局部晚期宫颈癌患者血清双肾上腺素样激酶1、黏蛋白1的表达及与放疗预后的关系

目的探讨局部晚期宫颈癌患者血清双肾上腺素样激酶1(DCLK1)、黏蛋白1(MUC1)的表达及与放疗预后的关系。方法收集102例局部晚期宫颈癌患者的临床资料,分析不同临床特征、临床疗效和预后患者血清DCLK1、MUC1表达水平,比较放疗前后患者血清DCLK1、MUC1表达水平。结果不同肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期和分化程度局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。放疗后,局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平均明显低于放疗前,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同临床疗效局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.01),且放疗前局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1水平均随着疾病发展逐渐升高。3年生存局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1水平均明显低于1年生存患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结论局部晚期宫颈癌患者血清DCLK1、MUC1表达水平与肿瘤直径、淋巴结转移情况、临床分期和分化程度有关,放疗前血清DCLK1、MUC1水平与患者临床疗效和预后密切相关,可作为判断肿瘤转归和评估放疗预后的重要指标。

双肾上腺素样激酶1不同剪接体通过激活JNK通路增强胰腺癌细胞的增生能力

目的研究双肾上腺素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)长、短亚型对人胰腺癌增生能力的影响,并探讨其分子机制。方法分别将空载(PCMV6-AC-GFP)、DCLK1亚型1和DCLK1亚型4真核表达质粒转染胰腺癌PANC-1细胞,G418筛选法构建DCLK1不同亚型稳定过表达的细胞系;通过定量实时聚合酶链式反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)和Western blotting法鉴定DCLK1长、短亚型的表达情况;实时无标记细胞分析仪(real-time cell analysis,RTCA)技术检测DCLK1长、短亚型表达对PANC-1细胞增生能力的影响; Western blotting法检测DCLK1对丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)通路的影响;利用c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)通路特异性抑制剂SP600125处理DCLK1稳转细胞,检测JNK通路抑制对胰腺癌细胞增生能力的影响。结果 DCLK1长、短亚型的过表达显著促进胰腺癌细胞的增生能力(P <0. 05),并且促进MAPK通路中JNK的磷酸化水平以及JNK通路靶分子CMYC、CD44和Cyclin D1的表达(P<0. 05),而对MAPK通路中细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)和p38的磷酸化无明显影响(P>0. 05); SP600125抑制JNK的磷酸化,可以显著降低DCLK1对JNK通路的激活以及对胰腺癌细胞的促增生能力(P <0. 05)。结论DCLK1长、短亚型均可以通过激活JNK通路促进胰腺癌细胞的增生能力。

双肾上腺素样激酶-1与恶性肿瘤关系的研究进展

双肾上腺素样激酶-1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)是近些年研究发现的众多肿瘤标志物中的一种,在多种肿瘤中表达,并且在肿瘤的发生及发展中起到一定作用。本文综述DCLK1的结构及其在恶性肿瘤中表达情况的相关文献,为DCLK1的有关研究和新型抗癌靶向药物研制提供参考。

