双重特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1B在配对宫颈癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨Mirk/Dyrk1B在人配对宫颈癌组织中表达的临床意义及其与其他耐药基因之间的相关性。方法实时荧光定量PCR检测Mirk/Dyrk1B在正常宫颈组织、癌旁组织和宫颈癌组织的表达,免疫组织化学(IHC)检测Mirk/Dyrk1B和3个耐药基因(Pg P、TopoⅡ和GST-π)蛋白在70例宫颈癌组织、40例癌旁宫颈组织和正常宫颈组织的表达水平,分析Dyrkl B和3个编码耐药基因蛋白在配对宫颈癌组织中的表达情况以及临床意义。结果 Mirk/Dyrk1B在宫颈癌组织的表达显著高于癌旁组织和正常宫颈组织。Dyrkl B与组织学分化程度有显著相关性(P<0.05),Dyrk1B与宫颈癌的临床分期和淋巴结转移无显著相关性(P>0.05)。Mirk/Dyrk1B和GST-π存在相关性(P<0.01)。结论Mirk/Dyrk1B在宫颈癌组织中高度表达,并与耐药基因GST-π蛋白表达相关,参与宫颈癌的发生和多药耐药性,可能成为临床早期诊断的肿瘤标记和一个新的目标基因,用于治疗宫颈癌。

探讨双重特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1B在宫颈癌中的潜在促癌机制

目的 探讨DRYK1B在宫颈癌中的促癌机制及其临床意义。方法 采用生物信息学数据分析及实验验证,探索DRYK1B在宫颈癌的生长、迁移、凋亡等方面的作用。结果 DYRK1B基因在宫颈鳞状细胞癌肿瘤中的表达量显著高于正常宫颈组织;DYRK1B基因高表达的患者无瘤生存率明显降低;免疫组化及Western blot实验结果显示DYRK1B在宫颈癌组织中的高表达。DYRK1B抑制剂AZ191处理宫颈癌Siha细胞系后,其生长受到抑制,迁移能力减弱,凋亡程度增加。结论 DYRK1B通过蛋白激酶相关通路促进宫颈癌细胞生长及迁移,抑制肿瘤细胞凋亡。

趋化因子CXC配体13、双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1b蛋白阳性表达与宫颈癌患者相关病理学参数的关联性探究

目的:探讨趋化因子CXC配体13(CXCL13)、双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1b(Dyrk1b)蛋白阳性表达与宫颈癌患者相关病理学参数的关联性。方法:选取2018年1月—2020年3月我院宫颈癌患者63例,取其手术切除癌组织及癌旁正常宫颈组织各63份,检测并比较两种组织中CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率,同时比较不同病理学参数癌组织CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达情况,分析其阳性表达与相关病理学参数关联性。结果:癌组织CXCL13蛋白阳性表达率为65.08%(41/63),Dyrk1b蛋白阳性表达率为80.95%(51/63),均高于癌旁正常宫颈组织的0.00%(0/63)、14.29%(9/63)(P<0.05);不同病灶直径、分化程度、FIGO分期、淋巴结转移、肌层浸润深度癌组织CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达均有明显差异(P<0.05);经Spearman分析得知,CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达与病灶直径、FIGO分期、淋巴结转移、肌层浸润深度呈正相关,与分化程度呈负相关(P<0.05)。结论:宫颈癌组织中CXCL13、Dyrk1b蛋白均呈高表达状态,且阳性表达与相关病理学参数呈明显相关性,可作为评估病情进展的生物学标志物。

细胞质内微环境直接影响FGFR1酪氨酸激酶介导的SNT1细胞特异性磷酸化(英文)

