伪狂犬病病毒gI/gE双缺失通用转移载体的构建与初步应用

对含伪狂犬病病毒 (pseudorabies virus,PRV) Ea株 g I、g E、11K全基因 ,g D、2 8K基因部分编码区的质粒p SK4.5进行改造 ,消除其中的 Bam H 和 Not 位点 ,将晚期基因 g G的启动子、多克隆位点以及 SV 40 poly(A)同时插入改造后的质粒 p SKBN的 Stu 和 Bst E 位点 ,取代 g I和 g E的部分编码区 ,构建了由 g G启动子驱动的 g I/ g E双缺失通用转移栽体 pg GIE- Uni。序列分析进一步证实 :至少有 8个单一酶切位点可供外源基因直接插入 ,上下游侧翼分别为 0 .8kb和 2 .4kb。将猪繁殖 -呼吸障碍综合征 (兰耳病 )主要抗原基因 ORF5插入 pg GIE- Uni的 Bam H 和 Not 位点之间 ,构建了含 ORF5的转移质粒 pg GIE- ORF5。上述结果为进一步研制猪伪狂犬病 -兰耳病的 2价基因工程疫苗奠定了基础。

大豆脂氧酶与7S球蛋白亚基双缺失株系的主要品质性状分析

本研究以脂氧酶完全缺失品系SI0162为母本,以α'-、α-、β-亚基完全缺失品系1003-44为父本,从后代中成功地获得了大豆脂氧酶及7S球蛋白亚基双缺失材料。对双缺失材料的蛋白质、脂肪含量及组分等进行了测定,并与黑龙江省主栽品种黑河38进行比较,以探究脂氧酶与7S球蛋白亚基双缺失材料的相关品质性状。研究结果表明:双缺失材料蛋白质平均含量为39.89%,与黑河38基本持平;脂肪平均含量为18.73%,比黑河38低1.79%;含硫氨基酸含量为1.45%,比黑河38高25.0%;脂肪酸中油酸含量比黑河38高13.3%。观察表明双缺失的大豆种质能够正常生长发育,同时在含硫氨基酸及油酸含量等有益人类健康的成分上的变化符合育种目标,为培育食品加工专用大豆品种提供了基础材料。

大豆7S球蛋白亚基与脂氧酶双缺失性状遗传解析

7S球蛋白是大豆最主要的过敏原蛋白,大豆脂氧酶是大豆腥臭味产生的原因,两者均是大豆食品深加工过程中有必要去除的成分。本研究以7S球蛋白的α',α,β-亚基完全缺失的"1003-44"为母本,以脂氧酶Lox-1,2,3完全缺失的"SI0162"为父本,配制杂交组合,通过基因聚合育种技术,创制出7S球蛋白亚基与脂氧酶同时缺失大豆新种质资源,并分别对F_1和F_2种子进行遗传解析。结果表明:F_1(1003-44×SI0162)种子表型性状,表现为7S球蛋白亚基缺失、脂氧酶不缺失性状;F_2种子表型性状显示:7S球蛋白亚基缺失∶野生型=375∶125=3∶1(X_(0.05,1)~2=0.0964<3.84),F_2种子脂氧酶缺失性状的分离比为Lox-1,2,3野生型∶Lox-3缺失∶Lox-1,2缺失∶Lox-1,2,3缺失=282∶96∶93∶27,符合9∶3∶3∶1的独立分配定律(X_(0.05,3)~2=0.627 5<7.81)。说明7S球蛋白亚基缺失性状受1对显性等位基因控制,脂氧酶3个同工酶同时缺失,受lx1,lx2与lx3,2个隐性等位基因位点控制。利用ISDS-PAGE电泳技术对F_2及F_(2∶7)种子双缺失性状的连续跟踪筛选,获得了脂氧酶与7S球蛋白亚基双重缺失、并可稳定遗传的优良品系2个,说明这种双缺失基因聚合不影响大豆的正常生长发育,为大豆品质遗传改良提供理论、技术支持,对培育食品加工专用高值大豆新品种具有重要意义。

