环境相关浓度双酚AF暴露对成年雌性弓背青鳉生长和生殖的毒性效应

以成年雌性弓背青鳉(Oryzias curvinotus)为研究对象,研究了不同环境相关浓度(0.93、9.33和102.33μg/L)双酚AF(BPAF)短期暴露对其生存、生长和生殖的影响。结果表明,102.33μg/L BPAF暴露21 d极显著降低了成年雌性弓背青鳉的存活率和生长状况因子;9.33和102.33μg/L BPAF暴露导致成年雌性弓背青鳉肝细胞排列松散、脂肪积累减少,102.33μg/L BPAF暴露还导致肝细胞形态出现明显肿胀;102.33μg/L BPAF暴露导致其卵母细胞大多停留在初级卵母细胞阶段,抑制了卵母细胞的成熟。另外,102.33μg/L BPAF暴露显著或极显著上调了vtglike、vtg1、vtg2和chgh在肝脏中的转录水平以及cyp11a、cyp19a1a和gsdf在卵巢中的转录水平。不同环境相关浓度的BPAF暴露对成年弓背青鳉雌鱼有较强的致死效应、生长抑制效应、雌激素效应,并可引起肝损伤和卵母细胞发生障碍。

双酚AF经Nrf2/HO-1信号通路诱导氧化应激并加重肝脏内脂质代谢紊乱

基于核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)探讨双酚AF(BPAF)染毒诱导肝组织内脂质代谢紊乱发生的分子机制。将50只SPF级雄性昆明小鼠分为对照组、溶剂对照组和3组BPAF染毒组(低、中、高剂量组)。对照组、溶剂对照组每日分别给予生理盐水、玉米油;低、中、高剂量组分别给予5、20、50 mg·kg^(-1)(以体质量计)BPAF,连续灌胃10周。染毒结束后,记录肝脏系数和体质量,检测血清中血脂(总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL))水平、肝功能相关指标(天门冬氨酸基转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转氨酶(ALT)),检测肝组织氧化应激指标(丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)、活性氧(ROS))水平、肝脂质(总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG))水平。HE染色和普鲁士蓝染色观察肝组织内病理学变化,RT-qPCR和Western blot检测肝组织中Nrf2、HO-1、谷胱甘肽过氧化物酶4(Gpx4)和PPARγ的蛋白和mRNA的表达。血清和肝匀浆液生化结果显示,BPAF导致小鼠脂质代谢、肝功能、氧化应激指标出现明显异常;HE染色显示肝细胞排列紊乱,细胞内存在大小不一的脂质空泡;普鲁士蓝染色显示各组肝组织内并未出现铁离子沉积;Western blot和RT-qPCR结果显示BPAF染毒组肝组织内PPARγ的mRNA和蛋白的表达显著升高,且肝组织内Nrf2、HO-1和Gpx4的mRNA和蛋白的表达显著降低。结果表明,BPAF能明显下调Nrf2/HO-1信号通路,加重脂质过氧化程度,从而导致小鼠肝脏出现脂质代谢紊乱。

双酚AF暴露对胚胎期和幼鱼期斑马鱼的毒性效应

为明确不同发育阶段的斑马鱼对BPAF(双酚AF)暴露的易感性,采用暴露试验法初步研究了BPAF对胚胎期和幼鱼期斑马鱼的发育毒性.结果表明:1BPAF暴露可延缓胚胎期斑马鱼的发育和孵化,使其出现心包水肿、卵黄囊异常、心率下降、心脏搏动停止等症状.2暴露96 h后,ρ(BPAF)为2.0、2.5、3.0 mg/L暴露组胚胎期斑马鱼的畸形率高达100%,暴露24 h致畸的EC50(半数效应浓度)为2.00 mg/L,暴露96 h的LC50(半数致死浓度)为1.84 mg/L.3暴露72 h后,对照组幼鱼期斑马鱼鱼鳔发育缺陷率为0;除ρ(BPAF)为1.0 mg/L暴露组外,其余BPAF暴露组幼鱼期斑马鱼鱼鳔发育缺陷率为100%.4随着暴露时间的延长以及中毒程度的加深,幼鱼期斑马鱼出现的中毒症状依次表现为心包水肿、卵黄囊水肿、背脊弯曲、心跳停止,暴露48和72 h时其心包水肿的EC50分别为1.76、1.56 mg/L,暴露96 h的LC50为1.77 mg/L.胚胎期和幼鱼期斑马鱼对BPAF暴露响应的差异分析显示,幼鱼期斑马鱼对BPAF暴露的反应更为敏感,幼鱼期斑马鱼的心包水肿症状可作为BPAF毒性响应的最佳指标之一.