成纤维细胞生长因子受体(FGFR)介导的SNT1(亦称为FRS2)底物磷酸化具有宿主细胞以及受体特异性。为探明这种宿主细胞特异性的决定因素,我们构建了1个FGFR2Ⅲb/R1嵌合受体。该嵌合受体具有1个FGFR2Ⅲb的胞外片段及1个FGFR1蛋白质酪氨酸激酶片断。当表达在3T3细胞(内源性受体为FGFR1并能强烈响应FGFR1的信号)以及DTE-R1/100细胞时,该嵌合受体能即刻诱导SNT1磷酸化。DTE-R1/100细胞为经长期培养的带有外源性FGFR1的非恶性前列腺肿瘤上皮细胞(DTE)并已获得未转化DTE细胞所不具备的FGFR1信号响应性。与此相反,当表达在非转化DTE细胞或未经长期培养的FGFR1转化细胞(DTE-R1)时,FGFR2Ⅲb/R1嵌合受体则无法诱导SNT1磷酸化。我们曾报导DTE细胞对FGFR1介导的SNT1磷酸化活力及其刺激细胞生长信号的响应性是一种获得性的性质,这种性质的获得与细胞恶化是紧密联系在一起的。在此我们进一步证明FGFR介导的SNT1磷酸化具有宿主细胞特异性。这些结果表明细胞内围绕着激酶的微环境而不是细胞外环境决定了SNT1是否可为FGFR1所磷酸化。而且,长期受外源性FGFR1刺激诱发DTE细胞内微环境的变化,从而使表达在DTE细胞里的FGFR1激酶可强烈地磷酸化SNT1。

肝缺血再灌注时葡萄糖调节蛋白78、葡萄糖调节蛋白94、磷酸化蛋白激酶B1及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-12的表达及意义

目的动态观察大鼠肝缺血再灌注（HIRI）不同时限葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、葡萄糖调节蛋白94（GRP94）、磷酸化蛋白激酶B1（p-Akt1）及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶12（Caspase-12）的表达变化，并探讨其意义。方法将55只Wistar雄性大鼠随机分为正常组（n=5）、假手术组（n=25）、缺血再灌注组（n=25），无损伤动脉钳阻断肝血流45min后使其复流，用免疫组织化学法检测GRP78、GRP94及Caspase-12在再灌注0、3、12、24、72h时的蛋白表达，用Western blot法检测同期p-Akt1蛋白表达。结果GRP78在缺血再灌注组的表达显著高于正常组与假手术组（P〈0．01），在缺血再灌注0h时表达开始上升（393．04±79．06），12h时达峰值（2369．38±182．53），24h（1023．02±185．61）及72h（505．19±102．89）表达开始下降，但仍高于前述各组表达水平。GRP94在缺血再灌注组的表达显著高于正常组与假手术组（P〈0．01），在缺血再灌注0h时表达开始上升（168．47±21．08），12h时达峰值（678．80±52．62），24h（425．78±38．63）及72h（173．99±36．82）表达降低。Caspase-12在缺血再灌注组的表达显著高于正常组与假手术组（P〈0．01），在缺血再灌注0h时表达开始上升（647．00±73．68），12h达峰值（6867．67±601．11），24h（2356．12±210．65）及72h（675．89±109．3）表达开始降低。p-Akt1在缺血再灌注组各观察时限点的表达趋势与GRP78一致，显著高于正常组及假手术组。结论大鼠肝缺血再灌注损伤可触发经内质网途经的Caspase级联反应活化；GRP78与GRP94可能通过降低内质网负荷和促进糖异生而发挥细胞保护作用；p-Akt1可能是此过程中机体通过磷酸肌醇3激酶（P13K）／Akt信号通路上调GRP78表达的重要信号分子。

Dyrk1b蛋白表达水平与宫颈癌同步放化疗疗效的关系

目的:研究双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1b(dual specificity tyrosine phosphorylation regulated kinase 1b,Dyrk1b)蛋白在宫颈癌组织中的表达及其与放化疗治疗预后的关系。方法:选取2009年04月至2013年03月于我院就诊的宫颈癌患者80例,采用免疫组化法检测Dyrk1b蛋白表达水平。所有患者均接受三维适形放疗(3D-CRT)同步顺铂治疗。对患者进行为期5年的随访,并分析Dyrk1b蛋白表达与患者临床病理及预后之间的关系。结果:Dyrk1b低表达组有34例,高表达组有46例,Dyrk1b的高表达与年龄、病理类型无关,而与FIGO分期、分化程度、淋巴结转移和脉管浸润密切相关(P<0.05)。高、低Dyrk1b蛋白表达组近期疗效无统计学差异(P>0.05),而远期疗效经Kaplan-Meier曲线分析显示,Dyrk1b蛋白高表达组患者的中位生存时间少于低表达组(29月vs 39月,Log-rank test P=0.012)。结论:Dyrk1b蛋白在宫颈癌组织中高度表达,且随着FIGO分期的升高、分化程度的降低、淋巴结的转移和浸润深度的增加而表达增加,并影响患者的长期预后。

