双缩脲试剂不同使用方法探究

通过开展定性和定量实验,探究高中生物学教材及教学中常提到的双缩脲试剂的四种不同使用方法对蛋白质检测效果的影响。实验结果表明,四种方法均可用于蛋白质的定性检测,但“向蛋白质溶液先加双缩脲B液再加双缩脲A液”的方式不适用于蛋白质的定量检测。

改良双缩脲法测定血清总蛋白

目的研究建立改良双缩脲试剂二点速率法测定血清总蛋白的方法,以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法进行方法参数选择试验、方法学评价试验和方法间比较试验。结果改良试剂反应液吸收峰530～560nm,最大峰值540nm。在反应进行的初期,吸光度变化率与蛋白质浓度成正比,可用速率法测定,线性范围142g/L。高、低值血清的批内、批间、日间和总CV均<5%。回收率为98.6%～100%,平均99.3%。检测限0.4g/L。血红蛋白9.5g/L以下、胆红素370μmol/L以下、三酰甘油200.0mmol/L以下、葡聚糖30g/L以下无显著性干扰。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关,回归方程:y=2.7147+0.9658x,r=0.9633,P=0.000。配对t检验:t=0.907,P=0.370。测定高脂、黄疸、含葡聚糖标本两种方法间有非常显著性差异。结论采用改良法单试剂二点速率法测定血清总蛋白,能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰。

双缩脲法检测大豆分离蛋白中蛋白质的研究

采用双缩脲法检测大豆分离蛋白中蛋白质的含量,当蛋白质含量在0～12.0mg范围内时,线性关系比较好,变异系数小,重复性好。与凯氏定氮法比较,二者差异不显著。双缩脲法操作简单,对环境无污染,是一种非常有前途的测定大豆蛋白质的方法。

血清总蛋白测定不同双缩脲试剂及标准化评价

在１２家医院考察了国内三种高ＮａＯＨ浓度的双缩脲试剂的应用效果。用这些双缩脲试剂测定的血清总蛋白结果偏高，精密度不如Ｄｏｕｍａｓ配方。用Ｄｏｕｍａｓ双缩脲试剂测得蛋白原始标准（ＳＲＭ９２７ａ）和二份蛋白次级标准的吸光系数均为０．２９８２±０．００１６Ｌｇ￣（－１）（５４０ｎｍ），２５Ｃ时呈色曲线在６０分钟达到平衡。用吸光系数法测定三份定值冻干质控血清的总蛋白值，均较厂方标定值略高。表明有必要统一双缩脲试剂配方和方法，吸光系数法可作为蛋白次级标准的定标方法。

双缩二氨基硫脲类化合物的合成与结构

合成了 1,5 二 (4 甲氧基苯甲醛 )双缩二氨基硫脲 (1) ,1,5 二 (对二甲基氨基苯甲醛 )双缩二氨基硫脲 (2 ) ,1,5 二 (2 呋喃甲醛 )双缩二氨基硫脲 (3)三个化合物 ,并通过元素分析、红外光谱、核磁共振、质谱进行了结构表征 .首次报道了双缩二氨基硫脲类化合物的13CNMR数据 ,并发现在溶液中由于构象异构体或二聚体的存在 ,该类化合物的部分13CNMR谱峰出现矮而宽、不易检测的特征 .配体 1形成的晶体为单斜晶系 ,具有P2 1/c空间群 ,a =1 4363(3)nm ,b =1 2 62 2 (2 )nm ,c =1 0 970 (2 )nm ,β =10 1 730 (10 )° ,V =1 9472 (6)nm3,Z =4,Dc=1 318g/cm3,μ =0 193mm-1,F(0 0 0 ) =816,R1=0 0 5 60 ,wR2 =0 14 96.由于分子间弱氢键力的作用 。

间硝基苯乙酮双缩硫代对称二氨基脲Cu(Ⅰ)、Zn(Ⅱ)、Fe(Ⅱ)Sn(Ⅱ)、Pb(Ⅱ)配合物的直接电化学合成

u(Ⅰ), Zn(Ⅱ), Fe(Ⅱ), Sn(Ⅱ), Pb(Ⅱ) complexes of 1,5 bis(3 nitroacetophenone) thiocarbohydrazone were synthesized by the electrochemical oxidation of anodic metal in non aqueous solvents. The complexes were characterized by elemental analysis, IR UV, magnetic measurement, and molar conductivity etc.