合成双酚AF的新方法

由六氟丙酮三水合物和苯胺,经缩合、重氮化、水解、Friedel-Crafts烷基化4步反应常压下合成了双酚AF。以五氧化二铌为催化剂,在n（HFA.3H2O）∶n（an iline）∶n（Nb2O5）=2∶1∶0.1,回流6 h条件下,合成出中间体（Ⅰ）,收率高达96.3%。重氮化温度为-2-2℃、H2SO4质量分数为14.7%、n（Ⅰ）∶n（H2SO4）∶n（NaNO2）=1∶4.1∶1.1、及水解时H2SO4质量分数为50%、n（H2SO4）∶n（Ⅰ）=11.0∶1、108-112℃反应1.5-2 h的优化条件下,化合物Ⅰ经重氮化、水解后以92.7%的高收率得到中间体2-（4-羟基苯）六氟异丙醇（Ⅱ）;再在甲磺酸存在下,化合物Ⅱ与苯酚经Friedel-Crafts烷基化反应以72.4%的收率合成了目标产物双酚AF（Ⅲ）,总收率为64.6%（以苯胺为基准计算）。

双酚AF暴露降低斑马鱼学习记忆能力并影响神经系统相关基因表达

双酚AF(4,4'-六氟-2-二酚,BPAF)应用渐为广泛,对生态环境具有潜在威胁。为探究BPAF对水生生物的神经毒性,选择斑马鱼作为实验对象,利用T型迷宫和实时定量PCR的研究方法,考察0、0.005、0.05和0.5 mg·L^(-1)3种不同浓度BPAF暴露下,成年斑马鱼的学习记忆能力,并检测鱼脑中胶质纤维酸性蛋白基因(glial fibrillary acidic protein,gfap)、音猬基因(sonic hedgehog,shha)和突触蛋白基因(synapsinⅡa,syn2a)表达量变化。结果表明:在T迷宫行为学检测中,0.5 mg·L^(-1)BPAF暴露浓度下,斑马鱼在第1天进入T型迷宫规定臂的潜伏时间与对照组相比显著增加(P<0.01),随着暴露浓度和染毒时间的增加,潜伏时间显著延长,具有明显的剂效和时效关系。暴露6 d后,BPAF各暴露浓度组中雌鱼脑部gfap基因显著上调,雄鱼脑中gfap基因在高浓度暴露组(0.5 mg·L^(-1))下表达量下调,而在0.005 mg·L^(-1)BPAF暴露组差异不明显。BPAF暴露可导致雌鱼脑部shha基因下调,使雄鱼脑中shha基因表达量随暴露浓度增大呈先上升后下降的趋势。BPAF各暴露浓度组中雌鱼和雄鱼脑部syn2a基因下调,呈现出随暴露浓度增大而下降的趋势。综上,初步认为BPAF对斑马鱼具有潜在的神经认知干扰效应。

