El Tor霍乱弧菌双精氨酸转运系统功能单位的分析研究

本文旨在分析El Tor霍乱弧菌双精氨酸转运(Tat)系统的基因簇构成,对其功能进行分析,确定其最小功能单位。通过与大肠埃希菌Tat系统基因簇的基因同源性比较,推测霍乱国际测序标准株N16961的Tat系统基因簇构成;分别对霍乱弧菌Tat系统的基因簇进行单基因缺失、双基因缺失和全基因缺失,建立缺失株和回补株,并与野生株进行表型比较,进一步分析霍乱弧菌Tat系统的基因构成和最小功能单位。结果显示,霍乱弧菌Tat系统基因簇由tatA、tatB、tatC、tatA_2 4个基因构成,其中tatA、tatB和tatC基因位于霍乱弧菌Ⅰ号染色体,tatA_2基因位于霍乱弧菌Ⅱ号染色体。tatB和tatC基因缺失影响霍乱弧菌Tat系统功能,tatA或tatA_2单基因缺失后均可基本保持Tat系统功能,但同时缺失则导致菌株Tat系统功能丧失。提示霍乱弧菌Tat系统最小功能单位是tatA-tatB-tatC或tatA_2-tatB-tatC,tatA与tatA_2功能重复。

双精氨酸转运系统是布鲁氏菌重要的抗胁迫和毒力决定因子

布鲁氏菌病是人、家畜等哺乳动物感染布鲁氏菌而导致的重要的人兽共患病,在世界范围内多有发生。此病不仅给养殖业带来严重的经济损失,还有引发严重公共卫生问题的风险。布鲁氏菌可通过呼吸、进食等途径进入机体,随后被巨噬细胞所吞噬;它是典型的胞内菌,可以在巨噬细胞中存活并复制,进而可以长期存在于体内。

肠侵袭性大肠埃希菌Tat蛋白运输系统与其生理功能关系研究

目的构建TatABC基因缺失株,并探讨其与肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)生理功能的关系。方法利用一步法基因缺失方法,敲除EIEC菌株的TatABC基因,探索该基因对EIEC形态、生长、生化及跨膜转运等生理功能的影响。结果TatABC基因缺失株的EIEC在镜下呈链状排列,在LB培养基上生长显著变慢;生化反应无明显变化;在厌氧条件下,由于不能转运TMAO还原酶,失去了在M9培养基上下生长的能力。结论 EIEC的Tat蛋白运输系统与其生理功能密切相关。

双精氨酸转运(Tat)系统及其在大肠杆菌分泌表达重组蛋白中的应用

常见的分泌途径(Sec途径)是细菌中蛋白分泌跨膜转运的主要途径,而双精氨酸转运(Tat)则是另外一个蛋白分泌跨膜转运系统,该系统的特征是在分泌蛋白的信号肽中含有一个高度保守的双精氨酸基序。与Sec途径相比,Tat系统的显著优点是它只分泌已正确折叠的蛋白,而未正确折叠的蛋白则不能通过该系统分泌,这样就保证了分泌产物在结构上的正确性。因此,研究利用Tat信号肽牵引重组蛋白通过Tat系统进行分泌跨膜转运在重组蛋白的表达方面具有很好的应用前景。