高效液相色谱分离牛奶中己烯雌酚、己烷雌酚和双烯雌酚

采用基质固相分散技术，对牛奶中己烯雌酚（DES）、己烷雌酚（HEX）和双烯雌酚（DS）残留进行提取和净化处理，并通过高效液相色谱进行分离。研究雌激素在C18,Florisil和N-丙基乙二胺（PSA）填料的保留行为，并研究不同流动相和色谱柱对3种雌激素的分离。实验结果表明，流动相为20mmol／L磷酸／乙腈（42／58，V／V），流速1．0mL／min，紫外波长230nm。Xterra C18柱对3种雌激素分离最好。3种雌激素的平均回收率为84．1％～93．5％，相对标准偏差为3．5％～7．8％。DES、HEX和DS的检出限（LOD）分别为0．004，0．004和0．006mg／kg，定量限（LOQ）分别为0．01、0．01和0．02mg／kg；本方法可对样品进行灵敏、准确的定性定量分析。

水产品中己烷雌酚、己烯雌酚与双烯雌酚残留的毛细管电泳测定

建立了毛细管电泳-紫外检测法测定水产品中己烷雌酚（HXS）、己烯雌酚（DES）及双烯雌酚（DIES）残留的新方法。研究了缓冲体系的酸度、浓度、添加剂、分离电压、进样时间及温度等对组分分离的影响。在检测波长为200 nm,分离电压为20 kV,运行缓冲液为50 mmol/L硼砂-25 mmol/L氢氧化纳（pH12.3,含30%的N,N-二甲基甲酰胺）的条件下,3种目标组分在14 min内达到基线分离。HXS、DES与DIES的质量浓度与峰面积分别在2.0~120、1.0~100、1.0~100 mg/L范围内呈良好线性,相关系数（r2）分别为0.9998、0.9992、0.9994,检出限为0.3~0.9 mg/L。将该方法用于鲫鱼中3种雌酚类激素的检测,结果令人满意。

环境水样中己烯雌酚与双烯雌酚的离子液体分散液-液微萃取/高效液相色谱法测定

以离子液体（[Omim][PF6]）为萃取剂,采用冷诱导分散液-液微萃取对环境水样中的己烯雌酚和双烯雌酚残留进行富集。优化后的萃取条件：在pH3.0的条件下,以50μL离子液体为萃取剂,0.8 mL甲醇为分散剂,采用反相Extend-C18柱（5μm,250 mm×4.6 mm）,流动相为水-甲醇（体积比40∶60）,流速：1.0 mL/min,柱温：35℃,检测波长：245 nm。在优化的萃取条件下,己烯雌酚和双烯雌酚的线性范围均为2.5-200μg/L,检出限（S/N=3）为80 ng/L。应用于环境水样中己烯雌酚和双烯雌酚的检测,加标回收率为93%-98%,相对标准偏差为3.0%-5.4%,建立的方法简单、环保。

双烯雌酚人工抗原的合成及特异性抗体的制备

目的制备抗双烯雌酚(DIEN)特异性抗体,为进一步研制DIEN免疫检测试剂盒打基础。方法采用4-溴丁酸乙酯对DIEN进行活化,以活泼酯法与BSA偶联制备免疫原(DIEN-CP-BSA);经紫外扫描和飞行时间质谱扫描鉴定偶联情况;以DIEN-CP-BSA免疫Balb/c小鼠制备特异性抗体,间接(竞争)ELISA评价抗血清效价及特异性。结果本试验获得较高效价的DIEN抗血清,其效价达1∶64 000,双烯雌酚半抑制浓度(IC50)为62 ng/ml;抗血清与结构类似物己烷雌酚的交叉反应率仅为0.34%,与己烯雌酚和17-β雌二醇无交叉反应;利用该抗体建立的间接竞争ELISA检测法,双烯雌酚在10～300 ng/ml呈线性关系。结论本研究制备了抗双烯雌酚(DIEN)特异性抗体,为研究畜产品中DIEN残留及开发DIEN免疫检测试剂盒奠定了基础。

分子印迹固相萃取搅拌棒的制备及对复杂样品中双烯雌酚和己烷雌酚的萃取性能(英文)

