羟基红花黄色素A减轻双环己酮草酰二腙小鼠髓鞘脱失的机制

背景:在中枢神经系统脱髓鞘疾病的发生发展过程中,小胶质细胞导致的神经炎症是主要病理特征,因此抑制炎症反应对缓解髓鞘脱失非常重要。羟基红花黄色素A有保护血脑屏障、抑制神经元的凋亡、改善神经功能的作用。目的:探究羟基红花黄色素A抑制双环己酮草酰二腙诱导的小鼠髓鞘脱失的作用机制。方法:①体内实验:将30只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、双环己酮草酰二腙组和羟基红花黄色素A组3组,后2组小鼠喂养含0.2%双环己酮草酰二腙的饲料6周建立脱髓鞘小鼠模型,正常组小鼠喂养正常饲料;在第4周末,给予羟基红花黄色素A组小鼠腹腔注射20 mg/(kg·d)羟基红花黄色素A,正常组和双环己酮草酰二腙组小鼠腹腔注射生理盐水,持续2周。旷场实验、高架十字迷宫实验评价小鼠的行为学变化;黑金染色和髓鞘碱性蛋白、降解髓鞘碱性蛋白免疫荧光染色检测胼胝体髓鞘脱失情况;离子钙结合接头分子1免疫荧光染色和ELISA法分别检测小胶质细胞的活化和炎症因子的表达;Western Blot法检测各组小鼠脑中Toll样受体4、髓样分化因子88、核因子κB p65蛋白的表达水平;②体外实验:采用脂多糖诱导建立BV2小胶质细胞炎症模型。将BV2细胞分为正常组、脂多糖组(1μg/mL)和脂多糖(1μg/mL)+羟基红花黄色素A(25μmol/L)组,采用ELISA法检测细胞上清中肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的表达水平。结果与结论:①对比正常组,双环己酮草酰二腙组小鼠焦虑情况严重、自主运动能力异常,胼胝体区髓鞘大量脱失,髓鞘碱性蛋白平均荧光强度显著降低,降解髓鞘碱性蛋白平均荧光强度显著升高,离子钙结合接头分子1阳性小胶质细胞数量增多,脑内白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平升高,Toll样受体4、髓样分化因子88、核因子κB p65的蛋白表达水平明显升高。羟基红花黄色素A治疗后,小鼠上述症状和各项指标均发生相反的变化。②羟基红花黄色素A显著抑制由脂多糖诱导的BV2小胶质细胞炎症因子肿瘤坏死因子α和白细胞介素6的表达。③上述结果说明羟基红花黄色素A能够显著改善双环己酮草酰二腙诱导的小鼠髓鞘脱失,作用机制与Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子κB p65信号通路抑制小胶质细胞活化介导的炎症反应有关。

双环己酮草酰二腙分光光度法测定火法冶炼镍基体料中铜

提出了一种新型材料——火法冶炼镍基体料中铜的分光光度测定方法。在pH8.9～9.4氯化铵-氢氧化铵缓冲溶中双环己酮草酰二腙(BCO)与Cu2+生成稳定的螯合物,螯合物的最大吸收波长位于600nm处。基体铁、镍以及铬、钴对铜的测定有干扰,但是,在试样用盐酸、硝酸和氢氟酸溶解和盐酸挥铬后,可以通过基体匹配和以柠檬酸隐蔽的方法消除。用本文确定的方法测定了4个实际样品中铜,相对标准偏差在1.4%～4.0%之间。采用原子吸收光谱法进行对照分析,同时选择了3个其他实验室进行验证分析,铜的结果基本一致。

