０．６ｇ／Ｌ提高到约１．０ｇ／Ｌ。

双液相发酵系统中氧传递机理的研究

以一种液态烷烃为油相，将其引入青霉素发酵过程以提高氧的传递。通过摇瓶和罐发酵对该双液相系统的发酵过程进行了研究，实验结果表明，油相分数为２％时，发酵体系中的传氧能力得到了最大程度的提高并最终导致了青霉素产量的提高。通过对体积传氧系数及油相与水相物理化学性质的研究，对油相引入后，发酵能力提高的现象作了初步的解释，并提出了双液相系统中氧从气泡传递到微生物细胞的宏规模型。

环氧化物水解酶在—个双液相系统中的界面失活

对映体选择性环氧化物水解酶在对映结构纯的环氧化物和二醇的制备中是有效的生物催化剂。外消旋环氧化物的动力学拆分可以在有机／水的两相系统中进行，从而得以采用较高浓度的环氧化物。然而，该系统中的酶一旦接触界面则可能导致失活。本研究中，我们探讨了在辛烷／水的两相系统中影响来自于放射形土壤杆菌的环氧化物水解酶在两相在界面失活的因素。同时在具有平界面的搅拌器和乳化反应器中测量了界面失活速率。

高效液相色谱-串联质谱法测定环境水体中的四溴双酚A

四溴双酚A （Tetrabromobisphenol A, TBBPA）属于溴代阻燃剂，是用量最大的溴代阻燃剂，已导致大气、水体、沉积物和土壤等环境介质的严重污染，并且影响到相关生态系统健康。研究表明，TBBPA对藻类、软体动物、甲壳动物和鱼体有明显的毒性作用。其危害已经引起该领域科研工作者及学者的普遍关注，

双液相技术对亚麻蛋白氨基酸组成及其疏水性的影响

通过比较亚麻籽双液相(TPS)粕、低温粕、高温粕及其分离蛋白中氨基酸组成及蛋白疏水性,考察双液相技术对亚麻蛋白氨基酸组成和疏水性的影响。研究表明,双液相技术有利于提高亚麻粕和分离蛋白中蛋白质的含量,分别达到37.4%和63.6%;必需氨基酸所占比例分别为37.91%和35.98%,略低于低温粕而高于高温粕;同时降低蛋白质疏水性,TPS分离蛋白的疏水性Q值为1051.4cal/mol,略高于低温分离蛋白的1047.8cal/mol,小于大豆分离蛋白和油菜籽分离蛋白。TPS蛋白中氨基酸组成平衡合理,是一种优质食品蛋白原料。

茶多酚双液相氧化制取茶色素参数研究

对茶多酚双液相酸性氧化制取茶色素的参数进行了研究,结果表明:除了搅拌速度和供氧外,茶多酚浓度、温度、氧化剂浓度、酯比例、反应时间和pH值均对茶色素中茶黄素(TFs)和茶红素(TRs)的形成有较大影响。相对低的茶多酚浓度、低的温度、低的氧化剂浓度、低的酯比例、短的反应时间和低的pH值有利于TFs的形成。在茶多酚浓度、温度、氧化剂浓度、酯比例、反应时间高值和pH低值时可取得较高的茶色素得率。

双波长超高效液相色谱指纹图谱鉴定芪参益气滴丸质量

目的建立芪参益气滴丸(QSYQDP)双波长UPLC指纹图谱,用系统指纹定量法鉴定其质量。方法采用超高效液相色谱法,以毛蕊异黄酮苷为参照峰,分别确定30个(254 nm)和36个(203 nm)共有指纹峰,建立QSYQDP-UPLC双波长指纹图谱。以系统指纹定量法的宏定性相似度Sm、宏定量相似度Pm为评价指标,采用均方开方法整合双波长下各样品的信息,并结合系统聚类分析,实现对49批QSYQDPs的整体质量评价。结果 254 nm波长下80%的样品质量在5级以上;203 nm波长下70%的样品质量在5级以上;指纹信息整合后数据显示,83%的样品质量在5级以上。结论所建立的多波长QSYQDP-UPLC指纹图谱的评价方法可权衡各个指纹信息,清晰、全面地反应QSYQDP的整体质量,适用于其质量控制。

