小鼠扁桃体免疫细胞受照射后DNA双链断裂损伤修复的忠实性

观察了受照射小鼠瓦尔代尔扁桃体环 (WRE)在体细胞出现DNA双链断裂修复的忠实性 ,用6 0 Coγ射线照射后观察WRE细胞凋亡的最高峰 ,在此时间点处死小鼠 ,取WRE细胞分别用脂质体和电穿孔方法介导的基因转染技术 ,将双标记基因质粒 pPMH16导入细胞。研究WRE细胞DNA双链修复的忠实性。结果表明 ,未照射WRE细胞的抗G4 18转化克隆有 6 9.75 %的 gpt基因表达 ,说明大部分断裂的 gpt基因被忠实性地修复 ;2Gy、4Gy射线照射的WRE细胞的转化克隆只有 36 .0 5 %和 2 1.5 0 %的克隆能正确表达 gpt基因功能 ,说明WRE细胞照射后DNA双链断裂的修复显著低于正常细胞 ,且剂量越大 ,修复的忠实性越低。脂质体和电穿孔方法介导的基因转染技术可用于原代细胞基因转染的研究 ,照射后的WRE细胞易发生DNA双链断裂错误重接。

DNA末端保护盾Shieldin在DNA损伤修复中的研究进展

同源重组(homologous recombination,HR)与非同源末端连接(non-homologous end joining,NHEJ)的选择机制是DNA双链断裂损伤修复的前沿科学问题。末端切除是HR修复的标志性事件,53BP1通过竞争BRCA1介导的末端切除将修复途径从HR转向NHEJ进行。近年来,多个课题组同时发现并证实Shieldin复合物是53BP1介导的两种修复途径选择的下游效应因子。Shieldin是由Rev7、SHLD1(C20orf196)、SHLD2(FAM35A)与SHLD3(CTC-534A2.2)组成的复合体蛋白,能够限制末端切除并抑制HR修复,并以53BP1依赖的方式促进NHEJ修复。该文对Shieldin结构组装、工作与活性调节机制的研究进展进行综述,同时关注Shieldin对肿瘤治疗干预的临床价值,以期为肿瘤耐药机制与逆转耐药研究提供新的线索分子。

iPS细胞基因组稳定性调控的分子机制

诱导多能干细胞(iPS细胞)在再生医学与个体化治疗中有着巨大的优势和潜力,但iPS细胞的基因组稳定性较低带来的致瘤性等潜在风险阻碍了其临床应用。在2012年国家重大科学研究计划"iPS细胞重编程过程中染色体稳定性调控的机制研究"项目资助下,我们围绕"iPS重编程中染色体稳定性的分子调控机制是什么?"这一科学问题,取得了一系列原创性的研究成果,为发展提高iPS细胞基因组稳定性以及其质量的方法奠定了理论基础。本文总结了项目的研究背景,取得的研究进展和今后的发展方向。