以己烯雌酚为替代模板,利用整体材料的"原位"合成技术制备了分子印迹聚合物,并将其作为固相萃取搅拌棒的涂层(MIP-SBSE)制备了新的搅拌棒。详细考察了分子印迹聚合物制备条件中模板分子及功能单体用量对MIP-SBSE选择性萃取性能的影响,同时利用元素分析、扫描电镜和红外光谱对聚合物进行表征。以双烯雌酚(DS)和己烷雌酚(HS)为目标化合物,将MIP-SBSE与高效液相色谱-二极管阵列检测器联用,建立起复杂样品中DS和HS的分离分析方法。考察了吸附和解吸时间、解吸溶剂、离子强度和样品pH值等萃取条件对MIP-SBSE选择性萃取性能的影响。结果表明,在最佳萃取条件下,MIP-SBSE对DS和HS具有较高的选择性萃取性能,线性范围分别为1.0～400.0μg/L和5.0～400.0μg/L,利用氮吹再定容的方法,对DS和HS的检出限(S/N=3)分别可低至0.04和0.14μg/L。在对实际污水、蜂蜜和牛尿样品的分析中取得了良好的加标回收率,其值为61.3%～120%。所建方法具有简便、高选择性和灵敏等特点,可用于复杂样品中双烯雌酚和己烷雌酚的分析监测。

毛细管电泳-化学发光法测定牛奶中己烷雌酚、己烯雌酚和双烯雌酚

结合毛细管电泳高分离效能和化学发光高灵敏度优势,建立了一种灵敏可靠的测定牛奶中己烷雌酚、己烯雌酚和双烯雌酚的毛细管电泳-化学发光新方法.结果表明:己烷雌酚、己烯雌酚及双烯雌酚能显著抑制Ag(Ⅲ)-鲁米诺化学发光体系的化学发光,且发光强度与样品浓度在一定范围内呈良好的线性关系.在优化实验条件下,己烷雌酚、己烯雌酚及双烯雌酚在15 min内完成分离.己烷雌酚、己烯雌酚及双烯雌酚的浓度分别在0.6~60、0.5~40、1~60 mg/L范围内与化学发光信号峰高呈良好线性关系,检出限分别为:0.57、0.35、0.80 mg/L.RSD分别为:2.38%、1.90%、1.3%.对实际样品进行加标检测,结果令人满意.

双烯雌酚残留检测方法研究进展

双烯雌酚是一种人工合成的雌激素,因其残留对人体有明显的毒害,故而其在相关动物性产品中的残留受到世界各国的共同关注。目前,双烯雌酚残留检测方法主为仪器分析法,但其繁琐的分析步骤不适合药物的及时监控,而免疫学分析方法以其耗费低、特异强、灵敏高等优点,可作为兽药残留的筛选方法,因而具有广阔的应用前景。

双烯雌酚免疫抗原的合成与鉴定研究

本实验旨在合成和鉴定双烯雌酚(DEN)免疫抗原,通过双烯雌酚的酚羟基与琥珀酸酐反应,合成半抗原双烯雌酚-琥珀酰半酯(DEN-HS),采用混合酸酐法将其与载体蛋白BSA偶联制备免疫抗原(DEN-BSA)经紫外光谱分析和动物免疫试验证实免疫抗原合成成功,间接酶联免疫法分析证明其免疫鼠所获得的抗体与双烯雌酚有良好的特异性。实验成功合成了双烯雌酚免疫抗原,并获得了高效价的免疫血清,研究结果为免疫分析方法的进一步研究提供了试验基础。

双烯雌酚纯度标准物质的定值与不确定度评定

通过半制备高效液相色谱法制备了双烯雌酚纯度标准物质,采用液相色谱-质谱联用技术、核磁共振氢谱、碳谱和红外光谱对制得的原料化合物进行定性分析;然后采用HPLC多家实验室联合定值法对双烯雌酚纯度标准物质中的有机主成分含量进行测定,对双烯雌酚纯度标准物质的均匀性、稳定性进行检验,并对水分、灰分、挥发性物质、无机金属元素含量进行分析;最后对双烯雌酚纯度标准物质的不确定度进行评定。结果表明:该标准物质均匀性良好,稳定期不少于12个月;标准物质中水分、灰分、挥发性物质、无机金属元素的含量均小于0.1%;标准物质的定值结果为99.4%,扩展不确定度为0.6%(k=2)。

