双色FISH检测人精子染色体非整倍体方法的建立

目的:建立用双色ＦＩＳＨ检测人精子染色体非整倍体的方法。方法:采用双色荧光原位杂交(ＦＩＳＨ)方法取适量精子标本用ＥＤＴＡ/ＰＢＳ处理,然后用二硫苏糖醇(ＤＴＴ),使精子去凝集。固定后滴片,然后与双色荧光直接标记探针杂交。结果;在ＯＬＹＭＰＵＳ荧光显微镜下可以清楚看到精子头部的蓝色杂交信号,头部有１个绿色荧光杂交信号的精子为Ｘ染色体精子(Ｘ精子),有１个红色荧光杂交信号的精子为Ｙ染色体精子(Ｙ精子)。精子头部有２个荧光杂交信号的精子为染色体数目异常精子。结论:双色荧光原位杂交(ＦＩＳＨ)方法可以用于测定人精子染色体非整倍体率的变化。