普通人群血清双酚A水平的测定

[目的 ]建立高效液相色谱方法检测血清中双酚A(bisphenol ,BPA)的浓度 ,并测定普通人群血清中双酚A的水平。 [方法 ]按照高效液相色谱法的程序建立检测血清双酚A的方法。选择无任何职业性接触双酚A记录的普通人群作为研究对象 ,检测其血清双酚A水平 ,建立普通人群中的正常基准值。 [结果 ]建立的高效液相色谱法能够满足检测血清中双酚A的要求 ,检测限为 0 .3 9ng/ml。 2 45例血样中 ,12 0例可检出双酚A ,全部样品的双酚A的浓度范围为未检出～ 15 .9ng/ml ,中位数水平低于检测限 ,P75为 2 .0 5ng/ml,95 %上限为 6.8ng/ml。男女检出率无差别 ,检出率在不同年龄组间存在差别。随着年龄的增长 ,检出率上升。 [结论 ]本研究显示 ,建立的高效液相色谱法能够满足检测出普通人群血清中双酚A的要求。普通人群中血清双酚A的浓度都比较低 ,正常基准值低于 6.8ng/ml。个别水平较高 ,其来源需要关注。

在线固相萃取-液相色谱法测定水中苯酚类污染物

建立了在线固相萃取-高效液相色谱法分析水体中10种酚类化合物的分析方法.样品经滤膜过滤后,直接进样分析.首先通过双三元梯度系统中的上样泵实现富集和净化,然后利用阀切换,将目标物反冲至分析柱和检测器实现分离和定量.样品进样体积为2.5 m L,检测波长为270 nm和290 nm,分析时间为35 min.方法减少了前处理过程,相较于气相色谱法和液相色谱法方法缩减了分析时间和人力成本.该方法在2.0—100.0μg·L^(-1)范围内线性良好,10种酚类化合物的线性相关系数R2>0.99,方法检出限为0.2—1.7μg·L^(-1),满足我国对水体排放标准的监测需求.方法具有良好的重现性和准确性,对10.0、50.0、100.0μg·L^(-1)等浓度的6次平行测定RSD<15%,回收率范围85%—119%.通过对实际水样(包括饮用水、地表水、地下水和工业排水)测定发现,采用标准加入法能够有效去除基体干扰,实现目标物的准确定量.

在线净化/固相萃取-高效液相色谱法测定饮料中的维生素B12

建立了饮料中痕量维生素B12（VB12）的在线净化/固相萃取-高效液相色谱（HPLC）测定方法.在双梯度HPLC系统上,以磷酸盐缓冲溶液-乙腈为流动相,将2.5mL样品在线注入SPE柱（Acclaim PAⅡ,3 μm,3.0 mm× 33mm）以富集VB12,通过改变流动相梯度在SPE柱上以正向淋洗方式预分离VB12.被切入分析流路中的VB12在Acclaim PAⅡ分析柱（3μm,3.0mm×150 mm）上以磷酸盐缓冲溶液-乙腈为流动相,0.5 mL/min流速梯度洗脱分离,使用紫外检测器在361 nm波长下检测,整个分析过程在20 min内完成.VB12峰面积的相对标准偏差（RSD）为2.2％,其保留时间的RSD为0.027％.方法在0.1～ 5.0 μg/L质量浓度范围内与其峰面积呈良好的线性关系,线性系数为0.9999.方法的加标回收率为91％～ 109％,检出限为0.046 μg/L.该方法简单、快速、重现性好,相比于直接大体积进样和传统在线SPE模式,其去除杂质的效率更高、灵敏度更好,是一种测定饮料中痕量VB12的简单、有效方法.