液相色谱-串联质谱法测定猪肝中痕量己烯雌酚、己烷雌酚和双烯雌酚

建立了液相色谱-串联质谱法测定猪肝中痕量己烯雌酚、己烷雌酚和双烯雌酚。以氟化铵为流动相添加剂,目标物响应值平均提高约10倍,向样品中加入1%(V/V)乙酸乙腈超声提取,提取液经分散固相萃取净化、水稀释后,采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱,以0.1 mmol/L氟化铵和乙腈为流动相,梯度洗脱分离,电喷雾电离源负离子模式和多反应监测模式检测,外标法定量。在0.4、0.8、4.0μg/kg添加水平下,3种目标物的加标回收率为89.5%~109.4%,相对标准偏差(RSD)为2.2%~7.8%,方法定量限为0.4μg/kg。本方法前处理过程无需浓缩,操作简便、灵敏度高、重现性好、环保节约,适用于猪肝中痕量己烯雌酚、己烷雌酚和双烯雌酚的定性与定量分析。

己烯雌酚和双烯雌酚对生物的影响及分析方法研究进展

己烯雌酚和双烯雌酚是结构相近的人工合成雌激素,曾广泛应用于妇科疾病的治疗和动物生长的促进,但如果长期使用则会对人体产生明显的毒害作用。本文详细阐述了己烯雌酚和双烯雌酚对水生生物和哺乳动物的影响,及其在环境和生物样品中残留量测定的预处理方法和仪器分析方法,并展望了己烯雌酚和双烯雌酚的研究方向,旨在为建立更加高效、安全、环保和便捷的己烯雌酚和双烯雌酚分析方法提供参考。

己烯雌酚及其代谢物在泥鳅体内的组织分布及药物代谢动力学研究

采用超高效液相色谱-串联质谱法,研究口服灌药给药方式下,己烯雌酚及其主要代谢物双烯雌酚在泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)体内的组织分布和药物代谢动力学。在(12±2)℃水温条件下,泥鳅口服灌药(以体质量计,下同)0.1、1.0、10.0 mg/kg后,其血浆、肌肉和肝脏中己烯雌酚含量-时间曲线关系符合一级吸收的二室开放动力学模型。以1.0 mg/kg为例,3种组织中己烯雌酚峰值水平肝脏最高、肌肉次之、血浆最低,平均消除速率分别为22.46、3.32、5.05μg/(kg·h),6、72、120 h后均降至检出限以下。双烯雌酚在血浆、肌肉和肝脏中变化趋势与己烯雌酚基本相似,在血浆、肌肉和肝脏中1、4、4 h达到最大浓度值,6、72、96 h降到检出限以下。采用DAS 2.0药物代谢动力学参数计算程序,计算有关药物代谢动力学参数。结果表明:己烯雌酚在泥鳅体内消除较快,血浆、肌肉、肝脏的含量-时间曲线下面积相差较大,说明不同组织对己烯雌酚的蓄积能力有所差别;己烯雌酚在泥鳅体内各组织分布广,消除快。在本实验条件下,己烯雌酚在0.1、1.0、10.0 mg/kg口服灌药剂量下,建议其消除期分别定为3、5、5 d;并且水温高时可适当缩短消除期,水温低时可适当延长消除期。

己烯雌酚及代谢物在鲤体内的组织分布及药物代谢动力学

己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)和双烯雌酚(Dienestrol,DS)均是经由人工合成的非甾体类雌激素,并且双烯雌酚经实验确证为己烯雌酚的代谢物[1—3],己烯雌酚和双烯雌酚均具有化学结构简单、并且通过化学合成容易获得、合成成本较低的特点[4,5]。在水产养殖中,己烯雌酚的主要用途是作为添加剂加入鱼类饲料中[6—9],刺激鱼类正常新陈代谢,增加鱼体内氮停留,提高鱼体内氨基酸合成蛋白的速度,最终达到促进鱼类生长的目的[10,11]。其中残留在鱼体内的己烯雌酚和双烯雌酚通过食物链进入人体,破坏人体正常生理平衡,

饲料中合成雌激素的测定方法研究

研究并建立GC-MS测定动物饲料中己烷雌酚（HEX）、己烯雌酚（DES）、双烯雌酚（DE）的方法。样品经乙醚和碱液提取经MAX固相萃取柱净化后衍生，进行GC-MS分析。己烷雌酚、己烯雌酚、双烯雌酚较好分离，得到浓度与峰面积成正比的工作曲线，相关系数r=0．999，RSD〈11．20％（n=6）。定量检出限分别为1、3和3×10^-7％，回收率66．3％～100．3％。本法具有灵敏、准确、样品前处理简单、抗干扰等优点，符合欧盟的限量要求。