产单核细胞李氏杆菌Lm4b_02325/26双基因缺失株构建及部分生物学特性试验

旨在构建食源性产单核细胞李氏杆菌毒力岛4(LIPI-4)中的抗转录终止子(Lm4b_02325)和未知蛋白(Lm4b_02326)基因的双缺失株,研究Lm4b_02325/26基因对产单核细胞李氏杆菌(Listeria monocytogenes,LM)的部分生物学特性的影响。利用同源重组技术构建LM928ΔLm4b_02325/26双缺失株,测定LM928和LM928ΔLm4b_02325/26双缺失株在脑心浸出液肉汤(brain heart infusion broth, BHI)、不同EtOH浓度、不同NaCl浓度、不同pH、不同温度下的D_(600 nm),绘制生长曲线;RT-qPCR检测双基因缺失前后体外BHI培养环境下部分毒力因子转录水平;平板计数测定其对鼠巨噬细胞RAW264.7的黏附、侵袭与胞内增殖情况;感染C57BL/6小鼠后检测肝、脾、脑组织中的细菌数量。结果表明,成功构建具有遗传稳定性的双缺失株LM928ΔLm4b_02325/26。在含0.5%~10%NaCl或3%~4.5%EtOH的培养基中,双缺失株与野毒株生长没有明显差异,在pH=5条件下,双缺失株的生长率显著高于野毒株,pH=9条件下双缺失株的生长率显著低于野毒株。在不同温度(4℃、37℃、42℃)BHI培养基中,双缺失株与野毒株生长没有明显差异。Lm4b_02325/26基因双缺失株在BHI培养基中毒力因子hly、inlC和PlcA极显著上调(P<0.01),mpl、inlB、actA、inlP、PlcB、prfA、SigB、iap和inlA极显著下调(P<0.01);双缺失株对RAW264.7细胞的黏附率(14.86%)和侵袭率(2.23%)明显低于野毒株的黏附率(22.93%)和侵袭率(4.28%)(P<0.01);3、6、12 h时胞内增殖数量极显著低于野毒株(P<0.01);双缺失株与野毒株感染小鼠后,载菌量在肝、脾中没有显著差异,在脑组织中双缺失株载菌量为10~4,高于野毒株的10~(3.07),差异极显著(P<0.01)。综上认为,LIPI-4的Lm4b_02325和Lm4b_02326基因参与LM毒力因子的表达和脑组织的定植能力,与弱酸强碱条件下适应力及对RAW264.7细胞的黏附、侵袭和胞内增殖有关。本研究为LIPI-4的功能研究奠定了基础。

键槽缓压式附着体在牙列双侧游离端缺失应用效果评价

目的:探讨键槽缓压式精密附着体修复牙列双侧游离端缺失时对基牙及缺牙区牙槽骨的损伤,义齿的固位、咀嚼、美观及舒适度满意程度。方法:选择设计键槽缓压式精密附着体修复病例20例,龈距离不低于7 mm,缺牙区邻近的牙齿和牙周支持组织健康。结果:患者每半年复诊1次,连续观查2年,最近一次复诊,金属烤瓷冠颈缘密合性良好,牙体无折断,无龋齿,牙龈健康无炎症,牙槽骨无明显吸收。所有患者对美观、舒适度,义齿摘戴,咀嚼功能均满意。结论:键槽缓压式精密附着体修复是对基牙保护效果较好的附件之一,当基牙受到力时,弹簧的缓冲减轻咬合压力,达到保护基牙的功能。

双侧后牙游离缺失实施栓体栓道式精密附着体义齿修复的效果评价

目的观察双侧后牙游离缺失实施栓体栓道式精密附着体义齿修复的效果。方法将我院2011年10月至2014年5月收治的66例双侧后牙游离缺失患者按照随机数表法分为观察组和对照组各33例。对照组实施常规卡环式可摘义齿局部修复术,观察组实施栓体栓道式精密附着体义齿修复术。比较两组患者初佩戴义齿时和佩戴义齿1年后的咀嚼效率、固位力、牙龈指数及牙周探诊深度的变化,同时统计两组义齿总满意率。结果对照组佩戴1年后的咀嚼效率较治疗前明显下降[(0.62±0.1)%vs(0.72±0.11)%,P<0.05],而观察组则无明显下降[(0.75±0.05)%vs(0.73±0.14)%,P>0.05];两组义齿固位力佩戴1年后均明显降低[观察组:(7.64±0.18)g vs(6.72±0.09)g、对照组:(7.61±0.15)g vs(5.21±0.37)g,P<0.05],而对照组降低幅度更大(P<0.05);对照组佩戴1年后牙龈指数明显恶化[(0.74±0.21)vs(1.22±0.47),P<0.05],而观察组则无明显变化[(0.78±0.26)vs(0.89±0.34),P>0.05];两组义齿佩戴1年后牙周探针深度均明显增长[观察组:(1.81±0.06)mm vs(1.92±0.03)mm、对照组:(1.80±0.05)mm vs(1.93±0.05)mm,P<0.05],而组间比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组义齿总满意率为100%(33/33),明显优于对照组的81.81%(27/33),差异有统计学意义(P<0.05)。结论双侧后牙游离缺失实施栓体栓道式精密附着体义齿修复具有更好的义齿修复效果,且稳定性更长久,造型美观,应用价值好。

