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Livin基因反义寡核苷酸诱导肺腺癌A549细胞的凋亡 被引量:2
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作者 兰箭 周向东 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期390-393,共4页
目的:探讨Livin基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法:用阳离子脂质体介导LivinASODN转染A549细胞后,MTT法检测对A549细胞增殖抑制率的影响;RT-PCR法和细胞免疫荧光化学检测... 目的:探讨Livin基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)对肺腺癌细胞A549增殖和凋亡的影响。方法:用阳离子脂质体介导LivinASODN转染A549细胞后,MTT法检测对A549细胞增殖抑制率的影响;RT-PCR法和细胞免疫荧光化学检测LivinASODN转染前后,A549细胞中Livin mRNA和蛋白表达的变化;吖啶橙/溴乙锭(acridine orange/ethidium bromide,AO/EB)复合染色检测A549细胞的凋亡率。结果:在A549细胞中同时有Livinα和Livinβ的表达,Livin蛋白在细胞质和细胞核中均有分布。Livin基因ASODN可显著抑制A549细胞的增殖(P<0.01),且作用具有剂量依赖性。终浓度为400nmol/L的Lip-ASODN转染后,A549细胞Livin mRNA和Livin蛋白的表达均被明显抑制,细胞凋亡率达(31.25±5.75)%,与对照组(3.23±1.98)%相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:LivinASODN可下调Livin基因表达,有效抑制A549细胞的增殖,并促进A549细胞凋亡。因此,Livin基因有望成为肺癌基因治疗的新靶点。 展开更多
关键词 肺肿瘤 核糖核苷 反义 细胞凋亡 基因 Livin
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Survivin反义寡核苷酸联合AsI_3-cys对K562细胞凋亡的影响
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作者 戚之琳 汪茗 毕富勇 《实用医学杂志》 CAS 2008年第17期2936-2938,共3页
目的:探讨Survivin反义寡核苷酸(ASODN)联合AsI3-cys对K562细胞增殖的抑制作用和细胞凋亡的诱导作用。方法:K562细胞体外培养,人工合成并硫代修饰Survivin ASODN,通过脂质体转染进入K562细胞,同时与AsI3-cys联用,MTT法检测细胞增殖抑制... 目的:探讨Survivin反义寡核苷酸(ASODN)联合AsI3-cys对K562细胞增殖的抑制作用和细胞凋亡的诱导作用。方法:K562细胞体外培养,人工合成并硫代修饰Survivin ASODN,通过脂质体转染进入K562细胞,同时与AsI3-cys联用,MTT法检测细胞增殖抑制程度,Tunel法检测细胞凋亡指数,RT-PCR检测细胞中Survivin mRNA的表达水平,流式细胞仪检测细胞周期的变化和细胞凋亡率。结果:Survivin ASODN各浓度组对K562细胞的增殖有明显的抑制作用,能明显诱导细胞凋亡,联用组诱导K562细胞凋亡的能力与其他组相比在统计学上差异有显著性。结论:Survivin ASODN能够诱导K562细胞凋亡,并提高K562细胞对AsI3-cys的敏感性。 展开更多
关键词 核糖核苷 反义 细胞凋亡 SURVIVIN AsI3-cys
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反义寡聚核苷酸对兔角膜基质细胞的通透性 被引量:4
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作者 刘宏伟 周毅 +1 位作者 彭淑玲 王香兰 《眼科》 CAS 2001年第4期250-251,共2页
目的 :观察反义寡聚核苷酸及其脂质体对角膜基质细胞的通透性。方法 :将荧光标记的 10 0、2 0 μg/ml反义寡聚核苷酸与 5 0、10 μg/ml的反义寡聚核苷酸脂质体加入至兔角膜细胞培养板中 ,分别在 0 5和 4小时 ,荧光显微镜下观察。结果 :... 目的 :观察反义寡聚核苷酸及其脂质体对角膜基质细胞的通透性。方法 :将荧光标记的 10 0、2 0 μg/ml反义寡聚核苷酸与 5 0、10 μg/ml的反义寡聚核苷酸脂质体加入至兔角膜细胞培养板中 ,分别在 0 5和 4小时 ,荧光显微镜下观察。结果 :0 5小时 ,10 0 μg/ml反义寡聚核苷酸和 5 0、10 μg/ml反义寡聚核苷酸脂质体组细胞内有荧光 ,而 2 0 μg/ml的反义寡聚核苷酸组无荧光 ;4小时 ,所有实验组细胞内都有荧光 ,但 2 0 μg/ml反义寡聚核苷酸组荧光细胞数量少。结论 :游离反义寡聚核苷酸可进入角膜细胞中 。 展开更多
关键词 反义寡类核苷酸 荧光 角膜基质 通透性
