双色银染原位杂交技术检测胃癌HER2基因扩增及临床意义

目的探讨双色银染原位杂交技术(dual—color silver-enhanced in—situ hybridization,DSISH)检测胃癌人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER2)基因扩增的可行性及其与临床病理学特征的关系。方法应用DSISH技术检测230例患者胃癌切除组织中HER2基因扩增状态,并进行相关统计学分析。结果DSISH检测230份胃癌标本中43例存在HER2基因扩增,HER2基因扩增率为18.7%。HER2基因扩增与胃癌的分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者年龄、性别、肿瘤发生部位、浸润深度、神经以及脉管侵犯无关(P均>0.05)。结论DSISH技术检测胃癌HER2基因扩增状态具有可行性;HER2基因扩增可以反应胃癌生物学行为。

免疫组织化学法双色银染原位杂交与荧光原位杂交技术检测乳腺癌HER-2基因状态的应用

目的:比较免疫组织化学法(IHC)、双色银染原位杂交(DISH)、荧光原位杂交技术(FISH)对乳腺癌HER-2基因状态的应用效果。方法:回顾性的选取2017年1月至2019年12月我院收治的180例乳腺癌患者作为研究对象,均为女性、单侧,取组织标本行IHC、DISH、FISH检查HER-2。结果:180例患者中各检测方式对HER-2基因的检查效果:IHC检查HER-2表达阴性118例、HER-2表达阳性49例,可疑阳性13例;DISH检查HER-2基因扩增56例、无扩增107例、不确定17例;FISH检查HER-2扩增54例、无扩增107例、不确定19例。各检测方式比较:DISH与IHC检查HER-2基因的Kappa值为0.788,一致性较好;FISH与IHC检查HER-2基因的Kappa值为0.784,一致性较好;DISH与FISH检查HER-2基因的Kappa值为0.939,一致性高。结论:IHC、DISH、FISH均可对乳腺癌患者的HER-2基因状态行评估,可以IHC作为筛查手段,若医疗资源许可应当结合DISH检查结果制定治疗方案。

双色银染原位杂交检测HER2基因在乳腺癌中的临床应用研究

目的本实验应用双色银染原位杂交(dual-color silver-enhanced in-situ hybridization,DISH)和免疫组化(immunohistochemical,IHC)检测乳腺癌组织中HER-2基因扩增及蛋白表达,并挑选出其中的导管内癌伴微小浸润的病例及具有肿瘤异质性的病例,应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测癌组织HER2基因状态,探讨DISH在的临床应用中的价值。方法对198例乳腺浸润性癌,分别行IHC及DISH检测HER2蛋白表达及基因状态,对其中7例微小导管内癌伴微小浸润灶(直径<0.5 cm)及4例具有肿瘤异质性的病例同时应用FISH检测,判读标准采用2013版美国临床肿瘤学会/美国病理医师学院(ASCO/CAP)HER-2指南。结果 56例HER2表达(3+)的标本中,55例DISH检测基因扩增,36例IHC为(2+)的标本中,11例DISH检测出现扩增;IHC为(1+/0)的106例标本,1例DISH检测基因扩增;具肿瘤异质性的4例标本,DISH检测均为her2基因扩增,其中2例FISH检测阳性;7例导管内癌伴微小浸润灶的标本,2例DISH检测阳性,而FISH仅2例标本可判读,其中1例结果为不确定,1例为阴性。结论 DISH作为评估乳腺癌HER2基因状态的新选择,在微小浸润癌及具有异质性的浸润癌的检测中具有优势,其临床应用远期价值需待更多临床随访跟踪。DISH检测结果需参考IHC,推荐DISH与IHC同时应用检测her2基因与蛋白表达。

双色银染原位杂交法检测乳腺癌HER-2基因扩增

目前，HER-2基因扩增检测的主要方法是荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization，FISH）法。FISH可作为检测HER-2基因扩增的“金标准”，但其存在荧光淬灭快，且需要在暗室荧光显微镜下观察以及染色切片保存周期较短，不能用于回顾性研究等问题。针对这些问题，现介绍一种新的观察乳腺癌HER-2基因扩增的方法即双色银染原位杂交法（dual-color silver-enhanced in-situ hybridization, DSISH）。

