缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的探究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)在结直肠癌组织中的表达水平及其与肿瘤临床特征的相关性。方法选取2018年2月至2019年7月广西柳州钢铁集团有限公司医院收治的100例结直肠癌患者为研究对象进行回顾性研究。收集患者的临床资料,根据所有患者HIF-1α、DCLK1的免疫组化检测结果,分析两者的相关性及其与患者肿瘤相关临床特征的关系。结果HIF-1α和DCLK1阳性率分别为62.00%、43.00%。肿瘤肠壁侵袭程度深、发生淋巴结转移、肿瘤分化程度更低、TNM分期更低的患者,HIF-1α阳性率更高(均P<0.05),DCLK1阳性率也更高(均P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,结直肠癌组织中HIF-1α与DCLK1表达量评分呈正相关(r=0.572,P=0.029)。结论HIF-1α和DCLK1在结直肠癌疾病检测中阳性率较高,与肿瘤TNM分期晚、淋巴结转移等临床特征有关,HIF-1α与DCLK1均可能与结直肠癌的进展有关。

宫颈癌患者血清微小RNA-195、双皮质素样激酶1、鳞状细胞癌抗原表达水平与临床病理特征及预后相关性研究

目的:探讨宫颈癌患者血清微小RNA-195(miR-195)、双皮质素样激酶1(DCLK1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)水平与临床病理特征及预后的相关性。方法:选取宫颈癌患者72例为观察组,同期体检健康女性60例为对照组,比较两组血清miR-195、DCLK1、SCC-Ag表达水平。采用Spearman法分析宫颈癌患者血清miR-195、DCLK1、SCC-Ag与临床病理特征的相关性,随访3年,记录患者生存情况。采用Cox回归模型分析宫颈癌患者预后的影响因素。结果:观察组血清DCLK1、SCC-Ag水平较对照组升高,miR-195水平较对照组下降(均P<0.05)。血清miR-195水平与淋巴结转移、国际妇产科联盟(FIGO)分期、肿瘤分化程度呈负相关,DCLK1水平与FIGO分期、肿瘤分化程度呈正相关,SCC-Ag水平与肿瘤分化程度、肿瘤直径呈正相关(均P<0.05)。miR-195高表达患者3年生存率高于低表达患者,DCLK1、SCC-Ag高表达患者3年生存率低于低表达患者(均P<0.05)。FIGO分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤直径及血清miR-195、DCLK1、SCC-Ag水平是宫颈癌患者预后的独立影响因素(均P<0.05)。结论:宫颈癌患者血清DCLK1、SCC-Ag水平升高,miR-195水平降低,三者与临床病理特征和预后有关,是宫颈癌患者预后的独立影响因素。

双肾上腺皮质激素样激酶1小分子抑制剂的研究进展

双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)的过表达与多种恶性肿瘤的发生发展密切相关,抑制DCLK1活性,可以有效发挥抗肿瘤作用,已经成为抗肿瘤药物研发的热门领域。目前已有多个DCLK1小分子抑制剂表现出优秀的体内外抗肿瘤活性,有望为肿瘤治疗提供全新策略。基于此,本文综述了DCLK1小分子抑制剂的发现、结构类型、结构优化、生物活性及作用机制等方面的研究进展,以期为开发基于DCLK1的新型抗肿瘤小分子抑制剂提供借鉴和参考。

局部晚期宫颈癌患者血清双肾上腺素样激酶1、黏蛋白1的表达及与放疗预后的关系

目的探讨局部晚期宫颈癌患者血清双肾上腺素样激酶1(DCLK1)、黏蛋白1(MUC1)的表达及与放疗预后的关系。方法收集102例局部晚期宫颈癌患者的临床资料,分析不同临床特征、临床疗效和预后患者血清DCLK1、MUC1表达水平,比较放疗前后患者血清DCLK1、MUC1表达水平。结果不同肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期和分化程度局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。放疗后,局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平均明显低于放疗前,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同临床疗效局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01),且放疗前局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1水平均随着疾病发展逐渐升高。3年生存局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1水平均明显低于1年生存患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平与肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期和分化程度有关,放疗前血清DCLK1、MUC1水平与患者临床疗效和预后密切相关,可作为判断肿瘤转归和评估放疗预后的重要指标。