双肾上腺素皮质样激酶1激活Hippo通路促进胰腺癌细胞迁移侵袭与增殖

目的:探讨双肾上腺素皮质样激酶1(DCLK1)在胰腺癌中促进细胞迁移、侵袭与增殖的分子机制。方法:基于癌症基因组图谱(TCGA)数据库与基因型-组织表达(GTEx)数据库,分析DCLK1与Hippo通路的相关性并采用胰腺癌组织芯片荧光染色进一步证实。细胞水平上,通过细胞爬片免疫荧光染色以及Western blot实验验证DCLK1对Hippo通路下游效应分子yes相关蛋白1(YAP1)是否具有调控作用,实时荧光定量聚合酶链反应分析YAP1结合转录因子TEA-DNA结合蛋白(TEAD)以及下游促恶性行为分子CYR61、EDN1、AREG、CTGF的表达。利用Hippo通路抑制剂Verteporfin处理细胞,采用Transwell实验检测DCLK1过表达细胞的迁移、侵袭能力是否受到抑制,采用实时无标记细胞分析实验检测细胞增殖指数的变化。结果:TCGA和GTEx数据库数据分析显示,胰腺癌组织中DCLK1和YAP1的表达水平高于癌旁正常组织(均P<0.05)。相关性热图提示,DCLK1与YAP1所在的Hippo通路有关,其中LATS1(r=0.53)、LATS2(r=0.34)、MOB1B(r=0.40)等均与DCLK1表达呈正相关(均P<0.05)。胰腺癌患者组织芯片经多色荧光染色显示,胰腺癌DCLK1高表达患者伴随YAP1表达上调。胰腺癌AsPC-1与PANC-1细胞中DCLK1呈低表达,过表达DCLK1可促进YAP1进入细胞核。过表达DCLK1上调YAP1结合转录因子TEAD的表达并增加下游促迁移、侵袭、增殖分子mRNA的表达。使用Hippo通路抑制剂Verteporfin则可降低DCLK1高表达介导的细胞迁移、侵袭、增殖能力增加。AsPC-1 DCLK1过表达细胞的迁移数为(68.33±7.09)个,Verteporfin处理后的细胞迁移数为(22.00±4.58)个,差异有统计学意义(P<0.05)。PANC-1对照组细胞的迁移数为(37.00±6.00)个,DCLK1过表达细胞的迁移数为(65.66±8.73)个,Verteporfin处理后两组细胞迁移数为(19.66±3.05)个和(32.33±9.61)个,差异均有统计学意义(均P<0.05)。DCLK1过表达胰腺癌细胞侵袭数高于DCLK1对照组细胞以及Verteporfin处理后的DCLK1过表达细胞(均P<0.05)。实时无标记细胞分析实验证实DCLK1过表达的AsPC-1细胞增殖指数为0.66±0.04,高于AsPC-1对照细胞的增殖指数(0.38±0.01,P<0.05),高于Verteporfin处理后的DCLK1过表达AsPC1细胞(0.05±0.03,P<0.05)。而PANC-1 DCLK1过表达细胞的增殖指数为0.77±0.04,高于Verteporfin处理后的DCLK1过表达PANC1细胞(0.14±0.05,P<0.05)。结论:DCLK1与Hippo通路显著相关且通过激活Hippo通路促进胰腺癌细胞迁移、侵袭与增殖。

DCLK1激活FAK/PI3K/AKT/mTOR信号通路促进A549细胞的恶性行为

目的探讨双肾上腺素皮质样激酶1(DCLK1)对A549细胞增殖、迁移、侵袭等恶性生物学行为的影响,并探究可能涉及的相关分子机制。方法慢病毒感染法建立稳定表达DCLK1分子的A549细胞系,反转录-聚合酶链技术和蛋白质印记法进行鉴定。CCK-8与平板克隆实验检测过表达DCLK1后细胞增殖能力变化。Transwell实验观察过表达DCLK1对细胞迁移与侵袭能力的影响。癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析DCLK1对肺腺癌细胞的调控富集通路,蛋白质印记法进行验证。结果DCLK1在A549细胞中过表达可增加细胞的增殖、迁移与侵袭等能力,而抑制FAK/PI3K/AKT/mTOR信号通路可削弱DCLK1对A549细胞的恶性调控。结论DCLK1通过激活FAK/PI3K/AKT/mTOR信号通路,促进A549细胞的恶性生物学行为。

DCLK1、Bmi-1在结直肠癌中的表达及临床意义

目的探讨双肾上腺素样激酶1(DCLK1)和B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点-1(Bmi-1)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化Max Vision法检测DCLK1和Bmi-1在74例CRC组织及对应的癌旁组织中的表达情况,分析两者表达的相关性及其与临床病理特征的关系。结果 CRC组织中DCLK1和Bmi-1的阳性表达率分别为68.9%和62.2%,高于癌旁正常组织中的27.0%和23.0%,差异均有统计学意义(P<0.05)。DCLK1表达与浸润深度、淋巴结转移和Dukes分期有关(P<0.05);Bmi-1表达与分化程度、浸润深度、淋巴结转移和Dukes分期有关(P<0.05)。DCLK1与Bmi-1表达水平呈正相关(r=0.259,P=0.026)。结论 DCLK1、Bmi-1在CRC组织中高表达,其阳性表达可能与CRC的发生、发展密切相关,两者联合检测可能为CRC的临床诊治及预后评估提供新途径。