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反义血管内皮生长因子C转染对人胃癌细胞SGC-7901成瘤性和脉管生成的影响 被引量:1
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作者 张剑波 朱鹏 +1 位作者 代远斌 王继见 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期192-194,共3页
目的观察反义血管内皮生长因子C(antiVEGF-C)基因转染对人胃癌细胞系SGC-7901成瘤性和脉管生成的影响,探讨VEGF-C在脉管新生和胃癌转移中的作用。方法30只BALB/c裸鼠随机分为转染antiVEGF-C组、转染空白质粒组及未转染质粒组(n=10),采... 目的观察反义血管内皮生长因子C(antiVEGF-C)基因转染对人胃癌细胞系SGC-7901成瘤性和脉管生成的影响,探讨VEGF-C在脉管新生和胃癌转移中的作用。方法30只BALB/c裸鼠随机分为转染antiVEGF-C组、转染空白质粒组及未转染质粒组(n=10),采用皮下注射分别转染antiVEGF-C基因、转染空白质粒及未转染质粒的SGC-7901细胞悬液0.2ml(1×107/ml),每2d注射1次,连续3次,观察裸鼠皮下肿瘤的生成速度,并对肿瘤组织中的微淋巴管及微血管密度进行检测。结果转染antiVEGF-C组裸鼠肿瘤生长速度明显减慢且瘤体较小。注射后第1、2、3周,转染antiVEGF-C组肿瘤组织中微淋巴管密度分别为4.0±2.2、6.0±3.1、9.0±2.7每高倍视野(/HF),转染空白质粒组分别为6.0±8.7、9.0±3.5、18.0±7.2/HF,未转染质粒组分别为7.0±4.9、9.0±6.4、19.0±6.5/HF,转染antiVEGF-C组肿瘤组织中微血管密度分别为3.0±2.4、5.0±2.1、8.0±1.7/HF,转染空白质粒组分别为4.0±1.8、6.0±2.7、10.0±1.3/HF,未转染质粒组分别为4.0±1.5、6.0±1.3、9.0±1.2/HF。转染antiVEGF-C组肿瘤组织中新生微淋巴管较未转染质粒组及转染空白质粒组明显减少(P<0.05),但新生微血管的数量与其他两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论antiVEGF-C转染对人胃癌细胞SGC-7901的成瘤性及淋巴管生成有明显抑制作用,但对肿瘤新生血管的形成影响不大。VEGF-C可能参与了胃癌新生淋巴管的形成过程。 展开更多
关键词 核糖核苷 反义 淋巴管生成 肿瘤形成过程 胃肿瘤
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反义寡核苷酸对K562细胞增殖和端粒酶活性的影响
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作者 应晓杨 方美云 王一 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2010年第5期293-296,300,共5页
目的 研究靶向封闭端粒酶反转录酶(hTERT)mRNA的反义硫代寡核苷酸(ASPSODN)对K562细胞目的 基因的抑制及其对端粒酶活性及细胞增殖周期和凋亡的影响.方法 ASPSODN转染到人类红白血病细胞株K562,采用MTT法、酶联免疫吸附(ELISA)法... 目的 研究靶向封闭端粒酶反转录酶(hTERT)mRNA的反义硫代寡核苷酸(ASPSODN)对K562细胞目的 基因的抑制及其对端粒酶活性及细胞增殖周期和凋亡的影响.方法 ASPSODN转染到人类红白血病细胞株K562,采用MTT法、酶联免疫吸附(ELISA)法和流式细胞术(FCM)检测K562细胞的增殖、端粒酶活性、细胞凋亡和细胞周期的改变,RT-PCR检测hTERT mRNA的表达.结果 0.6μmol/L的ASPSODN(0.42±0.16)能明显下调hTERT表达(P〈0.05),端粒酶相对活性降至52%;MTT法检测显示明显抑制K562细胞增殖活性;FCM显示细胞凋亡率为10.31%,PI染色显示细胞被阻止在G1/G0期,S期及G2/M期的细胞减少,但无特征性的凋亡峰.结论 ASPSODN靶向hTERT能特异性抑制K562细胞hTERT mRNA的表达,明显下调端粒酶活性,抑制K562细胞增殖,并通过降低细胞的端粒酶活性而诱发细胞凋亡. 展开更多
关键词 端粒 末端转移酶 核糖核苷 反义 细胞周期 K562细胞系
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Effects of Ghrelin Antisense Inhibition on VEGF and Its Receptor Flt-1 mRNA Expression
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作者 姜丽萍 祝啸先 +10 位作者 游存厚 乌日古木拉 王芳 张文娟 刘德斌 杜晨光 李海军 包福祥 赵鹏伟 鲍庆江 曹贵方 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2009年第5期45-48,共4页