双环己酮草酰二腙诱导精神分裂症小鼠模型胼胝体有髓神经纤维脱髓鞘的定量观测

目的进一步研究双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导精神分裂症动物模型胼胝体内有髓神经纤维的改变及与行为学改变之间的关系。方法 19只雄性C57BL/6小鼠被分为2组,空白对照组(n=10)和CPZ处理组(n=9),分别给予正常鼠饲料和混有0.2%(质量分数)CPZ的鼠饲料6周,运用旷场实验、高架十字迷宫实验、Morris水迷宫实验、探孔实验和转棒实验检测小鼠的行为学改变,运用免疫组化、透射电镜、体视学方法研究小鼠的胼胝体和其内有髓神经纤维的改变。结果 CPZ处理组小鼠在行为学实验中表现为:旷场实验中央区活动增多,高架十字迷宫开臂内活动增加(P<0.05),提示CPZ处理小鼠的焦虑行为减少;学习记忆能力、运动能力和基本探索行为并未受到影响(P>0.05)。透射电镜研究发现CPZ模型小鼠胼胝体存在有髓神经纤维脱髓鞘改变。透射电镜和体视学研究发现,CPZ模型小鼠胼胝体体积[(12.66±1.07)mm3]较空白对照组[(13.53±2.79)mm3]无显著性下降(P>0.05),但CPZ模型小鼠胼胝体有髓神经纤维长度密度和总长度[(0.70±0.17)km/mm3和(9.06±2.56)km]均较空白对照组[(1.47±0.17)km/mm3和(19.75±3.70)km]显著下降(P<0.05)。结论 CPZ模型可以出现类似精神分裂症样症状且胼胝体内有髓神经纤维存在脱髓鞘改变。

双环己酮草酰二腙分光光度法测定水样中铜(Ⅱ)

目前测定铜的主要方法有原子吸收光谱法、X射线荧光光谱法、新试铜灵萃取法和离子色谱法等，这些方法测定结果虽然准确可靠，但处理样品较为烦琐，而且受到使用仪器的限制。铜（Ⅱ）-双环己酮草酰二腙（BCO）显色体系，在pH7～9的溶液中，双环己酮草酰二腙主要以烯醇式Ⅰ状态存在。

少突胶质细胞前体细胞在双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘模型中的变化特点

目的观察神经胶质细胞在双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的脱髓鞘模型中的变化特点,探讨其与髓鞘再生的内在联系。方法选8周龄C57BL/6雄性小鼠,分为正常组、急性脱髓鞘组及髓鞘再生组。正常组每天饲养正常鼠粮;模型组小鼠饲养含有0.2%CPZ的混合鼠粮,连续饲养6周;髓鞘再生组在连续喂养6周CPZ鼠粮后,换用正常鼠粮2周。实验过程中通过卢卡斯快蓝染色及透射电镜技术判断脑组织胼胝体区髓鞘脱失及恢复程度,通过免疫组化及免疫荧光技术检测脑内NG2,Olig2和GFAP的表达来评估少突胶质细胞前体细胞及星形胶质细胞的变化特点。结果与正常组相比,急性脱髓鞘组胼胝体髓鞘脱失明显,Olig2、GFAP表达明显升高(P<0.05),侧脑室旁外侧隔核(LSD)NG2升高水平较胼胝体区(CC)更为明显(P<0.05,P<0.01);髓鞘再生组髓鞘有所修复,Olig2、GFAP表达仍高于正常组,但较急性脱髓鞘组有一定程度降低(P<0.05)。结论髓鞘损伤期少突胶质细胞前体细胞不能有效迁移至受损部位,修复期Olig2表达降低,星形胶质细胞持续高水平表达可能是髓鞘修复障碍的影响因素。

双环己酮草酰二腙诱导的精神分裂症样小鼠大脑皮质体积及有髓神经纤维的体视学观测

目的探讨双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的精神分裂症样小鼠大脑皮质体积及其内有髓神经纤维的改变。方法将6周龄的雄性C57BL/6小鼠分为CPZ组和对照组,CPZ组小鼠用含0.2%CPZ混合饲料饲育,对照组小鼠用标准的实验室饲料饲育。6周后进行行为学实验以证实精神分裂症样动物模型造模成功。然后运用透射电镜技术和体视学方法对小鼠大脑皮质体积和大脑皮质内有髓神经纤维进行定量研究。结果行为学实验中CPZ组小鼠出现精神分裂症样表现,体视学定量研究中CPZ组与对照组小鼠相比大脑皮质总体积没有显著性改变(P>0.05)。与对照组小鼠相比,CPZ组小鼠大脑皮质有髓神经纤维长度密度和总长度分别显著性降低了64.3%和68.9%(P<0.01),有髓神经纤维平均直径显著性增加了17.8%(P<0.01)。直径为0.2～<0.4μm、0.4～<0.6μm和0.6～<0.8μm的大脑皮质有髓神经纤维总长度与对照组小鼠相比分别显著性减少了4.317、3.313 km和0.940 km(P<0.01),CPZ组小鼠其他直径段大脑皮质有髓神经纤维总长度与对照组小鼠相比无显著性差异(P>0.05)。结论 CPZ组小鼠存在大脑皮质有髓神经纤维总长度的降低和平均直径的增加,有髓神经纤维总长度的降低主要是由小直径纤维丢失造成的。