双酚AF对雄性斑马鱼卵黄蛋白原水平与芳香化酶基因表达的影响

双酚AF(4,4'-六氟-2-二酚,BPAF)对生物有机体具有内分泌干扰作用。为研究低剂量BPAF对水生生物的效应,本研究选择成年雄性斑马鱼为研究对象,考察了0.005、0.05和0.5 mg·L^(-1)3种浓度BAPF暴露30 d对血浆中卵黄蛋白原(VTG)含量、2种卵黄蛋白原基因(vtg^(-1)和vtg-3)表达和2种芳香酶基因(cyp 19a与cyp 19b)表达的影响。结果表明:在0.005 mg·L^(-1)浓度暴露30 d后,血浆中VTG含量显著升高,随着暴露浓度的升高,促进作用不显著;BPAF暴露对不同组织中的4种基因存在不同的影响,0.005 mg·L^(-1)BPAF暴露可诱导脑部cyp19b、肝脏中cyp19a和性腺中vtg^(-1)、vtg-3和cyp19b基因表达;0.5 mg·L^(-1)BPAF暴露可导致肝脏中vtg^(-1)、vtg-3、性腺中cyp19a等基因显著上调。实验结果表明,BPAF具有雌性激素样效应,可诱导雄性斑马鱼体内部分组织卵黄蛋白原基因和芳香酶基因的表达。BPAF可引起斑马鱼血浆中的VTG含量的上升,从而干扰由VTG所参与的下丘脑-垂体-性腺轴与免疫系统的正常生理过程。

氟橡胶双酚AF/BPP硫化体系硫化特性的研究

研究了双酚AF硫化体系中硫化剂双酚AF、促进剂BPP对氟橡胶硫化特性的影响以及硫化温度对硫化特性的影响。结果表明:硫化剂双酚AF的用量主要影响胶料的交联密度以及硫化时间,并且可以改善胶料的加工性能;促进剂BPP的用量主要影响胶料的硫化时间,对加工性能有一定的影响;硫化温度的提高会使交联密度下降。

环境雌激素双酚AF诱导神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系增殖与侵袭的体外实验

目的探讨环境雌激素双酚AF(bisphenol AF,BPAF)对神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y增殖,及雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)转录活性的影响。方法 SH-SY5Y细胞转染ERE-Luc或Cat D-Luc荧光素酶报告基因后,使用0.01μmol/L、0.03μmol/L、0.1μmol/L、0.3μmol/L、1μmol/L、3μmol/L和10μmol/L浓度梯度的BPAF处理SH-SY5Y细胞,采用荧光素酶报告基因实验(luciferase)检测BPAF对ERα转录活性的影响;使用BPAF作用诱导ERα转录活性的EC_(max)浓度处理SH-SY5Y细胞,采用CCK-8实验检测细胞样品在450 nm波长的吸光度值;在ERα表达阴性的三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞系MDA-MB-231中转染ERα表达载体;在SH-SY5Y细胞中转染ERα的小干扰RNA(si RNA)或使用ERα的拮抗剂ICI-182780(100 nmol/L)预处理SH-SY5Y细胞后,检测BPAF对ERα转录活性的诱导作用或对SH-SY5Y细胞增殖/侵袭的促进作用。结果 BPAF能够剂量依赖性地(R^2=0.94,P=0.007 6)在SH-SY5Y细胞中提高ERα的转录活性,其EC_(50)值为(0.44±0.09)μmol/L,EC_(max)值为3μmol/L;在SH-SY5Y细胞中转染ERα的si RNA载体,或使用ERα的拮抗剂(100 nmol/L ICI-182780)处理SH-SY5Y细胞能够显著下调BPAF诱导的ERα转录活性(抑制率分别为76.97%和77.75%),及其对SH-SY5Y细胞增殖(抑制率分别为77.42%和86.76%)、侵袭的促进作用(抑制率分别为95.87%和105.56%)。结论 BPAF可能通过诱导ERα的转录活性,促进神经母细胞瘤细胞系的增殖与侵袭。