双缩脲法测定荞麦蛋白质

本文介绍了一种双缩脲试剂和分析方法。探讨了如何正确使用它测定荞麦蛋白质含量。结果表明:①这种试剂和方法适用面宽、精密度高、回收率>95%,采用牛血清蛋白为标准物质制作标准曲线时,分析结果中的蛋白质为碱液可溶性蛋白质,采用代表性很强的样品(已知其总蛋白质含量)为标准物质制作标准曲线时,分析结果中的蛋白质为总蛋白质。②白花荞麦仁中总蛋白质含量为11.6%,脱除麦仁表层所留下的麦仁内部的蛋白质含量为5.6%,荞麦仁的碱液可溶蛋白的含量为7.6%,脱除麦仁表层所留下的麦仁内部的减液可溶的蛋白质含量为2.5%。

双缩脲法检测奶粉中总蛋白质快速检测试纸的研制

研制了能够快速测定奶粉中总蛋白质含量的双缩脲检测试纸。将试纸于1.5倍标准双缩脲试剂浓度的溶液中浸泡10min,60℃干燥15min,滴加样品反应10min,放入光电检测仪,在波长560nm下检测。结果表明,本法线性范围为0～20.0mg/mL,检出限为0.85mg/mL,加标回收率为96.84%～99.23%,测定相对误差为1.01%～1.91%。用本法和凯氏定氮法同时对奶粉样品进行检测,经检验二者测定结果之间差异无统计学意义。该法操作简单、检测迅速、准确度和灵敏度高,适合奶粉中总蛋白质的现场快速检测。

双缩脲反应比色测定兔脑垂体注射液中多肽的含量

目的:建立兔脑垂体注射液中多肽的测定方法。方法:采用总蛋白试剂盒(TP)双缩脲比色法在540 nm处测定含量,并做回收率对照试验。结果:平均回收率为97.5％,RSD为1.6％。结论:该方法简便、快速、准确可靠。

双缩脲法测定乳中酪蛋白含量

双缩脲法测定乳中酪蛋白是作为一种判定牛乳质量的指标。酪蛋白含有肽键 ,肽键在碱性溶液中可与双缩脲试剂中的铜离子形成紫红色化合物 ,用光谱测定法 ,可求得酪蛋白含量。

基于2,3-丁二酮双缩氨基硫脲为中性载体的新型银离子选择性电极的研究

研究了基于2,3-丁二酮双缩氨基硫脲为中性载体的聚氯乙烯(PVC)膜电极,该电极对银离子(Ag+)具有优良的电位响应性能.在pH=3.0的NaOH-HNO3体系中,该电极对Ag+电极电位呈现近能斯特响应,线性响应范围为3.0×10-6～1.0×10-2mol/L,斜率为52.6mV/decade(20℃),检测下限为1.0×10-6mol/L.相对于常见的阳离子,该电极对Ag+表现出良好的选择性.采用交流阻抗技术研究了电极响应机理,并将电极初步应用于回收率实验,结果令人满意.

新型双缩硫代对称二氨基脲类衍生物的合成和生物活性测试

探讨了硫代对称二氨基脲与10种含三唑基或苯并三唑基的取代苯乙酮的缩合反应,制得10种新的1,5-二取代苯乙酮双缩硫代对称二氨基脲类化合物,产物经IR,1H NMR,13C NMR和MS及元素分析确证.并对这些化合物的抗真菌和抗病毒活性进行了测试.

可膨胀石墨催化合成季戊四醇双缩苯甲醛

以可膨胀石墨为催化剂研究了季戊四醇双缩苯甲醛的合成条件,其最佳反应条件为:苯甲醛与季戊四醇的摩尔比为1∶0.75,反应时间为105min,溶剂为甲苯,产率可达95.63%。

血清总蛋白双试剂双缩脲法消除脂浊和胆红素的干扰

建立血清总蛋白双试剂双缩脲自动分析法。以氢氧化钠和硫酸钠溶液作第一试剂 ,浓缩双缩脲试剂作第二试剂 ,在自动分析仪上用两点终点法测定。结果 ,在 0 6mol/L氢氧化钠中加入 7mmol/L的硫酸钠使脂浊血清的空白吸光度稳定 ,蛋白质与双缩脲双试剂的反应在 7分钟内完成 ;线性范围 0～ 140g/L ,平均回收率 99 8% ,低蛋白含量和正常蛋白含量的批内CV为 0 5 2 %和 0 40 % ,批间CV为 0 80 %和 0 77% ;双试剂法与参考方法比较 ,r =0 9984,Y=0 982 5X+0 783,t =0 5 2 2 ,P>0 5 ,n=90 ;脂肪乳糜、高胆红素、血红蛋白颜色对测定无干扰。结果表明 :双试剂法能去除样品中脂浊、高胆红素及血红蛋白的干扰 ,具有很好的准确度和精密度 ,适合在自动分析仪上使用。