模拟日光照射下新污染物双烯雌酚的复合光化学反应动力学及转化路径

内分泌干扰物双烯雌酚(Dien)等新污染物经常在环境表层水体中检出,并表现为多种解离形态,其光化学转化倍受关注.本文考察了Dien 3种解离形态的表观光解、羟基自由基(·OH)和单线态氧(^(1)O_(2))光氧化的反应动力学,评估了相应的环境持久性和贡献,比较了表观光解与光氧化反应的产物、路径.结果发现3种反应均能降解Dien,且光转化速率常数(k)与pH显著相关,这主要是由于Dien解离形态(i)从H_(2)Dien^(0)、HDien^(-)到Dien^(2-)发生变化,相应的k_(i)和量子产率(Φ_(i))存在差异;不同的去质子化程度也影响了其氧化反应活性,k·OH,i和k^(1)O_(2),i的变化规律一致.环境表层水体(pH=6~9,45°N)中Dien的复合光化学转化半减期t_(1/2,E)为1.84~9.16 h,^(1)O_(2)光氧化对其光化学转化贡献更大.表观光解主要引起了Dien的单羟基化;而·OH和^(1)O_(2)氧化分别发生了多羟基化,以及羟基取代位点的连续氧化反应.毒性试验表明,Dien具有光修饰毒性.这些发现有助于准确评价水环境中Dien的复合光化学归趋和风险.

固相萃取-高效液相色谱法检测饲料中4种雌激素

目的:建立SPE-HPLC分析方法同时测定饲料中己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚和雌二醇。方法:饲料样品经甲醇水溶液提取,正己烷脱脂,HLB固相萃取小柱净化后用HPLC分离测定。采用Xterra RP18色谱柱,乙腈-0.025% H3PO4(48:52)为流动相,检测波长228nm。结果:己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚和雌二醇的检测限分别为0.02、0.02、0.01、0.02μg/mL;线性范围均为0.1～5.0μg/mL;萃取回收率≥80.5%;日间精密度≤2.5%。结论:所建方法准确、灵敏、简便,适用于饲料中4种雌激素的分析。

气相色谱-质谱法同时测定饲料中6种雌激素类药物

建立了固相萃取/气相色谱-质谱法（GC-MS）同时测定饲料中己烷雌酚、己烯雌酚、双烯雌酚、雌酮、17β-雌二醇、雌三醇的检测方法。饲料样品经乙醚提取后,HLB固相萃取柱净化、衍生化后用气相色谱-质谱仪进行检测,外标法定量。结果表明,己烷雌酚在2.5-250 ng/mL,其它5种雌激素类药物在5-500ng/mL范围内具有良好的线性关系,相关系数不小于0.99,检出限为3-8μg/kg,样品的平均加标回收率为75.9%-96.3%。该方法检出限低,能够准确进行定性和定量测定,可同时测定饲料中的6种雌激素类药物。

动物肌肉中己烯雌酚、双烯雌酚、已烷雌酚和双酚A的测定

为了提高气相色谱-质谱法测定动物肌肉中己烯雌酚、双烯雌酚、己烷雌酚和双酚A残留时时样品的提取和净化效果,降低实验成本,建立了液液萃取的样品前处理方法,并对仪器测定方法进行了改进。选用DB-17MS毛细管柱,选择离子监测模式测定,双酚A-D16作内标物,内标法定量。4种检测物的检出限均能达到0.1μg/kg。在0.5,2.00,8.00μg/kg添加水平,回收率73.0%~119%,相对标准偏差(RSD)为3.5%~14%,检测物含量在1.0~80 ng/mL范围内,其含量与该化合物峰面积和内标物峰面积之比呈良好的线性相关,相关系数0.9992~0.9996。

黄烷双烯雌酚预防高脂血症的作用

以豚鼠探讨了黄烷双烯雌酚(FG)对血脂的影 响。 方法:4周龄雄性豚鼠以缺乏维生素C诱发高脂血症,给予添加了FG(0.5％或2.5％)的低浓度维生素C饲料,摄取28d后检测血中总胆固醇(TC)、LDL-C、HDL-C、TG及磷脂。对照组给予基础饲料(含有必要的维生素C)或低浓度维生素C饲料。