双酚AF型聚碳酸酯的制备与性能

以三光气和双酚AF为原料,采用界面缩聚法合成双酚AF型聚碳酸酯,得到最佳的聚合条件为:三光气和双酚AF的物质的量之比为1.3∶3,催化剂三乙胺的用量为双酚AF质量的4%,反应温度为35℃,反应时间为60 min。通过傅里叶变换红外吸收光谱、乌氏黏度计、同步热分析仪、热变形/维卡软化温度测试仪及极限氧指数测定仪对制备样品进行了结构和性能表征,结果表明,制备样品为双酚AF型聚碳酸酯,样品的黏均分子量为32000。玻璃化转变温度为164.3℃,热失重5%的温度为440.8℃,热变形温度为149℃、维卡软化温度为157℃,具有较好的耐热性能;极限氧指数为29.5%,具有较好的阻燃性能。样品经碱溶液浸泡后质量损失率较小,耐碱腐蚀性能较好。样品在很多有机溶剂中都有很好的的溶解性。

双酚AF的简便合成

常压下,甲基磺酸催化六氟丙酮三水合物和苯酚,一步合成了双酚AF。优化了反应条件,在n(HFA.3H2O)∶n(PhOH)∶n(CH3SO3H)=1∶3.5∶3.0、回流40h条件下,HFA.3H2O转化率达94%,双酚AF相对于HFA.2H2O的选择性和收率分别为93%和87%。

双酚AF/BPP硫化体系对氟橡胶性能的影响

试验研究双酚AF、苄基三苯基氯化磷(BPP)用量及一段硫化温度对氟橡胶性能的影响。结果表明,随着双酚AF用量的增大,胶料的ML减小,MH增大,t10和t90延长;硫化胶的硬度和100%定伸应力增大,拉断伸长率和拉断永久变形减小,拉伸强度呈先升后降趋势。随着BPP用量的增大,胶料的ML增大,t10和t90缩短;硫化胶的物理性能变化不大。随着一段硫化温度的升高,胶料的ML和MH减小,ts1和t90缩短;硫化胶的物理性能下降。

双酚AF胁迫对雄性斑马鱼成鱼甲状腺组织及激素水平的影响

为评价双酚AF(BPAF)的甲状腺毒性,以雄性斑马鱼成鱼为受试模式生物,采用半静态染毒的方式对雄性斑马鱼成鱼染毒14 d(0、5、50和500μg·L^(-1)),分别设置7 d、14 d 2个时间节点,通过酶联免疫法(ELISA)分别检测斑马鱼血浆中总三碘甲腺原氨酸(TT3)、总甲状腺素(TT4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)的含量水平,并对14 d暴露后斑马鱼甲状腺进行组织学检测分析。结果显示随着暴露浓度的提高,出现甲状腺滤泡上皮细胞增生,滤泡组织变形明显,细胞胶质缺失等病理学变化。雄性斑马鱼在BPAF暴露情况下,血浆中TT3、TT4、FT3、FT4含量随着暴露浓度的提升和时间的延长出现显著上升,呈现出甲状腺功能亢奋的干扰效应。

双酚AF与小牛胸腺DNA的作用机理

利用紫外-可见光谱法、荧光光谱法、圆二色光谱法(CD)和红外光谱法(FT-IR)并结合化学计量学多元曲线分辨-交替最小二乘法(MCR-ALS)、粘度测量及分子模拟技术,研究在生理酸度条件下(pH 7.4),环境雌激素双酚AF(BPAF)与小牛胸腺DNA(ctDNA)的相互作用机理。荧光滴定结果表明,ctDNA通过静态猝灭的方式降低BPAF的内源荧光,氢键与疏水作用为主要结合驱动力,二者通过嵌插方式发生相互作用,结合常数为10~3数量级。ctDNA相对粘度的增加进一步证实了二者间的嵌插结合,CD和FT-IR光谱分析表明,BPAF主要以嵌插方式结合在ctDNA的G、C碱基富集区,而导致ctDNA的B型构象变得松散。此外,引入MCR-ALS算法对BPAF-ctDNA体系的紫外光谱数据进行分析,得到了反应体系中3个组分(ctDNA、BPAF及ctDNA-BPAF复合物)浓度变化趋势,实现了对该反应过程的监控。