无溶剂微波辐射合成双缩二氨基硫脲类化合物

在无催化剂无溶剂微波辐射下用芳香醛和 1,3 二氨基硫脲合成了双缩二氨基硫脲类化合物 ,为该类化合物提供了一种新的简便合成方法 .

邻苯三酚红钼络合法与双缩脲比色法测定嘌呤霉素肾病大鼠尿中总蛋白浓度的比较

目的:探讨临床上新近推广的邻苯三酚红钼络合法与双缩脲比色法的相关性和偏倚,旨在评价其测定大鼠尿蛋白的可靠性,以建立一种快速、简便、可靠的大鼠尿蛋白测定方法。方法:收集15例正常对照大鼠以及35例不同时间点嘌呤霉素肾病大鼠24h尿液标本,采用双缩脲比色法和邻苯三酚红钼络合法进行尿总蛋白定量,结果分别采用Pearson相关、Passing-Bablok回归和Cusum方法检测回归偏倚,偏倚分析采用Bland-Altman法。结果:Pearson相关性分析结果显示,邻苯三酚红钼络合法测定值与双缩脲比色法测定值显著相关(r=0.9942,P<0.0001)。Passing-Bablok回归分析显示,邻苯三酚红钼络合法测定值与双缩脲比色法测定值的回归方程为Y=1.0922X-0.3771(Y表示双缩脲比色法,X表示邻苯三酚红钼络合法),线性回归的Cusum检验证实线性回归偏倚无统计学意义(P>0.05),Bland-Altman偏倚分析结果示,邻苯三酚红钼络合法与双缩脲比色法测定值的平均偏倚为-0.1。结论:邻苯三酚红钼络合法具有灵敏度高、重复性好、标本用量少、样品不需要预处理并适用于自动化分析的特点,推荐该法应用于尿量有限的大鼠尿液总蛋白的测定。

双缩脲光度法快速测定乳品中的蛋白质

目的:探讨乳品中蛋白质含量的快速测定方法。方法:取适量样液加水至5.00ml,再加双缩脲试剂,混匀,室温静置显色15min后,经微孔滤膜过滤后于576nm比色测定。结果:本法线性范围为1.6~2000mg/L,最低检出浓度为0.008%。测定相对误差为-0.57%^-2.4%。本法日内精密度为2.04%,日间精密度为1.0%~1.8%。用本法和凯氏定氮法同时对奶样和血清样品进行了测定,经统计学检验两法测定结果之间差异无统计学意义;结论:本法操作简便快速,成本低廉,准确度和精密度均能满足乳品中蛋白质快速测定的要求。

新型噻吩-2-甲醛不对称双缩二氨基硫脲衍生物的合成及其抗菌活性

1,3-二氨基硫脲与芳香醛在冰醋酸催化下经缩合反应制得一系列单缩二氨基硫脲(3a^3k);3a^3k分别与噻吩-2-甲醛进一步缩合合成了11个新型的噻吩-2-甲醛不对称双缩二氨基硫脲类衍生物(5a^5k),其结构经1H NMR,IR,ESI-MS和元素分析表征。初步抗菌活性测定结果表明:部分目标化合物对枯草芽孢杆菌具有抑菌活性;5d对金黄色葡萄球菌的IC50为4.29,优于对照药阿莫西林(IC506.4)。

对二茂铁基苯甲醛双缩乙二胺席夫碱及其过渡金属配合物的合成与表征

在无水乙醇中合成了乙二胺双缩对二茂铁基苯甲醛席夫碱FC CH=NCH2CH2N=cH FC(L)及其与二价过渡金属(M)锰、铁、钴、镍、铜、锌、镉、汞的配合物。通过元素分析、红外光谱、核磁共振氢谱及摩尔电导率的测定对配体和配合物进行了表征,配合物的组成为MLCl2。