宫颈癌组织中CXCL13、Dyrk1b蛋白表达变化及意义

目的观察宫颈癌组织中趋化因子CXC配体13(CXCL13)、双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1b(Dyrk1b)蛋白表达变化,并探讨其临床意义。方法手术切取癌组织及其癌旁正常宫颈组织(距离肿瘤边缘1~2cm)77例份,采用免疫组化法检测组织中CXCL13、Dyrk1b蛋白表达,分析二者表达的相关性及其与宫颈癌患者临床病理参数的关系;对患者随访9~40个月,统计3年生存率,分析CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达与患者生存率的关系。结果宫颈癌组织中CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率高于癌旁正常组织(P均<0.05)。CXCL13蛋白阳性表达与肿瘤直径、国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移、浸润深度、组织分化程度有关(P均<0.05),Dyrk1b蛋白阳性表达与肿瘤直径、FIGO分期、淋巴结转移及浸润深度有关(P均<0.05)。宫颈癌组织中CXCL13与Dyrk1b蛋白表达呈正相关(r=0.361,P=0.023)。CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达的宫颈癌患者术后3年生存率均低于阴性表达患者(P均<0.05)。结论CXCL13、Dyrk1b蛋白在宫颈癌组织中呈高表达,二者协同参与肿瘤的进展,并影响患者预后。

miR-369-3p通过靶向调控DYRK1A对乳腺癌MDA-MB-231细胞放疗敏感性的影响

目的研究微小RNA(miRNA)-369-3p靶向双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶(DYRK)1A对乳腺癌MDA-MB-231细胞放疗敏感性的影响,并探讨其机制。方法体外培养乳腺癌MDA-MB-231细胞,其中miR-369-3p mimic组、miR-369-3p mimic NC组、miR-369-3p inhibitor组、miR-369-3p inhibitor NC组分别添加对应转染混合液,对照组只添加培养基对照处理,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中miR-369-3p水平;0、2、4、6、8 Gy X线照射后CCK-8法检测细胞增殖情况,0 Gy(没有X线照射)和6 Gy照射组进行下一步实验,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western印迹检测细胞中DYRK1A、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(caspase)3、caspase9蛋白表达情况,Targetscan预测DYRK1A基因与miR-369-3p结合位点。结果分别与对照组、miR-369-3p mimic NC组、miR-369-3p inhibitor NC组相比,miR-369-3p mimic组细胞中miR-369-3p水平显著升高(P<0.05),miR-369-3p inhibitor组miR-369-3p水平显著降低(P<0.05)。与miR-369-3p mimic组相比,miR-369-3p inhibitor组细胞中miR-369-3p水平显著降低(P<0.05)。分别与对照组、miR-369-3p mimic NC组、miR-369-3p inhibitor NC组相比,0、2、4、6、8 Gy X线照射下miR-369-3p mimic组存活率显著降低,miR-369-3p inhibitor组存活率显著升高(P<0.05)。随着X线剂量升高,对照组、miR-369-3p mimic NC组、miR-369-3p inhibitor NC组、miR-369-3p mimic组、miR-369-3p inhibitor组细胞存活率显著降低(P<0.05)。在0、6 Gy照射下,分别与对照组、miR-369-3p mimic NC组、miR-369-3p inhibitor NC组相比,miR-369-3p mimic组凋亡率、caspase3、caspase9蛋白水平显著升高,DYRK1A蛋白水平显著降低(P<0.05);miR-369-3p inhibitor组凋亡率、caspase3、caspase9蛋白水平显著降低,DYRK1A蛋白水平显著升高(P<0.05)。与0 Gy相比,6 Gy照射下对照组、miR-369-3p mimic NC组、miR-369-3p inhibitor NC组、miR-369-3p inhibitor组凋亡率、caspase3、caspase9蛋白水平显著升高,DYRK1A蛋白水平显著降低(P<0.05);miR-369-3p mimic组凋亡率、caspase9蛋白水平显著升高,DYRK1A蛋白水平显著降低(P<0.05)。DYRK1A基因与miR-369-3p存在结合位点。结论miR-369-3p可通过靶向调控DYRK1A调节乳腺癌MDA-MB-231细胞放疗敏感性,过表达miR-369-3p可增强MDA-MB-231细胞对X线敏感性。