双肾上腺皮质激素样激酶-1与细胞周期蛋白D1在结直肠癌组织中的表达及临床意义

目的：探讨双肾上腺皮质激素样激酶-1（EgJLKl）与细胞周期蛋白D1（cyclin D1）在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组织化学S-ABC法检测59例结直肠癌组织和28例结直肠良性病变组织中DCI。K1及cyclinD1的表达及分布。结果：DCLK1及cyclin D1在结直肠癌组织中的表达明显高于结直肠良性病变组织，平均光密度值（AOD）为0．423±0．021及0．386±0．042；而在结直肠良性病变组织中其阳性反应的平均光密度值为0．267±0．053及0．21l±0．026，差异具有统计学意义。DCLK1及cyclinD1的阳性表达与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度和DUCKs分期无关，而与组织良性或恶性、肿瘤的大小及淋巴结转移相关。结论：结直肠癌组织中DCLKl及cyclinD1的高表达可能与结直肠癌的发生、发展、转移相关，可作为结直肠癌转移及预后监测的一项重要指标。

宫颈癌患者血清双皮质素样激酶1、黏蛋白-1、血管生成素-2的表达及临床意义

目的探讨宫颈癌患者血清双皮质素样激酶1(DCLK1)、黏蛋白-1(MUC-1)、血管生成素-2(Ang-2)的表达及临床意义。方法选择该院2018年2月至2019年2月收治的102例宫颈癌患者为研究对象。分析血清DCLK1、MUC-1及Ang-2表达水平与患者临床病理参数的关系。以血清DCLK1、MUC-1及Ang-2表达水平中位数为界(高于中位数为高表达,低于中位数为低表达),分析上述3项指标高表达和低表达患者的3年总生存率。分析宫颈癌患者预后的影响因素。分析血清DCLK1、MUC-1及Ang-2单独及联合检测预测宫颈癌患者预后的效能。结果国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅲ~Ⅳ期及有淋巴结转移的宫颈癌患者血清DCLK1、MUC-1表达水平分别高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期及无淋巴结转移的患者,FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期的宫颈癌患者血清Ang-2表达水平高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清DCLK1、MUC-1及Ang-2高表达患者3年总生存率均明显低于对应的低表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归分析结果显示,血清DCLK1、MUC-1、Ang-2表达水平及FIGO分期、淋巴结转移情况均是宫颈癌患者预后的影响因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示,血清DCLK1、MUC-1、Ang-2单独及联合检测预测宫颈癌患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.687、0.728、0.694、0.836,联合检测的预测效能最高,其AUC高于各指标单独检测(P<0.05)。结论血清DCLK1、MUC-1、Ang-2表达水平与宫颈癌进展及预后有关,检测上述3项指标可为患者的病情评估及预后预测提供指导依据。

双肾上腺素样激酶1不同剪接体通过激活JNK通路增强胰腺癌细胞的增生能力

目的研究双肾上腺素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)长、短亚型对人胰腺癌增生能力的影响,并探讨其分子机制。方法分别将空载(PCMV6-AC-GFP)、DCLK1亚型1和DCLK1亚型4真核表达质粒转染胰腺癌PANC-1细胞,G418筛选法构建DCLK1不同亚型稳定过表达的细胞系;通过定量实时聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blotting法鉴定DCLK1长、短亚型的表达情况;实时无标记细胞分析仪(real-time cell analysis,RTCA)技术检测DCLK1长、短亚型表达对PANC-1细胞增生能力的影响; Western blotting法检测DCLK1对丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)通路的影响;利用c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路特异性抑制剂SP600125处理DCLK1稳转细胞,检测JNK通路抑制对胰腺癌细胞增生能力的影响。结果 DCLK1长、短亚型的过表达显著促进胰腺癌细胞的增生能力(P <0. 05),并且促进MAPK通路中JNK的磷酸化水平以及JNK通路靶分子CMYC、CD44和Cyclin D1的表达(P<0. 05),而对MAPK通路中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)和p38的磷酸化无明显影响(P>0. 05); SP600125抑制JNK的磷酸化,可以显著降低DCLK1对JNK通路的激活以及对胰腺癌细胞的促增生能力(P <0. 05)。结论DCLK1长、短亚型均可以通过激活JNK通路促进胰腺癌细胞的增生能力。

