壳寡糖诱导转反义mapk基因烟草的TMV抗性和PAL活性研究

壳寡糖具有诱导植物对病原物防御反应的作用,而PAL活性的升高通常被认为是发生抗性反应的标志之一.本文以mapk基因受到反义抑制的转基因枯斑三生烟草为试材,比较了壳寡糖诱导后转基因型和野生型烟草的PAL活性变化及对TMV抗性的变化.由实验结果初步推测,在壳寡糖诱导的植物抗性信号通路中,mapk可能为PAL的一个重要的上游基因,同时mapk在烟草抗TMV信号转导中亦为一个重要组分.

反义MAPK寡核苷酸对AngⅡ及EGF诱导的心肌成纤维细胞增殖的抑制效应

血管活性肽和生长因子是性质不同且胞浆头端信号通路各异的两种具有丝裂原活性的物质。本文研究丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ） 在血管紧张素Ⅱ（Ａｎｇ Ⅱ） 和表皮生长因子（ＥＧＦ） 诱导的心肌成纤维细胞（ＦＢ） 分裂反应中的作用及反义ＭＡＰＫ 寡核苷酸的抗分裂作用和机制。结果如下：（１）Ａｎｇ Ⅱ或ＥＧＦ（ 浓度均为１０－ ８ ｍｏｌ／Ｌ） 处理培养新生大鼠ＦＢ２４ ｈ，ＦＢ数增加３９ ％ 和６８ ％ ， ＤＮＡ 合成速率（３Ｈｔｈｙｍｉｄｉｎｅ 掺入法） 增加６０ ％ 和１０２ ％ ；（２）ＦＢ 经Ａｎｇ Ⅱ（５ｍｉｎ） 或ＥＧＦ（１０ ｍｉｎ） 处理后， ＭＡＰＫ活性（γ３２Ｐ掺入法） 分别增加２０２ ％ 和３０５ ％ ； 磷酸化ＭＡＰＫ蛋白含量（ 免疫印迹法） 增加５４５ ％ 和６４６ ％ ；（３） 脂质体转染法将反义ＭＡＰＫ 寡脱氧核苷酸（ＯＤＮ） 导入ＦＢ， ＭＡＰＫ 蛋白表达显著被抑制；ＡｎｇⅡ或ＥＧＦ诱导的ＦＢＤＮＡ合成速率比脂质体对照组分别降低５８ ％ 和４６ ％ ， 细胞数降低３８ ％ 和４４％ ； 磷酸化ＭＡＰＫ含量降低８５ ％ 和９０ ％ ，ＭＡＰＫ活性降低７４－２％ 和６５－９％ 。结果提示， 在Ａｎｇ Ⅱ或ＥＧＦ诱导的心肌ＦＢ分裂反应中均有ＭＡＰ?