组织CXCL13和Dyrk1b表达预测卵巢癌预后的临床意义

目的观察组织CXCL13和双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1b(Dyrk1b)表达量在预测卵巢癌患者预后的临床价值。方法选择2012年1月至2016年1月行手术治疗的卵巢癌患者116例为卵巢癌组;选择同期行卵巢良性肿瘤98例和无病变区域的卵巢组织30例,分别为良性肿瘤组和对照组。3组的组织标本采用免疫组织化学法检测,比较3组表达CXCL13和Dyrk1b量的差别,卵巢癌组织表达CXCL13和Dyrk1b量与临床病理指标的关系,随访2年后生存组和死亡组的差异,预测死亡方面的灵敏度和特异性。结果卵巢癌组组织表达CXCL13和Dyrk1b明显高于良性卵巢瘤组和对照组(P<0.01),而良性肿瘤组明显高于正常对照组(P<0.01)。卵巢癌组织表达CXCL13和Dyrk1b量与分化程度、FIGO分期、淋巴结转移、腹腔积液、CA125水平和对化疗药物敏感性具有相关性(P<0.01),而与年龄、绝经、组织类型和肿瘤直径无相关性(P>0.05)。死亡组的卵巢癌组织CXCL13和Dyrk1b表达量明显高于生存组(P<0.01)。通过受试者曲线分析,发现CXCL13和Dyrk1b表达量在预测死亡具有较高的灵敏度和特异性,联合检测的灵敏度87.1%,特异性88.9%,曲线下面积明显优于单纯指标CXCL13(Z=2.200,P=0.028)和Dyrk1b(Z=2.573,P=0.010),而在预测死亡方面CXCL13和Dyrk1b差异无统计学意义(P>0.05)。结论CXCL13和Dyrk1b参与了卵巢癌的发生发展,联合检测组织CXCL13和Dyrk1b表达量对预后判断具有重要的临床价值。

DYRK1B蛋白在宫颈癌组织中的表达及意义

目的探讨双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1B(DYRK1B)蛋白在宫颈癌组织中的表达情况及其临床意义。方法选取84例宫颈癌病理组织标本(宫颈癌组)、40例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织标本(CIN组)、40例正常宫颈组织标本(对照组),采用免疫组织化学染色方法检测3组标本中DYRK1B蛋白的表达情况,并探讨DYRK1B蛋白表达与宫颈癌病理特征的关系。结果宫颈癌组中DYRK1B蛋白的阳性表达率为72.62%,高于CIN组中的22.50%和对照组的12.50%(P﹤0.05);CIN组和对照组中的DYRK1B蛋白的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);不同临床分期、组织浸润深度、分化程度、淋巴结转移情况的宫颈癌组织中DYRK1B蛋白的阳性表达率比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);而不同年龄、病理学类型的宫颈癌组织中DYRK1B蛋白的阳性表达率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。结论 DYRK1B蛋白在宫颈癌组织中表达上调,可能与宫颈癌的发生发展有关。

4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性

目的:研究4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性。方法:4’O-甲基补脂查尔酮B孵育胃癌细胞系AGS后,采用MTT和集落克隆形成实验检测细胞生长,划痕实验检测细胞迁移,流式细胞实验检测细胞周期和凋亡,Western blot实验检测双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(DYRK1A)蛋白表达。结果:4’O-甲基补脂查尔酮B对胃癌细胞AGS的IC_(50)为(7.7±1.3)μmol/L,并能浓度依赖性地抑制集落克隆形成以及抑制迁移,诱导周期阻滞及凋亡,并抑制DYRK1A的表达(P<0.05)。结论:4’-O-甲基补骨脂查尔酮B能够通过抑制DYRK1A产生显著的体外抗胃癌活性。