双肾上腺素样激酶-1与恶性肿瘤关系的研究进展

双肾上腺素样激酶-1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)是近些年研究发现的众多肿瘤标志物中的一种,在多种肿瘤中表达,并且在肿瘤的发生及发展中起到一定作用。本文综述DCLK1的结构及其在恶性肿瘤中表达情况的相关文献,为DCLK1的有关研究和新型抗癌靶向药物研制提供参考。

7例促肾上腺皮质激素非依赖性双侧肾上腺大结节样增生患者的临床特点

目的总结促肾上腺皮质激素非依赖性双侧肾上腺大结节样增生(AIMAH)的临床特点。方法回顾性分析2012年5月至2021年7月就诊于郑州大学第一附属医院的7例AIMAH患者的临床资料。结果7例患者中男2例,女5例,中位年龄53岁,中位病程10 a。5例患者具有库欣综合征(CS)特征性表现,皮质醇昼夜节律消失,ACTH降低,小剂量地塞米松抑制试验(LDDST)均未被抑制,除1例未行大剂量地塞米松抑制试验(HDDST)外,余4例HDDST均未被抑制。2例无CS特征性表现,皮质醇节律消失或正常,ACTH正常,LDDST均未被抑制,1例HDDST未被抑制,1例HDDST被抑制。部分AIMAH患者的异常受体筛选试验阳性。肾上腺CT均提示双侧肾上腺结节样增生。病理均为肾上腺皮质结节状增生。7例患者均先行单侧肾上腺切除术,2例患者缓解;4例无缓解,其中1例自动出院失去随访,2例接受对侧肾上腺次全切术,1例接受对侧肾上腺全切术;1例患者复发,接受对侧肾上腺次全切术。结论对于影像学检查提示双侧肾上腺结节样增生的患者,即使无CS的特征性表现,也应考虑AIMAH的可能。AIMAH患者可行单侧肾上腺切除术,但术后应密切随访,若症状不缓解或复发,再行对侧肾上腺全切或次全切术。

双皮质素样激酶1在癌症的发生及治疗中的研究进展

双皮质素样激酶1(DCLK1)属于微管蛋白超家族成员,既往认为DCLK1与神经元迁移及微管聚合相关,近年来随着研究的深入,目前累积的实验证明DCLK1表达肿瘤干细胞标志物,并具备干细胞特性和功能,且与多种恶性肿瘤的发生、侵袭、转移、化疗耐药及预后不良相关,抑制DCLK1表达,可导致肿瘤生长停滞及凋亡。本文结合国内外最新研究进展,综述DCLK1在癌症的发生及治疗中的相关文献,旨在为DCLK1在肿瘤领域的后续研究提供依据和参考。

