用绿色荧光蛋白和双色流式细胞术检测沙门菌在哺乳类宿主细胞内的基因表达

绿色荧光蛋白(GFP)是目前广泛使用的报告基因。如果用单色流式细胞术,由于强的相似荧光成为背景干扰,所以很难用于检测感染组织内的基因表达。如果用侧向散射(SSC)区分,则有一部分荧光较弱的菌不能从大量具有类似散射性质的宿主细胞碎片中区分出来。实验证明,结合双色流式细胞术。

三色和双色荧光标记流式细胞术对肾移植免疫反应新指标TLR4的监测

目的比较三色和双色荧光标记流式细胞术(FCM)在肾移植术后免疫指标TLR4监测中的优缺点。方法选取10例肾移植术后病例,分别采用三色和双色FCM检测外周血单核细胞中CD14、TLR4和CD80表达情况,计算CD14阳性单核细胞中TLR4和CD80的表达百分率并进行统计比较。结果两种方法检测CD14阳性单核细胞中TLR4和CD80阳性表达百分率均无显著性差异(P=0.198,P=0.872),两种方法对相同血标本的检测结果均呈正相关关系(积矩相关系数r=1,P=0.000;积矩相关系数r=0.999,P=0.000)。另外,应用三色FCM还可同时获得单核细胞中TLR4和CD80双阳性的表达情况。结论三色和双色FCM检测TLR4的结果无显著性差异,但三色FCM可同时显示TLR4与其下游分子CD80双阳性表达情况,对揭示TLR4参与移植免疫反应机制具有重要价值,而且血标本用量少,节约单克隆抗体。

传染性非典型肺炎患者外周血CD4^＋T细胞CD38的表达降低

用双色流式细胞术对157例传染性非典型肺谈（急性重症呼吸综合征，SARS）临床诊断病例、37例同期发生的肺谈支原体感染患者及38名健康成人外周血淋巴细胞中CD4^＋T细胞的百分率（CD40%）、CD4^＋T细胞CD38阳性率（CD38/CD4%）及CD38平均荧光强度（CD38MF）进行检测。