抗HBsAg─抗HRP双特异单克隆抗体的鉴定及初步应用

应用本实验组建立的分泌抗ＨＢｓＡｇ─抗ＨＲＰ双特异单克隆抗体的杂交─杂交瘤细胞株注射Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠腹腔，诱生腹水。经用双亲和柱层析，获得较纯双特异单克隆抗体，检测结果表明该抗体具有特异性好、亲和力高等特性。用以建立单克隆抗体与双特异抗体夹心法ＥＬＩＳＡ，初步用于临床血清标本中ＨＢｓＡｇ检测，取得满意效果。并与上海实业科华生化制品有限公司乙肝ＨＢｓＡｇ诊断试剂（卫生部推荐使用试剂）比较，符合率为１００％。此双特异抗体诊断试剂有望广泛用于临床血清标本ＨＢｓＡｇ的检测，为乙型肝炎的诊断提供价廉、快速、特异而敏感的诊断试剂。

分泌抗HBsAg-抗HRP双特异单克隆抗体杂交-杂交瘤的建株

用分泌抗-HBs Ag单克隆抗体的杂交瘤细胞的8-氮杂鸟嘌呤(8-AG)耐受株作为亲本细胞,与辣根过氧化物酶(HRP)免疫的BALB/c小鼠脾细胞进行第2次融合,从382个克隆上清中筛选出一株分泌抗-HBs Ag-抗-HRP双特异抗体的阳性孔。经多次克隆纯化建立3株杂交-杂交瘤,命名为Bs33、Bs38和Bs39,其抗体均属Ig G_1型。细胞染色体平均为113条。细胞反复冻存、复苏、传代仍稳定分泌双特异抗体。

抗HBsAg—抗HRP双特异单克隆抗体的提纯及应用

应用杂交—杂交瘤技术中的三瘤体（Trioma）法，获得的能稳定分泌抗HBsAg—抗HRP双特异单克隆抗体的细胞株BS－33所诱生的BALB／c小鼠腹水为材料，采用三种不同的层析方法（DEAE－52、羟基磷灰石及双亲和层析）均能提纯出该双特异抗体。用于临床检测HBSAg，与科华试剂检测结果符合率为100％。

抗尿激酶及人纤维蛋白双特异单克隆抗体体内导向溶栓作用的实验研究

用杂交杂交瘤技术制备抗尿激酶及人纤维蛋白双特异单克隆抗体—10H8;建立了稳定的家兔颈静脉溶栓模型;研究了10H8体内导向溶栓特征。研究结果显示,与单独尿激酶比较导向溶栓药(尿激酶/10H8)的体内溶栓效能及溶栓特异性均有显著提高。导向溶栓药的出现为实现临床溶栓的高效特异化带来希望。

尿激酶-抗尿激酶抗纤维蛋白双特异单克隆抗体复合物在小鼠体内的药物动力学

目的 :研究尿激酶 -抗尿激酶抗纤维蛋白双特异单克隆抗体复合物 (U K- BI9E1 1 )在小鼠体内的药物动力学特征。方法 :小鼠 iv U K- BI9E1 1 后 ,用平板法测定不同时间小鼠血清中尿激酶的活性 ,并计算其药物动力学参数。结果 :本方法重现性好 ,灵敏度高 ;UK- BI9E1 1 在血中的经时变化过程符合二室模型。与注射尿激酶所得的药物动力学参数相比 ,注射 UK- BI9E1 1后的 T1 /2α、T1 /2β均延长。结论 :BI9E1 1 与 UK形成复合物后 ,可延长尿激酶在血中的 T1 /2α、T1

抗纤维蛋白和抗尿激酶双特异单克隆抗体的研制

利用分泌抗纤维蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，经在８－氨鸟杂嘌呤内诱导突变，使其成为对ＨＡＴ敏感细胞株．以此突变株与用尿激酶免疫小鼠的脾细胞融合，经筛选获得一株分泌双特异单克隆抗体的杂交瘤细胞９Ｅｌｌ，在体外有明显的溶栓效果。经二年来检测证明，该细胞株是稳定的。