腹腔镜同期双侧肾上腺切除术治疗甲状腺髓样癌致异位ACTH综合征1例报告并文献复习

目的按探讨腹腔镜同期双侧肾上腺切除术(BA)治疗甲状腺髓样癌(MTC)致异位促肾上腺皮质激素综合征(EAS)的安全性和疗效。方法患者男,56岁,2023年10月5日因MTC术后15个月,全身乏力7个月入院。既往因MTC行两次甲状腺开放手术。病理诊断:甲状腺髓样癌合并上纵隔、纵隔等处淋巴结转移,CRH(-)、ACTH(胞质弱+)。患者术后出现糖尿病、高血压、低钾血症。入院查体:血压200/95mmHg(1mmHg=0.133kPa),体质量61.5kg,身高160cm,体质量指数24.02kg/cm^(2),腰围83cm,多血质外貌,皮肤变薄。实验室检查:血钾2.71mmol/L,血钙1.47mmol/L,甲状旁腺素6.0pg/ml,空腹血糖10.51mmol/L,糖化血红蛋白8.2%,血降钙素>2000pg/ml,癌胚抗原70.8μg/L。内分泌激素检查:8:00、16:00、24:00时血浆ACTH分别为189.0、125.0、65.0pg/ml;8:00、16:20、24:00时血清皮质醇分别为429.30、408.14、446.61μg/L;24h尿游离皮质醇1200μg/24h;1mg过夜地塞米松抑制试验后8:00时ACTH183.0pg/ml、皮质醇538.27μg/L;非卧位2h醛固酮8.2pg/ml;血、尿儿茶酚胺和甲状腺功能均未见明显异常。^(18)F-FDG-PET/CT检查示颈部等多发淋巴结转移。腹部CT检查示双侧肾上腺增生。垂体增强MR检查示垂体变薄。肺CT、痰培养检查示双肺散在多发感染。经全院多学科讨论,诊断为EAS、MTC术后转移、糖尿病、高血压病、低钾血症、肺部感染、轻度贫血、肝功能不全、甲状旁腺功能减退症、低钙血症。全麻下行经腹腔入路腹腔镜BA。术中先切除左侧肾上腺,翻转体位,再切除右侧肾上腺。结果本例手术顺利。手术时间约60min。术中出血量约20ml。围术期未发生并发症。病理检查:(双侧)肾上腺皮质结节性增生;(双侧)肾上腺髓质增生,ACTH(-)。术后随访3个月,血降钙素仍>2000pg/ml。术后1周,以及1、3个月血ACTH分别为183.0、220.0、731.0pg/ml。但高血压、糖尿病、低钾血症等均迅速缓解。术后1个月血压100/80mmHg,空腹血糖4.4mmol/L,血钾3.87mmol/L;肺部感染好转。未发生肾上腺危像。糖皮质激素替代治疗方案:氢化可的松晨起20mg、午后10mg。甲状腺激素替代治疗方案:左甲状腺素100μg每日1次。基因检测示Ret基因杂合突变,患者应用Ret抑制剂临床试验性治疗。结论对于无法根治的MTC转移病灶导致的EAS,采取腹腔镜同期BA是安全、有效的,可纠正高血压、糖尿病和低钾血症,增加了MTC的治疗机会。

应激时中枢性胰高血糖素样肽1对下丘脑-垂体-肾上腺轴作用的研究进展

胰高血糖素样肽1(GLP-1)在神经元中表达,在应激中对下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴有重要调节作用。在大脑,GLP-1主要产生于尾部孤束核和后脑腹外侧髓质,其反应纤维直接支配室旁核调节垂体功能的促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)神经元。中枢性给予GLP-1激活HPA轴的反应可被GLP-1受体拮抗剂阻断,因此GLP-1在糖皮质激素分泌中具有兴奋作用。外源或内源性糖皮质激素可降低胰高血糖素原(PPG)信使RNA和GLP-1的生物利用度,表明存在一种反馈机制可限制应激引发的HPA轴过度反应。