Dyrk1A经ASF调控CaMKⅡδ可变剪接在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用

目的:探讨双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(Dyrk1A)经可变剪接因子(ASF)对钙/钙调素依赖蛋白激酶Ⅱδ(CaMKⅡδ)可变剪接的调控在肾血管性高血压大鼠心肌肥厚中的作用。方法:制备两肾一夹肾血管性高血压大鼠模型,给予Dyrk1A抑制剂表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和哈尔碱(harmine)干预,观察大鼠血压及心肌肥厚程度变化,逆转录-多聚酶链反应法检测CaMKⅡδ可变剪接的改变,免疫印迹法检测大鼠心肌Dyrk1A和ASF蛋白质表达的变化。结果:两肾一夹术后8周,与假手术组相比,手术组大鼠血压显著升高(P<0.05),大鼠左室重、左室重/体重比值及心肌细胞面积均增高(P<0.05),同时该组大鼠心肌中Dyrk1A蛋白表达增加,ASF蛋白表达下降(P<0.05),CaMKⅡδ亚型可变剪接表现为CaMKⅡδA、δB mRNA表达升高,δC mRNA表达降低(P<0.05);与手术组相比,EGCG和哈尔碱组大鼠左室重、左室重/体重比值和心肌细胞面积下降,同时大鼠心肌中Dyrk1A蛋白表达降低,ASF蛋白表达上调,CaMKⅡδ亚型可变剪接逆转(均P<0.05)。结论:Dyrk1A可通过ASF调控CaMKⅡδ的可变剪接,从而参与肾血管性高血压大鼠心肌肥厚的发生。

帕金森病患者血浆DYRK1A tau p-tau水平与认知功能障碍的关联性研究

目的 探讨帕金森病(PD)患者血浆双底物特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(DYRK1A)、tau、磷酸化tau(p-tau)水平与认知功能障碍的关联性及对认知功能障碍的诊断价值。方法 纳入87例PD患者,收集其一般资料,根据蒙特利尔认知评估(MoCA)量表评分将其分为认知功能正常组(PD-NC组,17例)、轻度认知障碍组(PD-MCI组,30例)和痴呆组(PDD组,40例)。采用酶联免疫吸附试验法检测研究对象血浆DYRK1A、tau、p-tau水平,比较不同认知功能组中血浆DYRK1A、tau、p-tau水平的差异,分析这三个指标对PD痴呆的诊断效能。结果 PD-NC组的血浆DYRK1A水平显著低于PD-MCI组(P=0.033)及PDD组(P=0.005),而PD-MCI组与PDD组比较差异无统计学意义(P=0.468)。PD-NC组的血浆tau水平显著低于PDD组(P=0.006),但PD-NC组与PD-MCI组比较以及PD-MCI组与PDD组比较差异无统计学意义(P>0.05)。三组间p-tau水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线结果显示tau蛋白具有诊断PD痴呆的应用价值(AUC=0.658,P=0.012),其最佳截断值为175.88 pg/ml,对应的灵敏度为75.00%,特异度为55.30%,联合指标DYRK1A、p-tau或三指标联合,均可提高诊断效能,其中以DYRK1A+tau+p-tau三指标联合的诊断效能最高(AUC=0.688)。单一指标DYRK1A、p-tau未显著出诊断PD痴呆的应用价值(P>0.05)。结论 不同认知功能障碍的PD患者血浆DYRK1A、tau水平存在差异,tau水平对PD痴呆有诊断效能,联合检测可一定程度上提高诊断的敏感性。

基于深度神经网络的DYRK1A抑制剂预测模型研究

目的:构建基于深度神经网络(deep neural network,DNN)的双底物特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A(DYRK1A)抑制剂预测模型,为筛选DYRK1A抑制剂提供计算工具。方法:从ChEMBL数据库中收集了DYRK1A抑制剂和非抑制剂共927个,通过随机采样10次建立了10组训练集和测试集,并计算出每个化合物的2种不同的分子特征,即MACCS指纹和Morgan2指纹,采用深度神经网络算法建立了20个模型,通过比较研究确定其中性能最佳的模型,并且对模型进行了Y-随机化检验、应用域和相似度图分析。结果:基于第2对训练-测试集Morgan2指纹的DNN模型(DNN1_Morgan2)性能最佳,对测试集内化合物的分类准确度为0.821,马修斯相关系数和ROC曲线下面积分别为0.647和0.917。结论:此最优模型可用于DYRK1A抑制剂的活性预测、虚拟筛选,并用于先导化合物的设计及优化。

