热带假丝酵母诱变菌株筛选的两步浓缩与影印技术

为提高热带假丝酵母转化烷烃生产长链二元酸的能力 ,建立了通过两步浓缩和双重影印技术筛选获得 α、ω-氧化增强、β-氧化减弱的热带假丝酵母诱变菌株的筛选体系。热带假丝酵母经过硫酸二乙酯和紫外诱变 ,其中的 β-氧化减弱或阻断的细胞在含有制霉菌素的 SEL1-1培养基中得到浓缩 (浓缩效率为 8倍 ) ;α、ω-氧化增强的突变株在含有氯丙嗪的 YPD培养基中被进一步浓缩 (浓缩效率为 3倍 )。此外 ,应用 SEL1影印技术 ,Alk-突变株可以被快速地分离出来。在 5× 10 8个诱变处理的细胞中应用上述体系筛选获得了 43株 β-氧化减弱或阻断的菌株。接着 ,通过 SEL2影印技术 ,获得了 10株 α。