双肾上腺素皮质样激酶1激活Hippo通路促进胰腺癌细胞迁移侵袭与增殖

目的:探讨双肾上腺素皮质样激酶1(DCLK1)在胰腺癌中促进细胞迁移、侵袭与增殖的分子机制。方法:基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库与基因型-组织表达(GTEx)数据库,分析DCLK1与Hippo通路的相关性并采用胰腺癌组织芯片荧光染色进一步证实。细胞水平上,通过细胞爬片免疫荧光染色以及Western blot实验验证DCLK1对Hippo通路下游效应分子yes相关蛋白1(YAP1)是否具有调控作用,实时荧光定量聚合酶链反应分析YAP1结合转录因子TEA-DNA结合蛋白(TEAD)以及下游促恶性行为分子CYR61、EDN1、AREG、CTGF的表达。利用Hippo通路抑制剂Verteporfin处理细胞,采用Transwell实验检测DCLK1过表达细胞的迁移、侵袭能力是否受到抑制,采用实时无标记细胞分析实验检测细胞增殖指数的变化。结果:TCGA和GTEx数据库数据分析显示,胰腺癌组织中DCLK1和YAP1的表达水平高于癌旁正常组织(均P<0.05)。相关性热图提示,DCLK1与YAP1所在的Hippo通路有关,其中LATS1(r=0.53)、LATS2(r=0.34)、MOB1B(r=0.40)等均与DCLK1表达呈正相关(均P<0.05)。胰腺癌患者组织芯片经多色荧光染色显示,胰腺癌DCLK1高表达患者伴随YAP1表达上调。胰腺癌AsPC-1与PANC-1细胞中DCLK1呈低表达,过表达DCLK1可促进YAP1进入细胞核。过表达DCLK1上调YAP1结合转录因子TEAD的表达并增加下游促迁移、侵袭、增殖分子mRNA的表达。使用Hippo通路抑制剂Verteporfin则可降低DCLK1高表达介导的细胞迁移、侵袭、增殖能力增加。AsPC-1 DCLK1过表达细胞的迁移数为(68.33±7.09)个,Verteporfin处理后的细胞迁移数为(22.00±4.58)个,差异有统计学意义(P<0.05)。PANC-1对照组细胞的迁移数为(37.00±6.00)个,DCLK1过表达细胞的迁移数为(65.66±8.73)个,Verteporfin处理后两组细胞迁移数为(19.66±3.05)个和(32.33±9.61)个,差异均有统计学意义(均P<0.05)。DCLK1过表达胰腺癌细胞侵袭数高于DCLK1对照组细胞以及Verteporfin处理后的DCLK1过表达细胞(均P<0.05)。实时无标记细胞分析实验证实DCLK1过表达的AsPC-1细胞增殖指数为0.66±0.04,高于AsPC-1对照细胞的增殖指数(0.38±0.01,P<0.05),高于Verteporfin处理后的DCLK1过表达AsPC1细胞(0.05±0.03,P<0.05)。而PANC-1 DCLK1过表达细胞的增殖指数为0.77±0.04,高于Verteporfin处理后的DCLK1过表达PANC1细胞(0.14±0.05,P<0.05)。结论:DCLK1与Hippo通路显著相关且通过激活Hippo通路促进胰腺癌细胞迁移、侵袭与增殖。

中晚期宫颈癌患者血清HE4、TK1、DCLK1水平变化及其与化疗效果的关系

目的 分析中晚期宫颈癌患者血清人附睾蛋白4(HE4)、胸苷激酶1(TK1)、双皮质素样激酶1(DCLK1)变化及其与化疗效果的关系。方法 收集2020年1月至2023年1月于郑州大学第一附属医院接受化疗的215例中晚期宫颈癌患者的病历资料,根据纳入患者的化疗效果将其分为良好组和不良组,其中良好组疗效评估结果为完全缓解(CR)与部分缓解(PR),共173例,不良组疗效评估结果为稳定(SD)与进展(PD),共42例。比较两组血清HE4、TK1、DCLK1水平等临床资料,分析中晚期宫颈癌患者血清HE4、TK1、DCLK1水平与化疗效果的关系。结果 良好组临床分期为Ⅱ期比例、高分化比例、无淋巴结转移比例均高于不良组,肿瘤最大直径以及血清HE4、TK1、DCLK1水平均低于不良组,差异均有统计学意义(P<0.05);经logistic多因素分析显示,肿瘤的临床分期达到Ⅳ期、分化程度为中低分化、淋巴结转移以及血清HE4、TK1、DCLK1水平升高均为影响中晚期宫颈癌患者化疗效果的独立因素(P<0.05);经Spearman相关性分析显示,中晚期宫颈癌患者临床分期、淋巴结转移以及血清HE4、TK1、DCLK1水平与其化疗效果成负相关,分化程度与其化疗效果成正相关(P<0.05)。结论 中晚期宫颈癌患者临床分期越晚、分化程度越差、临床转移以及HE4、TK1、DCLK1水平越高,越不利于患者的化疗,上述指标对其预后均具有一定预测价值。