Dyrk1b、Rad51及ERCC1基因在不同生存期上皮性卵巢癌组织中的表达研究

目的探讨双重特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1b（Dyrk1b）、Rad 51、核苷酸切除修复交叉互补组1（ERCC1）基因在不同生存期上皮性卵巢腺癌组织中的表达差异,3种基因间的联系及对预后的影响。方法分析于2003年7月至2012年6月就诊于河南省肿瘤医院的43例上皮性卵巢癌患者的一般资料,生存期以及患者的Dyrk1b、Rad 51和ERCC1基因表达。结果 Dyrk1b表达量在3年内生存期患者中较其他两组均高[生存期3年内（A组）6.26±1.811,生存期在3~5年（B组）3.63±1.373,生存期5年以上（C组）4.77±2.493];Rad 51表达量在3~5年生存期组较5年以上组高;ERCC1表达量在3年内生存期组患者中表达量较其他两组均高,差异均有统计学意义（P〈0.05）;ERCC1基因表达水平与铂类耐药呈正相关（r=0.703,P〈0.05）;Dyrk1b、ERCC1基因表达量与患者的生存期有关[r（ERCC1）=-0.774,P=0.000;r（Dyrk1b）=-0.187,P=0.041];Dyrk1b基因表达水平与Rad 51基因表达呈正相关（r=0.166,P〈0.05）。结论Dyrk1b、Rad 51及ERCC1基因表达量在不同生存期上皮性卵巢腺癌组织中存在差异,且与患者预后相关。

大豆异黄酮对阿尔茨海默病大鼠海马RAGE介导的信号转导通路的影响

目的观察大豆异黄酮(soybean isoflavones)对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠高级糖化终产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)介导的信号转导系统的影响。方法采用β淀粉样蛋白25-35片段(amyloidβ25-35,Aβ25-35)双侧海马注射建立AD大鼠模型,60只大鼠随机分为模型组、大豆异黄酮高剂量组[30mg/(kg·d)]、大豆异黄酮低剂量组[10mg/(kg·d)]、雌激素组[0.4mg/(kg·d)]及假手术组,每组12只。大豆异黄酮高、低剂量组和雌激素组造模后3天灌胃给药(2mL/只),模型组与假手术组给予等体积的0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)灌胃,连续21天。酶联免疫吸附法观察各组大鼠海马组织RAGE、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量。分光光度法检测大鼠海马组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine-containing aspartate-specific protease-3,Caspase-3)活性。免疫组织化学法观察大鼠海马组织磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylation extracellular signal-regulatedkinase1/2,P-ERK1/2)的表达。结果与模型组比较,大豆异黄酮可显著降低AD大鼠海马RAGE蛋白、IL-6含量、Caspase-3活性及ERK1/2蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论大豆异黄酮对AD大鼠海马组织RAGE介导的炎症信号通路具有下调作用,减弱炎症反应,降低Aβ的神经毒性,抵抗海马神经元凋亡。

Dyrk1B在卵巢上皮性癌细胞中的表达及在细胞凋亡中的作用

双重特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1B（dual—specificity tyrosine-phosphorylation regulated kinase 1B，Dyrk1B；又称Mirk）基因定位于人类第19号染色体的q12-q13．11，是一种特异性的双链酪氨酸磷酸化激酶，