抗辣根过氧化物酶和猪囊尾蚴的双特异单克隆抗体研制

双特异单克隆抗体是采用杂交瘤技术、化学偶联、基因工程方法制备的能够识别两种抗原的抗体或抗体复合物。近年来双特异单克隆抗体在免疫学及免疫检测、生物学等其它领域有着广泛的应用前景。

抗人游离前列腺特异性抗原(f-PSA)单克隆抗体的制备及应用

目的建立产生抗人游离前列腺特异抗原单克隆抗体(f-PSA m Ab)的细胞株,获得抗体后建立抗人f-PSA化学发光免疫分析法(CLIA)并进行应用。方法采用杂交瘤技术获得2株稳定分泌抗f-PSA m Ab的细胞株,将细胞株用转瓶扩大培养并将上清液采用亲和纯化法获得抗体,ELISA测定抗体效价、特异性及表位,表面等离子共振法测抗体亲和力;建立双抗体夹心CLIA,采用标准曲线定量法对该体系进行分析性能评估,同时对426例临床血清样本进行检测[其中130例的总PSA水平在(4～10) ng/mL,为"诊断灰区"],评价该试剂与罗氏试剂的检测一致性。结果获得抗人f-PSA m Ab的杂交瘤细胞株(f-10-1、f-14-1)。用f-10-1和f-14-1建立的CLIA的检测范围为(0. 1～30) ng/mL,灵敏度为0. 05 ng/mL,检测结果的相对偏差均在±5%内,与癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)及结合态PSA(c-PSA)无交叉反应,该试剂与罗氏试剂相关系数达到0. 99,灰区样本阳性符合率、阴性符合率、总符合率均高于90%。结论成功制备了抗人f-PSA m Ab,建立了特异性定量检测人f-PSA的双抗体夹心CLIA。

抗抗CD3 ScFv单克隆抗体的制备及鉴定

目的:制备抗抗CD3 ScFv单克隆抗体并研究其生物活性。方法:分离纯化后的抗CD3 ScFv蛋白免疫BALB/c小鼠,采用传统杂交瘤技术制备抗抗CD3 ScFv单克隆抗体;采用ELISA和Western blot鉴定其亚类和抗原结合特异性;采用FACS测定抗抗CD3 ScFv单克隆抗体对Jurkat细胞特异活性。结果:成功筛选出一株能稳定分泌抗抗CD3 ScFv单克隆抗体的杂交瘤细胞株(10B7),其分泌的抗体亚类为IgG1。该抗抗CD3 ScFv单克隆抗体直标后可特异性结合抗CD3 ScFv蛋白和抗CD3抗体。结论:文中所研制的抗抗CD3 ScFv单克隆抗体具有与抗CD3抗体、抗CD3 ScFv蛋白特异结合的活性,在肿瘤导向治疗中抗CD3/抗肿瘤双特异抗体的亲和层析纯化、药代动力学监测等方面具有广泛的应用前景。

亲和层析法提纯双特异单克隆抗体

本文介绍了用亲和层析法从抗HRP-抗HBsAg双特异单克隆抗体的8B_6腹水中纯化,获得的四个组份蛋白,经过EL1SAg测定证实为抗HRP-抗HBsAs双特异单克隆抗体、抗HRP单抗、抗HBsAg单抗和无反应活性免疫球蛋白.因此,建议可以用亲和层析法简便地提纯出高纯度的双特异单克隆抗体.

基因——现代医学研究的主题

一、基因是现代医学研究的着眼点在人类单个细胞中,DNA具有相当大的编码潜力。就每个双倍体而言,双股DNA被分布在23对染色体之中,约含35×10~9个碱基对。实际上。

靶向HER2/neu受体酪氨酸激酶抗肿瘤药物研究进展

目的介绍近年来靶向作用于HER2/neu受体酪氨酸激酶抗肿瘤药物的作用机制和其研究进展。方法检索国内外相关资料,并进行汇总、分析和综述。结果针对HER2/neu受体酪氨酸激酶的靶向抗肿瘤药物有单克隆抗体、双特异抗体和小分子酪氨酸激酶抑制剂等多种类型。结论HER2/neu受体可以成为抗肿瘤有效的靶点;小分子酪氨酸激酶抑制剂将会给抗肿瘤药物的选择开辟广阔的空间。