DCLK1和ITGA5在非小细胞肺癌患者中的表达及其与临床病理特征及预后的关系研究

目的 检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血清双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)和整合素α5(integrin alpha5,ITGA5)水平并讨论二者与临床病理特征及预后的关系。方法 选取2017年6月1日至2020年7月1日在我院收治的116例NSCLC患者(NSCLC组)作为研究对象,收集同期100例健康受试者作为对照组,采用酶联免疫吸附法检测NSCLC组和对照组受试者血清中DCLK1和ITGA5的水平;根据预后情况将患者分为生存组和死亡组,ROC曲线分析血清DCLK1、ITGA5的水平对NSCLC患者3年发生死亡的预测价值,多因素Cox回归分析影响NSCLC患者发生死亡的因素。结果 NSCLC组患者血清DCLK1、ITGA5的水平高于对照组(P<0.05);不同吸烟史、TNM分期、分化程度、肿瘤直径以及淋巴结转移的NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);死亡组患者血清DCLK1、ITGA5的水平均高于生存组(P<0.05);血清DCLK1、ITGA5单独及联合预测患者发生死亡的AUC分别为0.895(95%CI=0.824~0.944)、0.828(95%CI=0.747~0.892)、0.926(95%CI=0.862~0.966);DCLK1、ITGA5及淋巴结转移是影响NSCLC患者发生死亡的独立危险因素(P<0.05)。结论 NSCLC患者血清DCLK1、ITGA5的水平异常升高,二者的表达水平与NSCLC患者临床病理特征和不良预后有关。

非小细胞肺癌患者血清KLF5、DCLK1水平变化及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清Krüppel样因子5(KLF5)、双肾上腺皮质激素样激酶1(DCLK1)水平变化及其临床意义。方法选择NSCLC患者120例(观察组)、同期体检健康的志愿者120例(对照组),采集所有研究对象空腹肘静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清KLF5、DCLK1。分析血清KLF5、DCLK1水平与NSCLC患者临床病理特征的关系。NSCLC患者出院后定期随访3年,统计生存和死亡情况。采用Cox比例风险回归模型分析NSCLC患者死亡的危险因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清KLF5、DCLK1水平对NSCLC患者死亡的预测价值。结果观察组血清KLF5、DCLK1水平均高于对照组(P均<0.05)。血清KLF5、DCLK1水平与TNM分期、组织分化程度和淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、吸烟史、肿瘤最大径及病理类型无关(P均>0.05)。随访3年,120例NSCLC患者存活86例、死亡34例,3年总生存率为71.67%(86/120)。Cox比例风险回归分析显示,血清KLF5、DCLK1水平升高是NSCLC患者死亡的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析显示,血清KLF5、DCLK1水平单独和联合预测NSCLC患者死亡的曲线下面积(AUC)分别为0.865、0.878、0.952,血清KLF5、DCLK1水平联合预测NSCLC患者死亡的AUC高于二者单独(P均<0.05)。结论NSCLC患者血清KLF5、DCLK1水平升高,并且二者水平升高为NSCLC患者死亡的独立危险因素;血清KLF5、DCLK1水平对NSCLC患者死亡均有一定预测价值,二者联合预测价值更高。

