人乳头状瘤病毒诱导食管上皮永生化细胞的双相分化

研究中期永生化食管上皮细胞的表型、细胞遗传学和部份基因的改变 ,以阐明癌前病变的特征。SHEE是该院用人乳头状瘤病毒HPV18E6E7诱导的永生化上皮 ,传至 6 1代已开始有少量细胞恶性转化。对永生化中期 31代培养细胞用相差显微镜检查细胞形态改变和细胞生长状态 (细胞接触抑制和锚定生长 ) ;流式细胞仪检测细胞周期 ;做染色体众数分析 ;多重PCR检查c-myc、p5 3、bcl- 2和ras等基因。免疫组化检查细胞角蛋白和鬼臼毒素荧光标记检查肌动蛋白F(F -actin)。软琼脂培养的集落细胞接种SCID小鼠检查成瘤性。Westernblot方法检测细胞内HPVE6表达蛋白。结果 :培养细胞有两种不同分化形态 ,分化差的基底细胞和分化好的鳞状上皮 ;前者角蛋白和F -actin极少 ,后者含量丰富 ;细胞接触抑制和锚锭生长特性减弱。分析 10 0个细胞染色体众数分二干系 ,5 6条 (占 30 % )和 6 1条 (占 2 4% )染色体 ,核型分析属于超二倍体 ,亚三倍体。多重PCR检查 :c -myc、p5 3基因上调 ,bcl- 2和ras基因阳性。用优选生长在软琼脂上的克隆细胞接种SCID小鼠 ,未成瘤 ;HPV18E6表达蛋白阳性。以HPV18E6E7诱导的食管永生化上皮 31代细胞形态出现了双向分化 ,根据其形态表型 ,双染色体众数的细胞遗传学改变和某些癌基因上调等特性 。

双相紫外分光光度法同时测定盐酸普鲁卡因和对氨基苯甲酸

目的 建立双相紫外分光光度法同时定量测定盐酸普鲁卡因及其分解产物对氨基苯甲酸 (PABA)。方法 根据普鲁卡因和PABA的不同溶解性 ,将盐酸普鲁卡因注射液置于水和氯仿组成的双相中。分布平衡后 ,分别在 2 6 5 5、2 96 5nm处测定紫外吸光度。结果 盐酸普鲁卡因和PABA线性范围分别是 5～ 2 5mg(r=0 9999)和 2 0～ 80 0 μg·ml-1 (r=0 9999)。盐酸普鲁卡因的回收率为 99 97% ,RSD =0 35 % ;PABA为 1 0 0 1 4 % ,RSD =0 4 6 %。结论 双相紫外分光光度法具有设备简单、操作便捷的优点 。