双环己酮草酰二腙光度法测定废水中微量铜

双环己酮草酰二腙与铜离子在pH=9左右的氯化铵-氨水组成的缓冲溶液中形成稳定的蓝色络合物.测定了该络合物的吸收曲线,确定了最大吸收波长mλax=603.7 nm.在此波长下测得铜离子标准溶液的吸光度,所得数据以origin 6.0软件处理分析,得到标准曲线,其线性回归方程为:A=1.0×10-3+0.01268x,相关系数γ=0.9983,P<0.0001(n=4),铜离子的含量在0.10～20.00 mg/L之间时,吸光度与铜离子的浓度呈线性关系.该分析法可用于工矿企业含铜废水处理站的日常监测,其准确度、重现性、误差均能符合国家标准水质分析方法规定的范围.

双环己酮草酰二腙诱导小鼠髓鞘脱失的雌雄差异

目的比较双环己酮草酰二腙诱导雌雄小鼠髓鞘脱失的差异。方法取雌雄小鼠各10只分别为雌、雄鼠组,均喂养含有0.2%双环己酮草酰二腙的饲料6周建立脱髓鞘模型。用转杆测试仪检测两组小鼠的运动平衡与协调能力,用LFB-PAS染色法观察两组小鼠胼胝体髓鞘脱失情况,用免疫荧光染色法检测两组小鼠脑组织切片髓鞘碱性蛋白(MBP)荧光强度,用Western blot法检测两组小鼠脑组织匀浆MBP水平。结果雌鼠组小鼠运动时间(117.60±18.48)s、掉落次数(3.2±0.8)次、髓鞘脱失程度评分(2.20±0.27)分、脑组织切片MBP荧光强度65.20±6.46、脑组织匀浆MBP水平0.44±0.06,雄鼠组分别为(90.80±8.70)s、(4.6±0.9)次、(1.70±0.27)分、47.31±5.79、0.27±0.05。与雌鼠组相比,雄鼠组运动时间较短,掉落次数较多,髓鞘评分较低,脑组织切片MBP荧光强度较低,脑组织匀浆MBP水平较低,P均<0.05。结论在双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘小鼠模型中,雄鼠更容易脱髓鞘。

双环己酮草酰二腙分光光度法测定铁矿石中铜

在pH9．2～9．3的氨性缓冲溶液中，双环己酮草酰二腙（BCO）与铜（Ⅱ）生成蓝色络合物，其在最大吸收波长600nm处吸光度与铜的浓度符合朗伯比尔定律，计算了铜的质量分数。考察了试样的分解、试料量、pH值、双环己酮草酰二腙用量、显色温度及显色时间、共存元素以及不同参比法等对测定的影响。在铜含量0．015％～0．99％范围，方法的相对标准偏差（RSD）为0．46％～3．8％（n=5），回收率为97．5％～105．0％。

不同双环己酮草酰二腙剂量诱导小鼠行为学改变及海马CA1区和DG区内有髓神经纤维改变

目的探讨双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)喂养动物模型作为精神分裂症动物模型的合适剂量和CPZ剂量、海马脱髓鞘改变和行为学改变间的关系。方法使用0.2%、0.3%、0.4%(质量分数)3种剂量CPZ喂养C57BL/6鼠6周,与控制组比较体质量、生存时间和行为学的改变情况,运用免疫组化和光密度比较各组小鼠海马CA1区和DG区内髓鞘改变情况,使用体视学方法研究0.2%CPZ组小鼠海马分区内有髓神经纤维改变情况。结果 0.4%CPZ组小鼠生存时间显著性低于控制组(P<0.01),控制组、0.2%CPZ组和0.3%CPZ组的生存时间无统计学差异(P>0.05)。CPZ喂养组小鼠体质量显著性低于控制组(P<0.05),且剂量越高,体质量丢失越严重。0.2%CPZ组小鼠旷场实验在中央区域的活动显著性增高(P<0.05)。0.2%CPZ组和0.3%CPZ组小鼠海马CA1区MBP染色的平均光密度值显著性低于控制组(P<0.01),0.2%CPZ组小鼠海马DG区MBP染色的平均光密度值显著性低于控制组和0.3%CPZ组(P<0.01)。控制组和0.2%CPZ组海马CA1区和DG区体积无显著性差异(P>0.05)。0.2%CPZ组海马CA1区和DG区内有髓神经纤维长度密度和总长度显著性低于控制组(P<0.05)。结论 0.2%CPZ为用于诱导精神分裂症动物模型的适合CPZ剂量,0.2%CPZ喂养6周可导致小鼠海马CA1和DG区内有髓神经纤维脱髓鞘。