非小细胞肺癌组织DCLK1和Bmi-1蛋白表达及其与三维适形放疗效果的相关性研究

目的探讨非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)组织双肾上腺素样激酶1(dou-blecortin-like kinase 1,DCLK1)、B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点一(B cell specific moloney leukemia virus insert site-1,Bmi-1)蛋白表达及其与三维适形放疗效果的关系。方法选取2018年6月~2021年1月江南大学附属医院收治的102例拟行三维适形放疗的NSCLC患者和40例肺错构瘤患者,分别记为恶性组和良性组。采用免疫组织化学法检测二组病灶组织DCLK1和Bmi-1蛋白表达,并对比两组病灶组织及恶性组中不同临床病理特征患者癌组织DCLK1和Bmi-1蛋白阳性表达率。恶性组均予以三维适形放疗6周,并评价其放疗效果。对比恶性组三维适形放疗无效与放疗有效患者癌组织DCLK1和Bmi-1蛋白阳性表达率,采用Logistic多元回归分析探讨恶性组NSCLC组织DCLK1和Bmi-1蛋白阳性表达与三维适形放疗效果的关系。结果恶性组病灶组织DCLK1阳性表达率(60.78%)和Bmi-1蛋白阳性表达率(70.59%)均高于良性组(32.50%,35.00%),差异具有统计学意义(χ^(2)=9.224,15.241,均P<0.05);临床Ⅲ~Ⅳ期、未/低分化、淋巴结转移患者的DCLK1和Bmi-1蛋白阳性表达率分别高于临床Ⅰ~Ⅱ期、高/中分化、无淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(χ^(2)=6.638,9.756,5.670;7.724,7.447,6.114,均P<0.05);三维适形放疗有效率为67.65%,无效率为32.35%;临床分期Ⅲ~Ⅳ期(OR=5.414,95%CI=4.027~6.663)、未/低分化(OR=4.773,95%CI=3.156~5.974)、淋巴结转移(OR=5.307,95%CI=3.768~6.626)、癌组织DCLK1(OR=5.496,95%CI=3.967~6.882)和Bmi-1蛋白(OR=5.624,95%CI=4.127~7.287)阳性表达均是恶性组三维适形放疗无效的危险因素(均P<0.05)。结论NSCLC组织DCLK1和Bmi-1蛋白阳性表达率高于肺良性肿瘤,且临床分期、分化程度、淋巴结转移、NSCLC组织DCLK1和Bmi-1蛋白阳性表达均可影响NSCLC患者三维适形放疗的效果。

肝细胞癌组织中DCLK1蛋白的表达及其临床意义

目的探讨肝细胞癌(肝癌)组织中双肾上腺素样激酶1(Doublecortin-like kinase 1,DCLK1)的表达情况、病人的临床病理特点及其与预后的关系。方法收集2012年6月至2015年6月在福建医科大学孟超肝胆医院收治的施行根治性肝癌切除术52例病人的临床病理资料,使用相应癌和癌旁组织构建组织芯片,采用免疫组织化学法检测癌和癌旁组织标本中DCLK1和OV6的表达情况,回顾性分析差异化表达DCLK1病人的性别、年龄、肝硬化状况、甲胎蛋白(AFP)、肿瘤直径、肿瘤数目、包膜状况、微血管侵犯等临床病理指标,Kamplan-Meier法进行生存分析。结果 DCLK1在肝癌组织中高表达18例(34.6%),在癌旁组织中高表达8例(15.4%),结果显示差异有统计学意义(P<0.05);OV6在肝癌组织中高表达20例(38.5%),在癌旁组织中高表达9例(17.3%);DCLK1蛋白在肝癌组织中的表达与AFP、微血管侵犯相关(P值分别为0.007、0.038),且与OV6的表达呈正相关(r=0.505,P<0.001);DCLK1表达水平与肝癌术后3年的无瘤生存率相关(P=0.022)。结论 DCLK1在肝癌组织中表达明显高于癌旁组织,其高表达提示预后不良,DCLK1可能是肝癌诊断及判断预后的一个潜在的分子标志物。