太极扣弹性附着义齿用于双侧游离端缺失的修复

牙齿修复治疗的目的是恢复功能，达到舒适及美观。游离端缺牙到目前为止．局部可摘义齿仍是最主要的修复方式。由于双侧游离端缺失，剩余牙槽嵴的形态和质量对游离端义齿固位稳定的影响相对固定，使得可摘义齿的整体修复效果不佳。而精密附着体固位型可摘义齿兼有固定义齿和可摘义齿的特点．在提供良好固位和稳定的同时，也大大改善了美观效果，因而在牙列游离端缺损的修复方面已显示出越来越明显的优越性。

快套式精密附着体修复牙弓双端游离缺失的临床应用

目的探讨采用快套式精密附着体修复牙弓双端游离缺失,以改善传统义齿。方法采用快套式精密附着体和基牙烤瓷联冠的方法制作修复体35件,修复牙弓双端游离缺失患者35人,患者戴用1年后进行临床观察。结果快套式精密附着体的美观、舒适感、食物嵌塞、基牙等状况较传统活动义齿均有明显改善。结论快套式精密附着体修复牙弓双端游离缺失较传统活动义齿具有较多优点,值得大力推广。

应力中断式附着体义齿修复下颌双侧游离端缺失的生物力学分析

目的：分析并阐明一种自主设计的应力中断式附着体修复下颌双侧游离端缺失后支持组织的应力分布规律。方法：设计和建立修复下颌双侧磨牙缺失的KenndeyⅠ类应力中断式附着体和常规冠外弹性附着体义齿的三维有限元模型,应用三维有限元法,比较轴向载荷下两种修复方式支持组织的应力分布情况。结果：成功建立了应力中断式附着体和常规冠外弹性附着体义齿修复双侧下颌双侧游离端缺失的三维有限元模型。在轴向载荷下,应力中断式附着体义齿的基牙、牙周膜、牙槽嵴各部分承受的最大Von-Mi ses应力值分别约是常规冠外弹性附着体义齿的71.0%,26.6%和25.0%,且其牙周膜和牙槽嵴黏膜受力分布较常规冠外弹性附着体义齿更加均匀和广泛。结论：应力中断式附着体较常规冠外弹性附着体能明显减轻局部可摘义齿在轴向载荷下基牙和牙周膜的受力,均匀分散力,起到应力中断和保护基牙的作用。

冠外附着体义齿修复双侧游离缺失的临床应用

目的观察Ceka冠外精密附着体在双侧游离端牙列缺损修复中的临床疗效。方法两系列Ceka冠外精密附着体为35例双侧磨牙游离端缺失的患者制作附着体义齿，临床复诊0．5～3年，从主观感受、临床检查和X线检查三方面观察其修复效果。结果患者进行双侧冠外精密附着体义齿修复后美观效果满意，异物感小，固位稳定效果好，咀嚼有力，其中27例相较以前可摘活动义齿明显感觉舒适，修复效果满意。30例患者基牙，牙龈，牙槽嵴粘膜健康。1例患者在使用1年后出现阳性附着体对应处咬合面断裂。1例患者2年后出现缺牙区牙槽骨吸收。结论Ceka系列冠外精密附着体是一种较理想的游离牙列缺损修复固位体。

冠外附着体义齿修复双侧游离缺失的临床效果

目的 分析对双侧游离缺失患者应用冠外附着体进行义齿修复的临床效果.方法 选取2010年5月~2016年5月我院牙科门诊收治的双侧游离缺失患者43例.对其采用冠外附着体进行义齿修复,并观察、统计和分析患者义齿修复的情况和效果.结果 经临床分析显示,43例患者的义齿修复手术均成功（100.0%）.经过1年的随访观察,患者义齿咀嚼功能良好,无明显并发症的发生.结论 对双侧游离缺失患者采用冠外附着体进行义齿修复,其效果良好,是一种理想、安全、有效的固位体义齿修复方法.