双环己酮草酰二腙(BCO)分光光度法测定钢铁中铜

二价铜在pH=9．0-9．5硼酸钠缓冲溶液中与双环己酮草酰二腙（BCO）生成蓝色络合物，其在最大吸收波长600nm处吸光度与铜的浓度符合比尔定律，据此建立了测定铜的方法。实验了铜（Ⅱ）的显色条件、稳定时间、干扰元素的干扰量及干扰元素的排除方法等，实验证明，方法的相对标准偏差（RSD）为1．1％-2．4％，所测结果与标准值基本一致，方法已成功应用于铸铁、合金钢中0．01％-3．0％铜含量的测定。

流动注射双环己酮草酰二腙光度法测定水中的铜

为了克服传统分析法操作繁琐、分析时间长的缺陷,将流动注射分析技术和双环己酮草酰二腙光度法相结合,建立了测定工业废水中铜的快速、简便分析方法。方法的线性范围为0 mg/L～10 mg/L,分析速率可达55次/h,应用于工业废水样的测定,加标回收率在95.5%～104.0%之间,结果令人满意。

双环己酮草酰二腙光度法测定合金中高含量铜

以双环己酮草酰二腙(BCO)光度法快速测定合金中高含量铜,并对最佳显色条件进行了探讨。结果表明:在pH 8.5～10.0的氨水-氯化铵缓冲溶液中,铜与BCO形成蓝色络合物,该络合物的最大吸收波长为600nm;BCO浓度为0.1g/L;显色温度为20℃;显色时间是10min;柠檬酸铵用量为1mL。铜在0.4～4.0μg/mL范围内符合比尔定律,表观摩尔吸光系数ε=1.6×104 L.mol-1.cm-1。方法应用于高温合金及铜合金标准样品中高含量铜的测定,测定值与认定值相符,相对误差<1.0%,相对标准偏差<6.5%。

双环己酮草酰二腙诱导脱髓鞘模型小鼠情绪及神经递质的变化

目的观察双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导脱髓鞘模型小鼠情绪及神经递质的变化特点,探讨髓鞘脱失和再生过程中情绪变化的可能原因。方法选36只C57BL/6雄性小鼠,分为3组,正常对照组予以正常饲料14周;慢性脱髓鞘组予以含0.2%CPZ粉末的饲料14周;髓鞘修复组先用含0.2%CPZ粉末的饲料12周,再换用正常饲料2周。采用LFB染色、免疫荧光及透射电镜技术观察胼胝体区髓鞘以及星形胶质细胞的变化情况;通过体质量、旷场、高架十字迷宫及悬尾实验检测小鼠行为学的变化;利用酶联免疫吸附法和高效液相色谱-电化学检测法(HPLC-ECD)测定血清肾上腺素、去甲肾上腺素、五羟色胺、多巴胺、二羟基苯乙酸和五羟基吲哚乙酸的浓度。结果慢性脱髓鞘组和髓鞘修复组胼胝体区髓鞘明显脱失(P<0.01),两组GFAP的表达明显升高(P<0.01)。慢性脱髓鞘组小鼠旷场实验总路程、中央路程及中央区活动时间均较其他2组明显减少(P<0.05);在高架十字迷宫中,慢性脱髓鞘组小鼠开臂滞留时间百分比(OT%)和开臂进入次数百分比(OE%)较正常对照组减少(P<0.05);慢性脱髓鞘组及髓鞘修复组小鼠在悬尾实验中的静止时间较正常对照组增加(P<0.05)。HPLC-ECD及ELISA测得慢性脱髓鞘组血清NE和5-HT的浓度与正常对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 CPZ诱导的脱髓鞘模型小鼠表现出焦虑、抑郁等行为变化,可能与脑组织的髓鞘脱失以及脱髓鞘环境下神经递质的含量变化有关。