全自动在线固相萃取-高效液相色谱法测定水体中痕量微囊藻毒素

建立了全自动化在线固相萃取-高效液相色谱法快速、准确测定水体中3种痕量微囊藻毒素的新方法。样品用自动进样器连续注入固相萃取小柱完成富集后,通过双梯度高效液相系统中的一个泵(上样泵)实现净化,再通过阀切换将固相萃取小柱切换至分析流路中,用另一个泵(分析泵)将待测物冲洗至分析柱进行测定。方法使用Acclaim PA柱芯(10mm×4.3mm×5μm)为在线固相萃取小柱,Acclaim PA2柱(150mm×4.6mm×3μm)为分析柱,上样泵流速2.0mL/min,上样后采用梯度洗脱方式进行样品的净化,分析泵流速1.0mL/min,也以梯度洗脱方式完成微囊藻毒素的分离和检测。检测波长为238nm,进样体积为10mL,整个分析时间为20min。方法在0.5～10μg/L范围线性良好,3种微囊藻毒素的线性相关系数R2>0.9996,检出限为0.1μg/L(S/N>3),6次平行测定峰面积RSD<1.6%。实验证明本方法可有效地用于水体中痕量微囊藻毒素的测定。

在线固相萃取-高效液相色谱法测定水中的苯脲化合物

通过在线固相萃取-高效液相色谱法快速、准确测定了EPA532方法规定的水中9种痕量苯脲化合物类杀虫剂.通过双梯度高效液相色谱系统中的上样泵,采用大体积自动进样方式,将2.5 mL水样中的被测物富集在萃取柱上;而后通过阀切换将萃取柱切换至分析流路中,进行分离、测定.上样泵的流动相为纯水和甲醇,分析泵的流动相为20 mmol·L-1甲酸铵水溶液和乙腈,流速分别为1.0 mL·min-1和0.6 mL·min-1,检测波长为245 nm,整个分析时间为20 min.方法在0.5—100μg·L-1范围线性关系良好,9种杀虫剂的线性相关系数R2≥0.9927,检出限≤0.093μg·L-1,7次平行测定保留时间RSD≤0.08%,峰面积RSD≤2.57%.该方法前处理简单,快速,重现性好,可用于环境水体和饮用水中痕量杀虫剂、除草剂等污染物的测定.

在线净化/固相萃取-高效液相色谱法测定饮用水和环境水体中的百草枯和敌草快

建立了在线净化/固相萃取(SPE)-高效液相色谱(HPLC)快速、准确测定饮用水和环境水体中的两种痕量除草剂百草枯和敌草快的方法。样品用大体积自动进样器注入在线净化小柱并流经固相萃取小柱,通过双梯度高效液相色谱系统中的上样泵实现净化和富集后,通过阀切换将固相萃取小柱切换至分析流路中;用分析泵将待测物从富集柱冲洗至分析柱进行测定。上样泵流速和分析泵流速分别为0.7和0.6 mL/min,采用等度洗脱方式完成两种除草剂的分离和检测。检测波长分别为260 nm(百草枯)和311 nm(敌草快),进样体积为2.5 mL,整个分析时间为16 min。该方法在1.0～20μg/L范围内线性关系良好,两种除草剂的线性相关系数均大于0.998 0,检出限分别为0.10和0.12μg/L(S/N=3)。该方法前处理简单,快速,可用于饮用水和环境水体中痕量除草剂的测定。

适用于质谱分析的在线固相萃取除盐方法

建立了一个简单、快速、有效的适用于质谱或液相色谱-质谱联用的在线固相萃取(SPE)高通量除盐方法。方法分为单柱和双柱模式,借助于包含双梯度泵(上样泵/分析泵)、自动进样器和配有十通切换阀的柱温箱的高效液相色谱系统,完成样品的自动化在线除盐。单柱模式通过上样泵实现在SPE柱上进样和除盐,被分析物则保留在SPE柱上;除盐完成后,通过阀切换利用分析泵洗脱富集在SPE柱上的被分析物。双柱模式则在单柱模式基础上增加了1根SPE柱,在色谱管理软件控制下2根SPE柱轮流工作,高效率完成样品的在线除盐。该方法在结合质谱分析蛋白质、多肽等领域具有较好的应用前景。

