双酯型乌头生物碱对照提取物的制备及其应用研究

目的:以定量用双酯型乌头生物碱对照提取物替代单体对照品,修订川乌含量测定方法。方法:制备定量用对照提取物,标定和协作标定,对其中的乌头碱、次乌头碱和新乌头碱含量进行赋值。采用HPLC法,流动相为乙腈和0.2%冰醋酸溶液(三乙胺调p H至6.2),梯度洗脱,检测波长235 nm;并比较使用单体对照品和对照提取物的含量测定结果。结论:定量用对照提取物可替代乌头碱等单体对照品,用于川乌药材中双酯型生物碱的含量测定。

不同灭菌工艺对生川乌中乌头类双酯型生物碱成分及产品质量影响研究

目的:在保证生川乌药效的前提下,筛选最优灭菌工艺。方法:分别采用热压灭菌、干热灭菌、钴-60辐照灭菌三种方法进行灭菌处理,采用HPLC法考察灭菌后乌头类双酯型生物碱含量变化情况,同步考察药材及其产品微生物数量是否符合标准,以综合评估大生产适用工艺。结果:3种灭菌方法均能使产品符合成品质量标准,综合考虑灭菌后样品微生物数量、指标成分含量、效率等因素,干热灭菌工艺是最优工艺。结论:在干热灭菌条件下,产品微生物限度符合要求,乌头类双酯型生物碱转移率较优,生产效率可接受,可作为工业生产最优工艺。

超高效二维液相色谱法测定复方南星止痛膏中双酯型乌头生物碱的含量

目的:采用在线中心切割超高效二维液相色谱(2D-UPLC)法,建立同时测定复方南星止痛膏中3个双酯型乌头生物碱(新乌头碱、乌头碱和次乌头碱)的含量测定方法。方法:一维UPLC采用Waters XBridgeBEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×50 mm 1.7μm),以甲醇-0.008%二乙胺为流动相,梯度洗脱,流速0.1 mL·min^(-1),柱温18℃;二维UPLC采用Waters XBridge BEH C_(18)色谱柱(3.0 mm×100 mm 1.7μm),以乙腈-0.01%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速0.7 mL·min^(-1),柱温40℃。进样量1μL,检测波长235 nm。结果:新乌头碱、乌头碱和次乌头碱的线性范围分别为0.66～9.90、0.55～8.20和0.91～13.72μg·mL^(-1),R2分别为0.999 5、0.999 9和0.999 6,线性关系良好;3个成分的平均加样回收率在82.5%～88.8%之间,方法的准确度和稳定性均较好;复方南星止痛膏中新乌头碱、乌头碱和次乌头碱含量分别在3.2～5.0、0.9～1.3、8.5～10.4μg·g^(-1)范围内。结论:该方法有效改善了复方南星止痛膏中待测组分的分离度,极大提高了检测灵敏度,对制剂中的3个双酯型乌头生物碱进行准确定量分析,提高产品的质量控制水平,并为临床用药提供理论支持。

乌头类双酯型生物碱水解转化规律及含量计算方法研究

目的研究乌头类双酯型生物碱水解转化规律,建立LC-MS定性分析及HPLC定量分析乌头类双酯型生物碱及其水解产物方法。方法通过控制乌头碱、新乌头碱、次乌头碱3种双酯型生物碱的水解条件,分别获得不同阶段的水解产物,从而推导各水解产物的精确质量浓度。结果根据LC-MS定性分析结果,乌头类生物碱水解规律为乌头类双酯型生物碱先水解生成焦乌头碱类生物碱,再继续水解生成苯甲酰乌头原碱类生物碱;并根据水解规律分别计算出焦乌头碱类生物碱、苯甲酰乌头原碱类等乌头类生物碱水解产物的精确质量浓度。HPLC方法学表明,焦乌头碱、焦新乌头碱、焦次乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱分别在0.70～44.64μg.mL-1(r=0.999 7);0.34～21.77μg.mL-1(r=0.999 9);0.38～24.37μg.mL-1(r=0.999 9);0.48～30.74μg.mL-1(r=0.999 9);0.41～26.38μg.mL-1(r=0.999 9);0.42～27.08μg.mL-1(r=0.999 7)内线性关系良好。结论本实验得出了乌头类双酯型生物碱水解转化规律,并建立了计算不同水解阶段水解产物的方法,其专属性高、定量简便,为乌头类生物碱及其水解产物的定量分析和乌头类中药材炮制、质量控制等提供了简便可行的方法。

响应曲面法优化生草乌干热抑菌最佳工艺

目的:通过响应曲面法优化生草乌干热抑菌工艺条件。方法:以成品制剂微生物(细菌、霉菌)数量和乌头类双酯型生物碱转移率为评价指标,选取加热温度、加热时间、铺盘厚度为考察因素,利用响应曲面法优选生草乌抑菌最佳工艺。结果:生草乌最佳抑菌工艺条件:加热温度为106℃,加热时间为10 h,铺盘厚度为3 cm。结论:此工艺条件经工艺验证试验,干热后选用生草乌入药的制剂成品微生物指标可达到《中国药典》2020年版要求,重复性好,且干热前后乌头类双酯型生物碱转移率较高。

安肠液质量标准的建立

目的建立安肠液的质量标准。方法采用薄层色谱(TLC)法对制剂中木香、黄芪、白术、甘草进行定性鉴别,并对乌头双酯型生物碱进行限量检查;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定制剂中黄芪甲苷含量,色谱柱为Shimadzu Shim-packCLC-ODS柱(150 mm×6.0 mm,5μm),流动相为乙腈-水(38∶62,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为365 nm,柱温为32℃,进样量为20μL,氮气流速为2.8 L/min,漂移管温度为55℃,增益为2。结果木香、黄芪、白术、甘草的TLC图斑点清晰,分离度好,阴性对照无干扰。乌头双酯型生物碱检测限为7.5μg。黄芪甲苷质量浓度在0.0241~0.3856 mg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9996,n=5);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.3%;平均加样回收率为97.35%,RSD为2.03%(n=9)。结论所建立的质量标准准确、可靠,可于安肠液的质量控制。

附子对心血管系统作用研究的回顾及再评价(一)

附子是中医常用药物,也是有毒中药之一。由于它的效果良好而倍受重视,但又由于它的毒性而使其临床应用受到限制。因此,历代医药学家从植物,化学,药理,分析,炮制等诸方面进行了广泛的研究,试图找到发挥药效作用如强心等有效成分,但因受到附子的"毒性成分,又是有效成分"的传统观念的束缚,至今没有取得突破性进展。上世纪70～80年代,发表了附子对心血管系统作用研究的一系列文章,证明了附子的有效成分和毒性成分不是同一类物质,而是可分的。乌头碱类双酯型生物碱只具毒性作用,而无任何心血管活性作用;而强心成分是耐热的水溶性物质。同时证明附子水溶性物质对心血管系统有广泛的作用,并存在特异性对抗乌头碱类双酯型二萜类生物碱的致心律失常作用,因而具有极大的科学意义,社会效益和经济意义,并为附子的研究和应用提供了一条崭新的思路和广阔的前景。