二氢丹参酮Ⅰ(DHTS1)通过抑制双环己酮草酰二腙诱导的小鼠小胶质细胞激活减轻髓鞘损伤

目的探讨二氢丹参酮I(DHTS1)对双环己酮草酰二腙(cuprizone)诱导脱髓鞘保护作用的机制。方法DHTS1溶解于5 g/L羧甲基纤维素钠(CMC-Na)中,饲喂小鼠含2 g/L cuprizone的饲料制备脱髓鞘模型,给予DHTS1处理,实验动物随机分为CMC-Na正常组、CMC-Na联合cuprizone处理组、DHTS1联合cuprizone处理组。通过固蓝(LFB)组织化学染色、免疫荧光组织化学染色检测髓鞘碱性蛋白(MBP)和髓鞘蛋白脂(PLP)的表达判断髓鞘完整性,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡;免疫荧光组织化学染色检测小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白钙离子结合接头蛋白分子1(Iba-1)、CD86、CD163的表达确定小胶质细胞极化情况。脂多糖(LPS)极化SIM-A9小胶质细胞,DHTS1处理,实验分为CMC-Na对照组、DHTS1对照组、CMC-Na联合LPS处理组和DHTS1联合LPS处理组。流式细胞术检测CD16/32、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)阳性细胞比例。结果与CMC-Na联合cuprizone模型组比较,DHTS1处理明显减少cuprizone诱导的小鼠大脑胼胝体区髓鞘脱失,减少细胞凋亡,减少Iba-1^+阿米巴样小胶质细胞的面积,减少CD86^+细胞数目,增加CD163^+细胞数目。与CMC-Na联合LPS处理组相比,DHTS1明显减少CD16/32^+、TNF-α^+、iNOS^+小胶质细胞的百分比。结论DHTS1可以抑制cuprizone诱导的脱髓鞘和细胞凋亡,可能与DHTS1调节小胶质细胞极化,减轻中枢神经系统炎症反应有关。

小胶质细胞在双环己酮草酰二腙诱导的急性脱髓鞘小鼠模型中的动态变化及意义

目的探讨小胶质细胞在双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导的急性脱髓鞘小鼠模型中的时空演变及其意义。方法选取C57BL/6雄性小鼠32只,随机分为对照组以及髓鞘脱失2(2周组)、4(4周组)、6周组(6周组),每组8只。对照组给予正常饲料饲喂,另3组分别给予含0.2%(质量分数)CPZ的混合饲料饲喂2周、4周和6周。采用ELISA法检测各组脑组织干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,采用蛋白印迹实验检测脑组织髓鞘碱性蛋白(MBP)表达水平,采用免疫荧光染色观察MBP、Iba-1、Iba-1+/诱导型一氧化氮合酶(iNOS+)、Iba-1+/精氨酸酶1(Arg1+)和Iba-1+/MBP+表达。结果与对照组比较,CPZ喂食2周后,小鼠胼胝体区髓鞘开始脱失,并随喂食时间延长而加重(P<0.01)。喂食4周后,髓鞘损害区小胶质细胞明显活化,并向损害区迁移和聚集(P<0.01),表达iNOS的M1型小胶质细胞和表达Arg1的M2型小胶质细胞增加。与对照组比较,CPZ喂食4~6周小鼠脑组织小胶质细胞与MBP共定位。ELISA结果显示,喂食2周后,小鼠脑组织IFN-γ水平升高(P<0.01);喂食4周后,脑组织IL-1β水平表达升高(P<0.01);而TNF-α水平无统计学变化(P>0.05)。结论CPZ喂食可导致严重的髓鞘脱失,并触发小胶质细胞活化;小胶质细胞的炎性作用和吞噬作用共存,但髓鞘仍然脱失严重。改变小胶质细胞极化表型,增加神经营养因子的释放,促进其有效吞噬髓鞘碎片,改善局部炎症环境,可能对减轻髓鞘脱失、促进轴突再生具有重要意义。

