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Survivin反义核酸结合位点的体外筛选及鉴定
1
作者
郑丽端
童强松
+4 位作者
杨渝珍
陈方敏
曾甫清
汪良
董继华
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期215-220,共6页
合成 2 0mer随机寡核苷酸文库 ,与体外转录出的全长survivincRNA杂交 ,RNaseH酶切割后 ,经引物延伸、放射自显影 ,共筛选出 13个针对survivin基因的反义结合位点 (antisenseaccessiblesites ,AAS) .运用RNADraw软件分析、选定具有显著...
合成 2 0mer随机寡核苷酸文库 ,与体外转录出的全长survivincRNA杂交 ,RNaseH酶切割后 ,经引物延伸、放射自显影 ,共筛选出 13个针对survivin基因的反义结合位点 (antisenseaccessiblesites ,AAS) .运用RNADraw软件分析、选定具有显著茎环结构的 4个位点 ,合成互补性反义寡核苷酸AS ODN1、AS ODN2 、AS ODN3 、AS ODN4并转染高表达survivin基因的胃癌细胞株MKN 4 5 .逆转录聚合酶链反应和Western印迹检测发现MKN 4 5细胞的survivinmRNA和蛋白水平均有显著的下降 ;MTT比色法证实 6 0 0nmol LAS ODN1~AS ODN4转染 2 4h后细胞生长受到明显抑制 ,透射电镜、annexinⅤ FITC和PI双染色流式细胞术均检测到细胞凋亡 .说明运用随机寡核苷酸文库 RNaseH酶切割与计算机分析相结合的方法 ,在体外有效筛选出survivin的反义核酸结合位点 ,其相应的反义寡核苷酸能阻断survivin基因的生物学功能 .
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关键词
SURVIVIN基因
反义结合位点
随机寡核苷酸文库
基因表达
下载PDF
职称材料
反义核酸技术应用难点及研究进展
被引量:
2
2
作者
易浔飞
兰小鹏
《生物技术通讯》
CAS
2007年第4期655-659,共5页
反义核酸技术已被广泛用于治疗药物、药物靶点确认、探知病理基因的表达。目前对其作用原理的研究集中于其被吸收入细胞的机制、在细胞内的分布、反义核酸序列的最佳长度和性质,并针对体内可能抑制反义核酸活性的影响因素,采取了各种相...
反义核酸技术已被广泛用于治疗药物、药物靶点确认、探知病理基因的表达。目前对其作用原理的研究集中于其被吸收入细胞的机制、在细胞内的分布、反义核酸序列的最佳长度和性质,并针对体内可能抑制反义核酸活性的影响因素,采取了各种相应的反义核酸优化技术,如对反义核酸的化学修饰、联结高效的转运载体、确定最佳的反义结合位点等,通过这些技术来提高其体内稳定性、跨细胞转运的效率,识别靶序列的特异性,以获得更多更好的反义药物投入实用。
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关键词
反义
核酸
反义
寡脱氧核苷酸
RNA干扰
核酶
反义结合位点
下载PDF
职称材料
用全长基因寻靶技术筛选反义寡核苷酸药物
3
作者
刘韧
陈忠斌
+2 位作者
杨长春
孙偶军
王升启
《中国药理通讯》
2003年第3期61-61,共1页
关键词
全长基因寻靶技术
药物筛选
反义
寡核苷酸药物
靶基因
反义结合位点
下载PDF
职称材料
题名
Survivin反义核酸结合位点的体外筛选及鉴定
1
作者
郑丽端
童强松
杨渝珍
陈方敏
曾甫清
汪良
董继华
机构
华中科技大学同济医学院附属协和医院病理科
华中科技大学同济医学院附属协和医院外科
华中科技大学同济医学院生物化学与分子生物学教研室
华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第2期215-220,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目 (No .3 0 2 0 0 2 84)
华中科技大学科研基金资助项目~~
文摘
合成 2 0mer随机寡核苷酸文库 ,与体外转录出的全长survivincRNA杂交 ,RNaseH酶切割后 ,经引物延伸、放射自显影 ,共筛选出 13个针对survivin基因的反义结合位点 (antisenseaccessiblesites ,AAS) .运用RNADraw软件分析、选定具有显著茎环结构的 4个位点 ,合成互补性反义寡核苷酸AS ODN1、AS ODN2 、AS ODN3 、AS ODN4并转染高表达survivin基因的胃癌细胞株MKN 4 5 .逆转录聚合酶链反应和Western印迹检测发现MKN 4 5细胞的survivinmRNA和蛋白水平均有显著的下降 ;MTT比色法证实 6 0 0nmol LAS ODN1~AS ODN4转染 2 4h后细胞生长受到明显抑制 ,透射电镜、annexinⅤ FITC和PI双染色流式细胞术均检测到细胞凋亡 .说明运用随机寡核苷酸文库 RNaseH酶切割与计算机分析相结合的方法 ,在体外有效筛选出survivin的反义核酸结合位点 ,其相应的反义寡核苷酸能阻断survivin基因的生物学功能 .
关键词
SURVIVIN基因
反义结合位点
随机寡核苷酸文库
基因表达
Keywords
survivin gene, antisense accessible sites,random oligonucleotide library, gene expression
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
Q52 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
反义核酸技术应用难点及研究进展
被引量:
2
2
作者
易浔飞
兰小鹏
机构
福建医科大学福总临床医学院全军医学检验研究所
出处
《生物技术通讯》
CAS
2007年第4期655-659,共5页
基金
福建省科技厅国际合作重点项目(2004I012)
文摘
反义核酸技术已被广泛用于治疗药物、药物靶点确认、探知病理基因的表达。目前对其作用原理的研究集中于其被吸收入细胞的机制、在细胞内的分布、反义核酸序列的最佳长度和性质,并针对体内可能抑制反义核酸活性的影响因素,采取了各种相应的反义核酸优化技术,如对反义核酸的化学修饰、联结高效的转运载体、确定最佳的反义结合位点等,通过这些技术来提高其体内稳定性、跨细胞转运的效率,识别靶序列的特异性,以获得更多更好的反义药物投入实用。
关键词
反义
核酸
反义
寡脱氧核苷酸
RNA干扰
核酶
反义结合位点
Keywords
antisensenucleic acids
antisense oligodeoxynucleotide
RNA interference
ribozyme
antisense accessible site
分类号
Q75 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
用全长基因寻靶技术筛选反义寡核苷酸药物
3
作者
刘韧
陈忠斌
杨长春
孙偶军
王升启
机构
第三军医大学野战外科研究所
军事医学科学院放射医学研究所
出处
《中国药理通讯》
2003年第3期61-61,共1页
关键词
全长基因寻靶技术
药物筛选
反义
寡核苷酸药物
靶基因
反义结合位点
分类号
R965.1 [医药卫生—药理学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Survivin反义核酸结合位点的体外筛选及鉴定
郑丽端
童强松
杨渝珍
陈方敏
曾甫清
汪良
董继华
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
0
下载PDF
职称材料
2
反义核酸技术应用难点及研究进展
易浔飞
兰小鹏
《生物技术通讯》
CAS
2007
2
下载PDF
职称材料
3
用全长基因寻靶技术筛选反义寡核苷酸药物
刘韧
陈忠斌
杨长春
孙偶军
王升启
《中国药理通讯》
2003
0
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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