DCLK1激活FAK/PI3K/AKT/mTOR信号通路促进A549细胞的恶性行为

目的探讨双肾上腺素皮质样激酶1(DCLK1)对A549细胞增殖、迁移、侵袭等恶性生物学行为的影响,并探究可能涉及的相关分子机制。方法慢病毒感染法建立稳定表达DCLK1分子的A549细胞系,反转录-聚合酶链技术和蛋白质印记法进行鉴定。CCK-8与平板克隆实验检测过表达DCLK1后细胞增殖能力变化。Transwell实验观察过表达DCLK1对细胞迁移与侵袭能力的影响。癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析DCLK1对肺腺癌细胞的调控富集通路,蛋白质印记法进行验证。结果DCLK1在A549细胞中过表达可增加细胞的增殖、迁移与侵袭等能力,而抑制FAK/PI3K/AKT/mTOR信号通路可削弱DCLK1对A549细胞的恶性调控。结论DCLK1通过激活FAK/PI3K/AKT/mTOR信号通路,促进A549细胞的恶性生物学行为。

DCLK1在胃癌干细胞中的作用及机制研究

目的:研究双皮质素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)对胃癌干细胞生物学特性的作用,初步探讨其可能的作用机制。方法:无血清培养液悬浮培养胃癌干细胞,用DCLK1抑制剂DCLK1-IN-1靶向抑制胃癌干细胞中DCLK1活性。用Western blot法检测胃癌干细胞中DCLK1、干性相关蛋白(SOX2和OCT4)、细胞增殖相关蛋白(cyclin D1和c-MYC)、耐药相关蛋白(ABCG2和TOP2A)、上皮-间充质转化相关蛋白(E-cadherin、vimen‐tin和Snail)和PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达水平。用CCK-8法测定DCLK1对胃癌干细胞活力及耐药的影响;用甲基纤维素成球法测定DCLK1对胃癌干细胞自我更新的影响。用细胞划痕实验和Transwell实验测定DCLK1对胃癌干细胞迁移和侵袭功能的影响。结果:胃癌干细胞中DCLK1及干性相关蛋白SOX2和OCT4表达明显高于亲本细胞(P<0.01)。DCLK1抑制组胃癌干细胞的增殖、耐药、迁移和侵袭能力明显低于Sphere细胞组(P<0.01)。DCLK1抑制组细胞增殖相关蛋白c-MYC和cyclin D1表达下调,耐药相关蛋白TOP2A和ABCG2表达下调,上皮标志物E-cadherin表达上调,间充质标志物vimentin和Snail表达下调,PI3K/AKT/mTOR相关蛋白表达及其磷酸化水平降低(P<0.01)。结论:DCLK1在胃癌干细胞中高表达,它可能通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路促进胃癌干细胞增殖、耐药、侵袭和迁移。DCLK1可作为靶向胃癌干细胞的潜在靶点。

宫颈上皮内瘤变患者血清中DCLK1、LTBP2的表达及与临床病理特征、术后复发的关系

目的:探讨宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)患者血清双皮质素样激酶1(bicorticoid like kinase 1,DCLK1)、潜在转化生长因子结合蛋白2(latent transforming growth factor binding protein 2,LTBP2)水平与临床病理特征和术后复发的关系。方法:收集整理2019年03月至2022年09月期间于本院确诊的342例CIN患者的相关临床资料并作为CIN组,依据术后复发情况分为未复发组293例和复发组49例;收集351例健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附法检测血清DCLK1、LTBP2水平;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清DCLK1、LTBP2水平对CIN患者术后复发的预测价值;采用Cox比例风险回归模型筛选CIN复发的影响因素。结果:CIN组血清DCLK1、LTBP2水平高于对照组(P<0.05)。CIN分级Ⅲ级、有高危人乳头瘤病毒(HPV)感染的CIN患者血清DCLK1、LTBP2水平高于CIN分级Ⅰ-Ⅱ级、无高危HPV感染患者(P<0.05)。复发组血清DCLK1、LTBP2水平及CIN分级Ⅲ级、有高危HPV感染的CIN患者比例高于未复发组(P<0.05)。DCLK1、LTBP2单独及联合预测CIN患者术后复发的AUC分别为0.803、0.710、0.870。DCLK1、LTBP2、CIN分级是CIN患者术后复发的独立危险因素(P<0.05)。结论:CIN患者血清DCLK1、LTBP2高表达与CIN分级增加和高危HPV感染有关,且二者联合可有效预测术后复发。