[ Objective] This study was to investigate the effect of VEGF and its receptor Fit-1 mRNA expression in Mongolia sheep umbilical vein endothelial cells by ghrelin antisense inhibition. [ Method] Experiments were divid... [ Objective] This study was to investigate the effect of VEGF and its receptor Fit-1 mRNA expression in Mongolia sheep umbilical vein endothelial cells by ghrelin antisense inhibition. [ Method] Experiments were divided into 4 groups: group Ⅰ (blank control group) ; group Ⅱ (liposome group) ; group Ⅲ (SCON group: 20 μmol/L sense oligonucleotide) ; group Ⅳ (ASCON: 20 μmol/L antisense oligonucleotide). VEGF and its receptor Fit-1 mRNA expression changes were detected by using real-time fluorescence quantitative detection after 24, 36 and 48 h. [ Result] The expression of VEGF mRNA in group Ⅰ, group Ⅱ were insignificantly different at higher expression levels, and did not change significantly with the time; the expression of VEGF mRNA in group Ⅲ assumed a slight decrease, but there were no significant differences between group I and group Ⅱ (P 〉0.05), the expression of VEGF mRNA in group Ⅳ(antisense oligonucleotide group ) decreased significantly (P 〈 0.05) ; the expression of VEGF receptor FLT-1 mRNA was similar to that of VEGF. [ Conclusion] Antisense inhibition ghrelin has a downward effect to the expression of VEGF and its receptor Fit-1 the mRNA. 展开更多
关键词 GHRELIN Vascular endothelial growth factor RECEPTORS OLIGONUCLEOTIDES ANTISENSE
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MMP-9ASODN对肺腺癌A549细胞增殖与凋亡的影响及其机制初步探讨
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作者 何碧秀 胡成平 +1 位作者 周东波 李雪兵 《中国医师杂志》 CAS 2008年第8期-,共5页
目的 探讨基质金属蛋白酶-9反义寡核苷酸(MMP-9ASODN)对肺腺癌A549细胞增殖与凋亡的影响,并初步探讨其机制.方法 MTT法检测MMP-9ASODN转染对A549细胞生长增殖的影响;流式细胞术检测MMP-9ASODN转染对A549细胞周期和凋亡比率的影响;RT-PC... 目的 探讨基质金属蛋白酶-9反义寡核苷酸(MMP-9ASODN)对肺腺癌A549细胞增殖与凋亡的影响,并初步探讨其机制.方法 MTT法检测MMP-9ASODN转染对A549细胞生长增殖的影响;流式细胞术检测MMP-9ASODN转染对A549细胞周期和凋亡比率的影响;RT-PCR法与Western blot法分别检测MMP-9ASODN转染对A549细胞内MMP-9mRNA及蛋白表达的影响.结果 在一定范围内,MMP-9ASODN对A549细胞生长抑制呈浓度和时间依赖性,反叉寡核苷酸浓度为600 nmo/L作用48 h时其抑制作用最明显;MMP-9ASODN转染A549细胞48 h后G1期细胞数明显增多,S期细胞数明显减少,G2期细胞数则无明显变化,其凋亡百分比明显升高;与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);细胞内MMP-9mRNA及其蛋白的相对表达量明显低于对照组(P<0.01).结论 MMP-9ASODN转染能够有效能够抑制肺腺癌A549细胞的增殖同时诱导其凋亡,其机制可能是通过下调MMP-9mRNA及蛋白的表达. 展开更多
关键词 明胶酶B 核糖核苷 反义 肺肿瘤 细胞增殖 细胞凋亡
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