原位杂交技术用于虹彩病毒对美国青蛙侵染的诊断

蛙虹彩病毒 (Rana grylio virus,RGV)能引起鱼类、两栖类和爬行类水生动物严重的系统性疾病 ,RGV是从我国患病蛙中分离到的一种虹彩病毒。体外扩增的 RGV经人工方法感染幼龄美国青蛙 (Rana grylio) ,运用原位杂交技术 ,分别对感染 1～ 3d后的蛙心、肺、肾、肠、脾、肝等 6种组织进行 RGV分子定位和检测。结果显示 ,在幼蛙的肺和肠中有较强的阳性信号 ,在其他组织中也检测到 RGV的存在。本试验探讨了 RGV感染早期在宿主体内的增殖及在不同组织中的分布状况 ,建立了一种蛙虹彩病毒的早期诊断方法 ,并为揭示 RGV的致病机制奠定了基础。

HER2基因扩增和蛋白表达与胃癌临床病理因素的相关性

目的:探讨HER2基因扩增和蛋白表达与胃癌不同临床因素的相关性。方法:回顾性分析河南省肿瘤医院2012年5月至2013年10月收治的1 002例胃癌患者术后肿瘤组织病理标本,应用免疫组化技术(IHC法)和双色银染原位杂交技术(SISH法)检测HER2基因扩增和蛋白表达情况,比较不同临床特点的胃癌患者亚组间HER2表达阳性率的差异。结果:1 002例术后肿瘤组织病理标本中HER2阳性208例(20.8%)。HER2蛋白过表达与Lauren分型、病理分化程度和浸润深度有明显的相关性,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:在肠型胃癌、分化较好的胃癌、胃癌全层浸润时HER2阳性率明显提高。

胃癌患者HER2表达状态的影响因素分析

目的分析胃癌患者人表皮生长因子受体-2(HER2)阳性率,探讨影响胃癌患者HER2表达状态的因素。方法回顾性收集2016年1—12月郑州大学第一附属医院行外科手术治疗的198例胃癌患者的临床资料,采用免疫组织化学染色(IHC)和双色银染原位杂交(DSISH)检测患者HER2的表达情况,分析HER2阳性表达与胃癌患者临床特征及病理特征之间的关系。结果 198例胃癌患者中HER2阳性率为14.6%(29/198),单因素分析结果显示,胃癌患者HER2阳性表达与性别、分化程度、Lauren分型相关(P<0.05)。多因素分析结果表明,性别、分化程度是影响胃癌患者HER2阳性表达的独立因素。结论性别、分化程度是影响胃癌患者HER2阳性表达的独立因素,HER2阳性表达更常见于男性、中高分化型胃癌患者。

反义AKT2 cDNA治疗C6胶质瘤的体内外实验研究

目的研究反义AKT2(antisenseAKT2,ASAKT2)cDNA对鼠脑胶质瘤细胞系C6的生长抑制作用。方法将ASAKT2cDNA构建体转染鼠脑胶质瘤细胞系C6,原位杂交和蛋白印迹鉴定后,应用PCNA阳性率和MTT法检测细胞增殖能力,TUNEL法计算凋亡指数。应用立体定向技术将C6细胞和转染反义AKT2cDNA的C6细胞种植到SD大鼠的右侧尾状核作为对照组和转染组;并对颅内已经形成C6胶质瘤的大鼠进行脂质体包裹的ASAKT2cDNA和空载体治疗;MRI动态监测大鼠颅内肿瘤生长情况,并检测标本AKT2和PCNA表达以及细胞的凋亡情况。结果转染ASAKT2cDNA后C6细胞AKT2表达显著抑制,增殖减慢,凋亡指数增加。反义治疗组和转染组大鼠生存时间明显延长;转染组和治疗组肿瘤标本AKT2表达下降或消失,PCNA阳性率降低,可见大量凋亡细胞,而对照组和空载组标本几乎没有凋亡细胞。结论体内外实验证明ASAKT2cDNA可以抑制肿瘤细胞增殖、诱导凋亡,AKT2可作为基因治疗胶质瘤的重要优选靶的。