双酚AF诱导乳腺癌细胞增殖的分子机制

从细胞水平上研究不同浓度双酚AF(BPAF)对MCF-7人乳腺癌细胞系的细胞增殖能力、细胞凋亡、细胞周期等终点的影响;以新型雌激素膜受体GPER1介导的PI3K/Akt和ERK1/2信号通路为靶点,研究低浓度BPAF对该信号通路相关基因表达的影响,以及其在诱导乳腺癌细胞增殖中的作用,评估其增殖效应机制.结果表明,低浓度BPAF(0.001~1μmol/L)能够诱导MCF-7细胞的增殖,使S期细胞比例升高,并且激活雌激素信号通路相关基因mRNA的表达;在较高浓度时(>10μmol/L)能抑制细胞活力,诱导细胞凋亡.通过特异性靶点抑制剂发现GPER1在mRNA层面上激活了PI3K/Akt和ERK1/2信号通路,并且该信号通路的激活可能是BPAF引起MCF-7细胞增殖的关键机制,并且ERα也在其中起到了重要的作用.

双酚AF硫化体系的硫化特性分析

研究了双酚AF硫化体系对氟橡胶硫化特性的影响。研究表明采用双酚AF硫化体系对胶料的加工性能无任何影响 ;在硫化体系中 ,BPP(苄基三苯基氯化磷 )对胶料硫化特性的影响较双酚AF更为明显。本文的研究结果为高性能氟橡胶混炼胶的设计提供依据。

氟橡胶中双酚AF硫化体系的硫化特性分析

研究了双酚AF硫化体系对氟橡胶硫化特性的影响。结果表明 :双酚AF硫化体系中硫化剂及促进剂用量的变化对胶料的加工性能无任何影响 ;在硫化体系中 ,BPP(苄基三苯基氯化磷 )对胶料硫化特性的影响较双酚AF更为明显。

氟橡胶双酚AF/BPP硫化体系的研究

研究了硫化剂双酚AF、促进剂BPP用量及硫化温度对氟橡胶硫化特性的影响。结果表明:双酚AF和BPP的用量主要影响胶料的交联密度及硫化时间,并对加工性能有一定的影响;硫化温度的提高会缩短焦烧时间和正硫化时间,但有使交联密度下降的趋势。

二氧化钛光催化降解双酚AF研究

系统研究了双酚AF在二氧化钛溶液中的光催化降解行为。就溶解氧、二氧化钛投加量、氟离子浓度和双酚AF的初始浓度等因素对双酚AF降解的影响进行了详细讨论。研究重点是双酚AF的降解动力学以及在降解过程中所产生的氟离子浓度。当双酚AF的初始浓度是40μmol/L时,经过540 min的光催化降解,反应体系的总有机碳去除率超过97%,此时溶液中氟离子的浓度为0.98 mg/L。双酚AF在二氧化钛溶液中的降解符合Langmuir-Hinshelwood动力学模型,其降解动力学常数是1.21μmol/(L·min)。结果表明,二氧化钛光催化可以有效的去除双酚AF,并且不产生其它二次污染物。

双酚AF/BPP硫化体系对氟橡胶2462性能的影响

研究了双酚AF和BPP对氟橡胶2462性能的影响。结果表明,随着双酚AF用量的增大,胶料的最大转矩逐渐增大,强度变化较小,硫化胶压缩永久变形降低,脆性温度呈下降的趋势;随着BPP用量的增加,胶料的焦烧时间和正硫化时间缩短,硫化胶压缩永久变形增大,脆性温度逐渐升高,但是由于BPP对交联密度的提高贡献不大,因此硫化胶的力学性能变化不明显。

双酚AF的合成研究进展

介绍了双酚AF的发展现状、理化性质、光谱性质、精制方法及应用。综述了双酚AF国内外的合成研究进展情况。