大麻素对双环己酮草酰二腙诱导的脱髓鞘模型小鼠髓鞘的修复作用

目的:探讨大麻素(WIN55212-2)对双环己酮草酰二腙(cuprizone)诱导的脱髓鞘模型小鼠髓鞘的修复作用,阐明其可能机制。方法:选取C57BL/6小鼠95只,随机分为空白对照组、模型组(0.2%的cuprizone饲料喂养6周)、二甲基亚砜(DMSO)组(0.2%cuprizone饲料喂养3周后开始腹腔注射等量的DMSO混合液)和治疗组(0.2%cuprizone饲料喂养3周后开始腹腔注射1mg·kg-1 WIN55212-2)。采用黑金Ⅱ髓鞘染色技术对小鼠髓鞘组织染色,观察其组织形态表现;采用Western blotting法检测小鼠大脑组织中结侧蛋白(JN)、髓鞘碱性蛋白(MBP)和转录因子Nkx 2.2蛋白表达水平。结果:黑金Ⅱ髓鞘染色,空白对照组小鼠大脑胼胝体区域有明显的着色,模型组小鼠大脑胼胝体区着色较浅。与空白对照组比较,模型组小鼠大脑组织中JN和MBP蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与模型组和DMSO组比较,治疗组小鼠大脑组织中JN和Nkx2.2蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01)。结论:大麻素可能通过转录因子Nkx2.2蛋白促进cuprizone诱导的脱髓鞘模型小鼠大脑组织中JN蛋白表达,促进髓鞘再生和修复。

磁疗对双环己酮草酰二腙诱导脱髓鞘小鼠的神经保护作用

目的:探讨磁疗对双环己酮草酰二腙(cuprizone,CPZ)诱导脱髓鞘小鼠的神经保护作用及潜在机制。方法:将30只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、CPZ组和磁疗组,每组10只。CPZ组和磁疗组喂养0.3%CPZ的混合饲料建立脱髓鞘模型,磁疗组小鼠在实验第2周开始接受磁场(50Hz,10mT,每天20min,每周6d,共4周)的干预。每周称重记录各组小鼠的体质量。实验第5周末,利用转棒试验评估小鼠的运动功能;处死小鼠,免疫组化染色检测海马区的髓鞘碱性蛋白(MBP)和酶联免疫吸附(ELISA)测定脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果:第5周末,CPZ组和磁疗组小鼠体质量均明显低于正常组(P<0.01);磁疗组小鼠体质量有增长趋势,但与CPZ组相比差异不显著(P>0.05)。与正常组相比,CPZ组小鼠运动功能明显下降(P<0.05),海马区发生明显脱髓鞘改变、表现为MBP含量显著减少(P<0.001),BDNF表达下降(P<0.01)。与CPZ组相比,磁疗组小鼠的运动障碍得到改善(P<0.05),髓鞘脱失有好转,MBP含量和BDNF表达均明显增多(P<0.05,P<0.01)。结论:磁疗具有改善CPZ模型小鼠的神经功能缺损和促进病灶内髓鞘修复的作用,其机制可能与上调脑内BDNF的表达有关。

双环己酮草酰二腙分光光度法测定锰铁合金、锰硅合金和金属锰中铜

锰铁合金、锰硅合金和金属锰中铜在多数钢铁冶炼中属于有害元素,会降低钢材机械性能,加热时导致钢材表面氧化,为此建立了双环己酮草酰二腙分光光度法测定锰铁合金、锰硅合金和金属锰中铜的方法。以硝酸、氢氟酸分解样品,利用高氯酸冒烟提供高温和强氧化作用,硅与氢氟酸反应生成四氟化硅挥发除去,碳被氧化分解或生成微小碳粒达到铜完全释放。在盐酸介质中,以氯化铵-氢氧化铵缓冲溶液(pH 9.2)控制溶液pH值为8.9~9.5,铜在1 min内即可与双环己酮草酰二腙完全生成稳定的螯合物。实验结果表明,通过在系列标准溶液中进行锰、铁基体匹配,同时在系列标准溶液和样品测量溶液中加入柠檬酸作掩蔽剂,并针对不同锰、铁含量的显色溶液配制专门的参比溶液,可以消除锰、铁基体效应的影响。在铜的校准曲线线性范围内,线性相关系数为0.999 1;铜的检出限为0.006 6μg/mL。实验方法用于测定锰铁合金、锰硅合金和金属锰中铜,结果的相对标准偏差(RSD,n=11)为5.4%~9.5%,回收率为97%~105%;按照实验方法测定3个锰铁合金和1个锰硅合金标准样品中铜,结果与认定值相吻合;选择6个实验室进行了验证试验,各实验室间结果基本一致。