用HPLC指纹图谱对佩兰的信息质量控制研究

目的建立佩兰HPLC数字化指纹图谱,采用双定性双定量相似度等46个参数作为评价的信息参数,对佩兰进行信息质量控制。方法采用RP-HPLC色谱法,以CenturySIL C18AQ(20 cm×4.6 mm,5μm)色谱柱,1%醋酸水-1%醋酸乙腈为流动相进行低压梯度洗脱,检测波长为265 nm,柱温:(30±0.15)℃,进样量:5μL,测定不同产地佩兰药材的HPLC指纹图谱。以10批佩兰的HPLC指纹图谱按平均值法计算生成对照指纹图谱(RFP),以此RFP为标准计算10批佩兰的双定性双定量相似度的均值,据此进行宏观定性定量质量评价;并以色谱指纹图谱指数F等42个信息参数进行超信息特征评价。结果以香豆素峰为参照物峰,确立了27个共有峰,建立了佩兰HPLC数字化指纹图谱,用双定性双定量相似度的均值评价了10批样品的化学成分数量和分布比例相似性较好,但含量差异很大。结论在选取的14个产地的佩兰药材中4批与其他相比化学成分分布比例差异较大,不建议使用,推荐使用定性定量相似度均很高的S2广东清平、S4江苏东台市等产地的佩兰药材。本研究对使用佩兰药材生产制剂具有宏观质控意义,证明了中药色谱指纹图谱技术结合多变量参数控制中药质量的信息质量控制方法具可行性及实用性。

HPLC指纹图谱控制复方丹参片质量

目的采用双定性双定量相似度作为评价指标,建立复方丹参片(CSMT)HPLC指纹图谱的全质量控制方法。方法采用RP-HPLC法以Century SIL C18BDS柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以色谱指纹图谱指数F为目标函数优化选择指纹图谱检测条件,确定流动相组成是质量分数为1%的醋酸水溶液-质量分数为1%的醋酸甲醇溶液低压梯度洗脱,紫外检测波长290 nm,柱温(30.00±0.15)℃,进样量5μL。以双定性相似度均值和双定量相似度均值为参量通过对20批复方丹参片进行系统聚类分析确定用其中10批生成复方丹参片对照指纹图谱(RFP),以此RFP为标准对总计20批复方丹参片采用双定性双定量相似度法进行质量评价。结果以丹酚酸B(SAB)为参照物峰,确定40个指纹峰,建立了复方丹参片HPLC指纹图谱。用双定性相似度评价15批样品的化学成分数量和分布比例都合格,但其中仅8批双定量相似度合格,为质量完全合格品。其它7批含量明显偏低,生产时应根据双定量相似度偏低程度提高投料量或者适当增大服用剂量。其余5批都存在化学成分和分布比例不合格特征,有2批含量相似度合格和3批含量相似度明显偏低。结论在OTC中随机选择的20批复方丹参片,无明显的劣质品出现,若按指纹图谱技术控制则出现明显的质量差异,因此所建立的具有较好精密度和重现性的复方丹参片的HPLC指纹图谱,完全适用于复方丹参片的生产质量控制。试验证明了双定性双定量相似度法是宏观定性定量评价中药复方制剂质量的最理想和最客观的指纹图谱评价技术。

酸性条件对茶多酚酸性氧化的影响

经酸性氧化条件筛选及对茶多酚酸性氧化影响的研究,结果表明:茶多酚酸性氧化均可在有机酸和无机盐酸性盐的酸性环境中进行,无机酸性盐的酸性环境更有利子茶多酚酸性氧化形成TFs。

全自动在线固相萃取-高效液相色谱法快速测定中药复方中小檗碱的含量

目的:建立在线固相萃取-HPLC方法测定中药复方中小檗碱的含量。方法:通过双梯度高效液相系统中的一个泵(上样泵)实现净化,再经过阀切换将目标物从固相萃取柱中切换至分析柱中进行测定。上样泵以乙腈-500 mmol.L-1醋酸铵溶液为流动相,采用硅胶基质强阳离子交换小柱(4.6 mm×50 mm,300)为在线固相纯化柱,采用梯度洗脱方式进行样品净化;分析泵以乙腈-30 mmol.L-1磷酸二氢钾为流动相,采用Acclaim C18(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,柱温35°C,流速1.0mL.min-1,UV检测波长为345 nm。结果:小檗碱在1.24～124 mg.L-1线性关系较好(r=0.999),平均回收率99.5%。结论:方法快速、简便,专属性、重复性较好,测定结果准确。