硫代修饰bFGF寡核苷酸对B16细胞和L1210细胞增殖的影响

目的研究bFGF寡核苷酸被硫代修饰后对肿瘤细胞增殖的影响。方法设计、合成bFGF寡核苷酸,用聚乙烯亚胺(jetPEI)介导bFGF寡核苷酸转染入黑色素瘤B16细胞和白血病L1210细胞,MTT法检测细胞增殖;微分干涉荧光显微镜观察硫代寡核苷酸在细胞中的定位;流式细胞仪分析寡核苷酸转染效率。结果正/反义硫代寡核苷酸被jetPEI介导成功转染入B16细胞和L1210细胞,在B16细胞均主要分布于细胞核,在L1210细胞分别主要分布于细胞核和细胞质。反义硫代寡核苷酸呈剂量依赖地抑制B16与L1210细胞增殖,且核苷酸突变能降低其对2种肿瘤细胞的增殖抑制。相应非修饰反义寡核苷酸也能显著抑制2种细胞增殖。正义硫代寡核苷酸能呈剂量依赖效应显著影响B16细胞增殖,显著高于非修饰正义寡核苷酸,且其抑制作用并未因核苷酸突变而降低。正义硫代寡核苷酸并不显著L1210细胞增殖,与非修饰正义寡核苷酸的效应基本一致。结论硫代修饰并未明显影响bFGF反义寡核苷酸在细胞内特异性结合核酸的性质,硫代反义寡核苷酸仍能以反义机制抑制肿瘤细胞增殖,但硫代修饰可能改变了bFGF正义寡核苷酸的某些性质,致使其于细胞内以一种非核酸特异性机制影响肿瘤细胞增殖。