弹性义齿与铸造支架联合修复双侧游离端缺失方法的临床探讨

目的:探讨弹性义齿与铸造支架联合修复双侧游离端缺失的临床效果。方法:采用弹性树脂做基托和唇(颊)侧固位体,缺失区和基托采用铸造支架,制作修复体27件,患者戴用一年后进行临床观察。结果:弹性义齿与铸造支架联合义齿较传统修复方法在美观舒适度、咀嚼效率、基牙情况等均有明显改善。结论:弹性义齿与铸造支架联合修复双侧游离端缺失是一种较好的方法。

牙周病伴双侧游离端缺失冠外附着体修复的临床研究

目的:探讨冠外附着体修复牙周病伴双侧游离端缺失的临床疗效。方法:本文按照随机数字法将40例牙周病伴双侧游离端缺失患者随机分为观察组和对照组,其中观察组采用Ceka冠外附着体修复牙周病伴双侧游离端缺失患者,并与采用卡环式可摘义齿修复的对照组进行效果对比研究。结果:观察组的满意率明显高于对照组,且差异具有统计学意义(X2=7.21,P<0.05);3年后复诊发现,观察组的满意率仍然明显高于对照组,且差异具有统计学意义(X2=9.58,P<0.05);而不满意率则明显低于对照组,且差异具有统计学意义(X2=4.21,P<0.05)。结论:冠外附着体的固位力、稳定性、审美性好,异物性小等特点,在牙列缺损修复中,是一种较为理想的修复方式。

双上肢缺失下肢残肢畸形伴唇腭全裂畸形一例报告

发现双上肢完全缺失,下肢残肢畸形伴唇腭全裂的胎儿尸体一例.现报告如下:男性胎儿,八个月产,坐高270mm,体重2400克.从外形观察:眼、耳、鼻、躯干外观无畸形,皮肤、毛发正常,外生殖器和肛门发育良好.两侧上肢完全缺失,缺失的残端与胸外侧壁平齐,皮肤平整,无任何痕迹,双下肢残肢畸形,只有臀、大腿部分,小腿、足缺失,右下肢长100mm,末端不分叉;左下肢长100mm,末端分叉,又长20mm;

鼠伤寒沙门氏菌SL1344株△crp△cya缺失株的构建及其生物学特性初步研究

为研制更加安全并保持良好免疫原性的弱毒株鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimurium)及疫苗活载体,本研究通过自杀性质粒介导的细菌同源重组技术,将已缺失cya基因的SL1344株进一步缺失crp基因,构建S.typhi-murium SL1344△crp△cya双基因缺失突变株,并对其生物学特性进行初步研究。双基因缺失株的构建是以含有重组自杀性质粒pRE△crp的大肠杆菌χ7213为供体菌,SL1344△cya为受体菌进行接合转移,两步法筛选crp/cya基因双缺失突变株,并通过PCR和测序鉴定。对双缺失菌株的生物学特性鉴定表明,SL1344△crp△cya血清型与亲本株SL1344△cya及野生株SL1344保持一致,并且能够稳定遗传缺失后的crp基因;其生化特性与亲本株基本相近,但与野毒株相比发生明显变化,生长速度也更为缓慢;对雏鸡致病性测定试验显示,双缺失株毒力比SL1344至少降低了约106倍。实验结果表明,S.typhimurium SL1344△crp△cya缺失株具有良好的遗传稳定性,毒力明显降低,为深入研究以S.typhimurium为载体的口服疫苗奠定了基础。

先天性双上肢缺失1例

先天性双上肢缺失在临床上非常少见,主要是在孕早期胚胎发育紊乱引起的形态、结构的缺陷。可因染色体畸变或异常,环境因素的影响而发生。应加大健康教育宣传,普及优生知识,提高自我保健意识,加强孕前医学检查,及时进行产前诊断和孕期健康检查,预防先天性肢体畸形的发生,提高出生人口素质。

Glu-A1和Glu-D1位点高分子量谷蛋白亚基共同缺失对弱筋小麦品质的影响

为了研究高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)缺失对小麦品质的影响,以Glu-A1和Glu-D1位点HMW-GS共同缺失材料2GS0414-10作供体亲本,以弱筋小麦品种扬麦13和扬麦18作轮回亲本进行回交,构建不同遗传背景的BC1F3和BC2F3群体,测定受体、供体亲本的品质,以及回交群体BC1F3和BC2F3中Glu-A1和Glu-D1位点HMW-GS共同缺失纯合单株及两位点均正常表达纯合单株的品质。结果表明,供体2GS0414-10具有较低的SDS沉降值、较短的面团形成时间和稳定时间;在BC1F3和BC2F3中,Glu-A1和Glu-D1位点HMW-GS共同缺失对蛋白含量影响不显著,但可显著或极显著降低SDS沉降值和水溶剂保持力(SRC)。Glu-A1和Glu-D1位点HMW-GS双缺失在弱筋小麦品质育种中具有一定的应用价值。