HIF-1α联合DCLK1在结直肠癌组织中的表达及临床意义

肿瘤发生是一个多基因、长期的作用过程,而肿瘤干细胞标志物的发现对肿瘤治疗和预防发产生着深远的影响,缺氧诱导因子-let(HIF-let)是目前发现的肿瘤细胞和正常细胞适应缺氧环境的关键性转录因子,而双肾上腺素样激酶1(DCLK1)是近年发现的癌干细胞标志物,二者在结直肠癌等肿瘤的进展中发挥着重要的作用。本文主要对HIF-1α联合DCLK1在结直肠癌组织中的表达及临床意义进行了综述,旨在为HIF-1α和DCLK1的相关研究和研制新型抗癌靶向药物提供参考。

NSCLC癌组织中DCLK1、Caspase-3和GLI3蛋白表达情况与淋巴结转移和预后的相关性

目的研究非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中双肾上腺素样激酶1(DCLK1)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和GLI家族锌指蛋白3(GLI3)表达情况与其淋巴结转移和预后的相关性。方法以2016年2月至2017年3月该院诊治的NSCLC患者60例作为研究对象,均予以安罗替尼靶向治疗3个月后随访3年,根据患者是否死亡将其分为死亡组和生存组,所有患者均进行肺部活检,取患者的癌组织以及癌旁组织,比较癌组织以及癌旁组织DCLK1、Caspase-3和GLI3蛋白表达情况的差异;比较不同病理状态、不同预后的患者癌组织DCLK1、Caspase-3和GLI3蛋白表达情况的差异,分析不良预后以及肿瘤淋巴结转移与癌组织中DCLK1、Caspase-3和GLI3蛋白表达的相关性。结果癌组织的Caspase-3和GLI3蛋白高表达比例显著高于癌旁组织,DCLK1蛋白的高表达比例显著低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05);不同性别、年龄、TNM分期患者癌组织中DCLK1、Caspase-3和GLI3蛋白表达情况的差异均无统计学意义(P>0.05);腺癌患者癌组织中的Caspase-3和GLI3蛋白高表达比例显著高于鳞癌患者,DCLK1蛋白高表达比例显著低于鳞癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移的患者癌组织中的Caspase-3和GLI3蛋白高表达比例显著高于无淋巴结转移的患者,DCLK1蛋白高表达比例显著低于无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P<0.05);相关性分析显示,NSCLC的淋巴结转移以及不良预后分别与癌组织中Caspase-3(r=0.459、0.767,P<0.05)和GLI3蛋白表达(r=0.334、0.456,P<0.05)呈正相关,与DCLK1蛋白表达呈负相关(r=-0.553、-0.877,P<0.05)。结论NSCLC的淋巴结转移以及不良预后分别与癌组织中Caspase-3和GLI3蛋白表达呈正相关,与DCLK1蛋白表达呈负相关,可指导NSCLC的临床诊断。

结直肠癌患者血浆中DCLK1的表达及意义

目的 :检测双肾上腺素样激酶1(doublecortin-like kinase 1,DCLK1)在结直肠癌患者血浆中的表达水平,并通过与癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)的对比,探讨其诊断价值。方法 :收集78例结直肠癌患者手术前的血浆标本和48例健康志愿者的血浆标本,应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测DCLK1和CEA的表达水平,对比分析DCLK1、CEA及二者联合检测诊断结直肠癌的感敏度、特异度和准确性,并分析血浆中DCLK1和CEA的表达水平与结直肠癌患者临床病理特征之间的关系。结果 :DCLK1和CEA在结直肠癌患者血浆中的表达水平均明显高于健康志愿者(P<0.01)。DCLK1诊断结直肠癌的敏感度和准确性均优于CEA,DCLK1与CEA联合检测可进一步提高诊断结直肠癌的敏感度和准确性。血浆中DCLK1的含量与结直肠癌患者的TNM分期、分化程度、有无淋巴结转移及有无脉管癌栓等相关(P<0.01)。结论 :血浆DCLK1有望成为诊断结直肠癌的一种新型肿瘤标志物,且与结直肠癌患者的恶性程度密切相关。