宫颈癌组织中趋化因子CXCL13和Dyrk1b蛋白表达及意义

目的探讨趋化因子CXCL13、双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1b (dual specificity tyrosine phosphorylationregulated kinase 1b,Dyrk1b)蛋白在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法宫颈癌和子宫肌瘤患者各98例,分别取手术切除宫颈癌组织、癌旁组织以及子宫肌瘤组织,采用免疫组织化学法检测3组CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率;分析CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率与宫颈癌患者临床病理特征的关系;Spearman法分析CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率与临床病理特征的相关性;比较CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性与阴性表达宫颈癌患者3a生存率及无进展生存期。结果癌旁组织、子宫肌瘤组织CXCL13蛋白均呈阴性表达,宫颈癌组织CXCL13蛋白阳性表达率为66.33%;宫颈癌组织Dyrk1b蛋白阳性表达率(82.65%)高于癌旁组织(15.31%)和子宫肌瘤组织(10.20%)(P<0.05);肿瘤直径≤3cm、高分化、FIGO分期Ⅰ期、无淋巴结转移、无脉管浸润的宫颈癌患者CXCL13蛋白阳性表达率(38.89%、28.57%、49.10%、39.47%、37.14%)、Dyrk1b蛋白阳性表达率(63.89%、61.90%、70.91%、65.79%、60.00%)低于肿瘤直径>3cm(82.26%、93.55%)、中低分化(76.62%、88.31%)、FIGO分期Ⅱ期(88.37%、97.67%)、有淋巴结转移(83.33%、93.33%)、有脉管浸润(82.53%、95.23%)者(P<0.05),不同年龄、肿瘤类型宫颈癌患者CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05);Spearman相关分析显示,CXCL13、Dyrk1b蛋白阳性表达与肿瘤直径(r=0.575,P=0.023;r=0.617,P=0.033)、FIGO分期(r=0.732,P=0.001;r=0.697,P=0.021)、淋巴结转移(r=0.563,P=0.031;r=0.757,P=0.006)、脉管浸润(r=0.586,P=0.045;r=0.633,P=0.009)呈正相关,与肿瘤分化程度(r=-0.781,P=0.005;r=-0.813,P=0.001)呈负相关,CXCL13阳性表达与Dyrk1b蛋白阳性表达呈正相关(r=0.633,P=0.009);CXCL13、Dyrk1b蛋白阴性表达的宫颈癌患者无进展生存期[(25.0±10.2)、(28.0±9.8)个月]、3a生存率(63.64%、70.59%)高于CXCL13[(12.0±8.5)个月、30.77%]、Dyrk1b蛋白[(10.0±9.6)个月、32.10%]阳性表达者(P<0.05)。结论宫颈癌组织CXCL13、Dyrk1b蛋白均呈高表达,且表达程度与肿瘤进展有关,其高阳性表达率提示患者预后不良。

宫颈癌细胞DYRK1A表达水平及其与顺铂化疗敏感性的关系研究

研究宫颈癌细胞双底物特异性酪氨酸磷酸化调节激酶A(DYRK1A)表达水平及其与顺铂化疗敏感性的关系。方法 通过Real-time PCR技术比较DYRK1A mRNA在不同细胞系中的表达情况(宫颈癌细胞系Caski和SiHa,人永生化表皮细胞系HaCaT)。比较宫颈癌细胞系Caski和SiHa在分别转染DYRK1A-siRNA及DYRK1A-NC后的细胞增殖差异,通过流式细胞仪比较转染DYRK1A-siRNA及DYRK1A-NC后细胞周期和细胞凋亡率差异;采用荷瘤小鼠实验评估宫颈癌细胞顺铂敏感性。结果 宫颈癌细胞系 Caski和 SiHa 中DYRK1A相对表达量显著升高( P<0.01)。生长曲线表明,转染DYRK1A-siRNA的 Caski和 SiHa 细胞增殖能力较对照组显著降低( P<0.01)。流式细胞仪检测结果表明,转染DYRK1A-siRNA后的宫颈癌Caski和SiHa细胞相较于未转染组G1期细胞占比显著升高,S期细胞占比显著降低(P<0.01);G2期细胞占比差异无统计学意义(P>0.05)。转染DYRK1A-siRNA的宫颈癌细胞系Caski和SiHa细胞凋亡率较未转染组显著升高(P<0.01)。荷瘤小鼠实验结果显示,Caski实验组肿瘤大小增速显著降低(P<0.01)。结论 DYRK1A在宫颈癌细胞系中高表达;体外干扰宫颈癌细胞系中的DYRK1A表达量,能抑制细胞增殖、降低细胞存活率、阻滞细胞周期、增加细胞凋亡率和抑制肿瘤大小的作用,同时加强肿瘤细胞对顺铂的敏感性。